Главная страница  |  Описание сайта  |  Контакты
ШТАММ БАКТЕРИЙ BRUCELLA MELITENSIS БИОВАРА I, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИВАЛЕНТНОЙ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ К БРУЦЕЛЛАМ
ШТАММ БАКТЕРИЙ BRUCELLA MELITENSIS БИОВАРА I, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИВАЛЕНТНОЙ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ К БРУЦЕЛЛАМ

ШТАММ БАКТЕРИЙ BRUCELLA MELITENSIS БИОВАРА I, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИВАЛЕНТНОЙ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ К БРУЦЕЛЛАМ

Патент Российской Федерации
Суть изобретения: Использование: микробиология, получение поливалентной гипериммунной сыворотки к бруцеллам, иммуноглобулин диагностический бруцеллезный пероксидазный сухой, обнаружение бруцеллезного микроба, иммуноферментный анализ. Сущность изобретения: штамм Brucella meliten SiS И-297 выделен от больного, не диссоциирует, агглютинабелен - агглютинируется поливалентной бруцеллезной сывороткой /до титра 1: 3200/, моносывороткой антимелитензис /1: 160/, моносывороткой антиабортус не агглютинируется. Антигенные свойства - при иммунизации кроликов вызывает образование специфических антител. Сыворотка положительно реагирует в ИФА 1:1827889 ± 155887 . Штамм Brucella meliten SiS И-297 депонирован в коллекции живых культур лаборатории бруцеллеза НИИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи, под. N 791.
Поиск по сайту

1. С помощью поисковых систем

   С помощью Google:    

   С помощью Яндекс:  

2. Экспресс-поиск по номеру патента


введите номер патента (7 цифр)

3. По номеру патента и году публикации

2000000 ... 2099999   (1994-1997 гг.)

2100000 ... 2199999   (1997-2003 гг.)
Номер патента: 2005781
Класс(ы) патента: C12N1/20, A61K39/10
Номер заявки: 4943598/13
Дата подачи заявки: 06.06.1991
Дата публикации: 15.01.1994
Заявитель(и): Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока
Автор(ы): Лаукнер И.В.; Захлебная О.Д.
Патентообладатель(и): Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока
Описание изобретения: Изобретение относится к микробиологии и может найти применение при получении иммуноглобулина с диагностического бруцеллезного пероксидазного сухого, используемого при проведении иммуноферментного анализа.
Известен референтный штамм Brucella melitensis 16M, обладающий характерными для данного рода культурально-морфологическими и биологическими свойствами.
Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому положительному эффекту является штамм Brucella melitensis 565, ранее используемый в сочетании со штаммом Brucella abortus 146 для получения поливалентной сыворотки.
Недостатком вышеназванных штаммов является содержание в них шероховатых колоний более 8% , что не позволяет использовать их для получения сыворотки к S-антигенам.
Целью изобретения является изыскание штамма, находящегося в стойкой S-форме с устойчивой вирулентностью для замены штамма Brucella melitensis 565.
Штамм Brucella melitensis N И-297 выделен от больного, депонирован в коллекции живых культур лаборатории бруцеллеза научно-иссследовательского института эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи АМН СССР (НИИЭМ) под N 791 и характеризуется следующими культурально-морфологическими и физиолого-биохимическими признаками.
Культурально-морфологические признаки. Мелкие полиморфные коккобациллы размером 0,4-0,8х0,4-2,2 мкм, встречаются по одной, реже в коротких цепочках. Спор и капсул не образуют. Неподвижные. Грамотрицательные. На бульоне Мартена рН 6,8 при 37оС через 48 ч дают стойкое равномерное помутнение. На агаре Мартена с добавлением 1% глюкозы и 1,5% глицерина рН 6,8 образуют выпуклые колонии правильной округлой формы с равными краями, гладкой поверхностью, влажные, маслянистые, белесоватые при падающем и янтарно-желтые в проходящем свете, диаметром 2-3 мм.
Физиолого-биохимические признаки. Аэроб. Температурный диапазон роста 20-40оС. Оптимальная температура роста 37оС. Оптимум рН 6,6-7,4. Каталозоположительный. Индол не образует. Нитраты восстанавливает до нитритов. Обладает высокой уреазной активностью (возникает покраснение среды Кристенсена через 5 мин), не продуцирует сероводород, не лизируется фагом "Тб" (RTД˙104RTД), не диссоциирует, находится в стойкой S-форме, резистентен к разведениям тиотина 1: 25, 1: 50, 1: 100 тысяч) и фуксина (1: 50 и 1: 100 тысяч). Не требует для культивирования повышенного содержания СО2. Агглютинабелен - агглютинируется поливалентной сывороткой до титра 1: 3200 (с. 33; 1267, годн. 06.91 г. ) и моносывороткой антимелитензис; моносывороткой антиабортус не агглютинируется.
Хранение штамма осуществляют в лиофильно-высушенном состоянии в ампулах. После лиофилизации все свойства штамма сохраняются. Многократные пересевы и лиофилизация не влияют на антигенные свойства штамма (срок наблюдения семь лет).
Антигенные свойства. При иммунизации кроликов вызывает образование специфических антител.
Штамм Brucellа melitensis N И-297 отличается от штамма прототипа (Brucella melitensis N 565) отсутствием в суспензии шероховатых колоний и устойчивой вирулентностью.
Сущность изобретения поясняется следующим конкретным примером использования штамма Brucellа melitensis N И-297.
Кроликов породы Шиншилла массой 2,5-3 кг иммунизируют взвесью живых клеток в 0,85% -ном растворе натрия хлорида 48-часовой агаровой культуры бруцелл штаммов Brucella melitensis N И-297 и Brucella abortus 146. Животным вводят подкожно трехкратно в четыре точки спины вдоль позвоночника 0,5 мл (2 ˙109 микробов), 0,75 мл (3˙ 109 микробов), 1,0 мл (4 ˙109 микробов) смеси в равных количествах культур с равным объемом полного адъюванта Фрейнда с недельным интервалом. Через две недели после последней инъекции вводится подкожно в область внутренней верхней трети поверхности бедра 1,0 мл (4 ˙109 микробов) смеси культур в 0,85% растворе натрия хлорида. Через 14 дней после окончания иммунизации кроликов обескровливают. Сыворотку инактивируют прогреванием при 56оС в течение 30 мин и добавлением мертиолата натрия 1: 10000. Агглютинирующая сыворотка бесцветная, слегка опалесцирующая, обладает высокой активностью и специфичностью. Хранится при 4оС в лиофилизированном виде в запаянных ампулах. Специфический титр сыворотки при ИФА составляет 1: 1827889± 155817.
Штамм Brucella melitensis N И-297 и Brucella abortus 146 использовались для получения двадцати серий кроличьей поливалентной гипериммунной сыворотки к бруцеллам.
Сыворотку используют для получения иммуноглобулина с диагностического бруцеллезного пероксидазного сухого. (56) Joint FAO/WHO Expert Committee on Brucellosis. - Sixth Report World Health Organization. Technical Serlеs 740, World Health Organization, Geneva, 1986. - 133 p.
Методические рекомендации по обнаружению возбудителя бруцеллеза иммуноферментным методом (С. П. Меринов, Т. Ю. Загоскина, Е. П. Голубинский, О. Д. Захлебная и др. - Иркутск. - 1984. - 7 с.
Формула изобретения: Штамм бактерий Brucella melitensis биовара I N И-297 ГИСК N 791, используемый для получения поливалентной гипериммунной сыворотки к бруцеллам.