Forbidden

You don't have permission to access /zzz_siteguard.php on this server.

ШТАММ БАКТЕРИЙ BRUCELLA OVIS, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ R- БРУЦЕЛЛЕЗНЫХ ДИАГНОСТИКУМОВ - Патент РФ 2051963
Главная страница  |  Описание сайта  |  Контакты
ШТАММ БАКТЕРИЙ BRUCELLA OVIS, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ R- БРУЦЕЛЛЕЗНЫХ ДИАГНОСТИКУМОВ
ШТАММ БАКТЕРИЙ BRUCELLA OVIS, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ R- БРУЦЕЛЛЕЗНЫХ ДИАГНОСТИКУМОВ

ШТАММ БАКТЕРИЙ BRUCELLA OVIS, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ R- БРУЦЕЛЛЕЗНЫХ ДИАГНОСТИКУМОВ

Патент Российской Федерации
Суть изобретения: Использование: микробиология, специфический бруцеллезный R-антиген, диагностическая сыворотка, R-эритроцитарный диагностикум, бруцеллоз. Сущность изобретения: штамм Brucella ovis И-107 выделен из семенников барана, находится в стойкой R-форме, инагглютинабелен и инагглютиногенен, так как реакции агглютинации с поливалентной бруцеллезной и моноспецифическими сыворотками (антиабортус), антимелитензис) отрицательные, а заражение этим штаммом подопытных животных не вызывает у них образование бруцеллезных S-антител. Штамм Brucella ovis И-107 депонирован в коллекции живых культур лаборатории бруцеллеза НИИЭМ им.Н.Ф.Гамалеи под N 792. Антигенные свойства: при иммунизации кроликов вызывает образование специфических R-антител. Средний титр антител в ИФА - 1 : 1638400 ± 126300, в РИД 1 : 16 ± 8,3. R-антиген применяется для конструирования R-бруцеллезного эритроцитарного диагностикума, диагностические титры которого колеблются от 1 : 800 до 1 : 3200.
Поиск по сайту

1. С помощью поисковых систем

   С помощью Google:    

2. Экспресс-поиск по номеру патента


введите номер патента (7 цифр)

3. По номеру патента и году публикации

2000000 ... 2099999   (1994-1997 гг.)

2100000 ... 2199999   (1997-2003 гг.)
Номер патента: 2051963
Класс(ы) патента: C12N1/20, A61K39/10
Номер заявки: 5057381/13
Дата подачи заявки: 31.07.1992
Дата публикации: 10.01.1996
Заявитель(и): Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока
Автор(ы): Репина Л.П.; Калиновский А.И.; Загоскина Т.Ю.
Патентообладатель(и): Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока
Описание изобретения: Изобретение относится к микробиологии и может использоваться как штамм-продуцент специфических бруцеллезных R-антигенов, необходимых для получения кроличьей диагностической сыворотки к бруцеллам в R-форме, а также как антиген для конструирования R-эритроцитарного диагностикума. Известен референтный штамм B. ovis 63/290, обладающий характерными для данного рода культурально-морфологическими и биохимическими свойствами [1]
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту является штамм B.ovis И-61, используемый как антиген для конструирования R-эритроцитарного диагностикума [2, 3]
Недостатком вышеназванных штаммов является содержание в них клеток в S-форме, что не позволяет использовать их для получения R-специфического антигена.
Целью изобретения является изыскание штамма, находящегося в стойкой R-форме и продуцирующего специфический R-бруцеллезный антиген.
Штамм Brucella ovis И-107 выделен из семенников барана, депонирован в коллекции живых культур Научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН под N 792 и характеризуется следующими культурально-морфологическими и физиолого-биохимическими признаками.
Культурально-морфологические признаки. Мелкие полиморфные коккобациллы размером 0,4 х 0,8-0,4-2,2 мкм с выраженным полиморфизмом. Спор и капсул не образуют. Неподвижные. Грамотрицательные. На бульоне Мартена рН 6,8 при 37оС через 48 ч образуется плотный сероватый осадок с просветлением самой жидкости. На агаре Мартена (рН 6,8) с добавлением 1% глюкозы и 1,5% глицерина и 10-15% бычьей или лошадиной сыворотки образуют выпуклые колонии правильной округлой формы с ровными краями, гладкой поверхностью, влажные, маслянистые, белесоваты при падающем и янтарно-желтые в проходящем свете диаметром 2-3 мм.
Физиолого-биохимические признаки. Анаэроб растет в присутствии повышенного содержания СО2. Температурный диапазон роста 20-40оС. Оптимальная температура роста 37оС. Оптимум Ph 6,6-7,4.
Штамм не выделяет сероводород, не лизируется бактериофагом Тб, растет на средах с тионином в разведениях краски 1 50.000, 1 100.000. На питательных средах с добавлением основного фуксина, сафранина, метилвиолета рост бруцелл отсутствует. Уреазной и бактериоциногенной активностью не обладает. Штамм инагглютинабельный и инагглютиногенный, так как реакции агглютинации с поливалентной бруцеллезной и моноспецифическими сыворотками (антиабортус, антимелитензис) отрицательные, а заражение этим штаммом подопытных лабораторных животных не вызывает у них образование бруцеллезных S-антител.
Вирулентность штамма низкая: введение морским свинкам штамма в дозе 32 х 109 микробов не вызывает генерализованной формы инфекции, т.е. установить МИД невозможно. ИИ равен 30,1% а ИД50 соответствует 3,1 х 109 микробам. Хранение штамма осуществляют в лиофильном состоянии в ампулах. После лиофилизации все свойства штамма сохраняются.
Антигенные свойства. При иммунизации кроликов вызывает образование специфических R-антител.
Штамм Brucella ovis И-107 отличается от штамма прототипа B. ovis 63/290 отсутствием в популяции клеток в S-форме, а также устойчивыми биологическими свойствами.
Сущность изобретения поясняется следующим конкретным примером использования штамма B. ovis И-107.
П р и м е р. Бактерии смывают 0,9%-ным раствором хлорида натрия и однократно отмывают этим же раствором. Микробную массу инактивируют трехкратным объемом охлажденного до 4оС ацетона в течение 6 сут. со сменой ацетона через 48 ч и контролируют специфическую стерильность.
При изучении отдельных антигенных комплексов наиболее перспективным для конструирования диагностических препаратов оказались водно-солевые фракции целых клеток штамма B. ovis И-107 [3]
Получение водно-солевых экстрактов. Водно-солевые АГ получают экстрагированием инактивированных клеток штамма B. ovis И-107 теплым 10%-ным раствором хлорида натрия в течение 4 ч при 37оС, непрерывно встряхивая. Суспензию центрифугируют (6˙103 ˙q, 30 мин). Супернатант диализуют против дистиллированной воды, лиофилизируют и хранят при 4оС.
Таким образом, штамм может быть использован для получения растворимых антигенов методом водно-солевой экстракции, которые используются для получения кроличьих высокотитражных R-сывороток. Средний титр которых в ИФА 1 1638400±126300, в РИД 1 16±8,3. Также водно-солевой R-антиген применяется для создания R-бруцеллезного эритроцитарного диагностикума, диагностические титры которого колеблются от 1 800 до 1 3200.
Формула изобретения: Штамп бактерий Brucella Ovis НИИИЭМ N 792, используемый для получения R-бруцеллезных диагностикумов.