Forbidden

You don't have permission to access /zzz_siteguard.php on this server.

ШТАММ АКТИНОМИЦЕТА STREPTOMYCES AVERMITILIS - ПРОДУЦЕНТ АВЕРМЕКТИНОВ - Патент РФ 2054483
Главная страница  |  Описание сайта  |  Контакты
ШТАММ АКТИНОМИЦЕТА STREPTOMYCES AVERMITILIS - ПРОДУЦЕНТ АВЕРМЕКТИНОВ
ШТАММ АКТИНОМИЦЕТА STREPTOMYCES AVERMITILIS - ПРОДУЦЕНТ АВЕРМЕКТИНОВ

ШТАММ АКТИНОМИЦЕТА STREPTOMYCES AVERMITILIS - ПРОДУЦЕНТ АВЕРМЕКТИНОВ

Патент Российской Федерации
Суть изобретения: Использование: микробиологическая промышленность, касается производства антипаразитарных препаратов, действующим веществом которых являются авермектины. Сущность изобретения: штамм Streptomyces avermitilis-ВНИИСХМ-54 получен путем естественного отбора из популяции штамма Streptomyces avermitilis-51. Штамм N 54 продуцирует в два раза больше авермектинов по сравнению с известным штаммом. Процентное содержание наиболее активного вещества авермектина В1а достигает более 35%. Штамм Streptomyces avermitilis-ВНИИСХМ-54 депонирован в коллекции микроорганизмов ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии (Санкт-Петербург) под номером Streptomyces avermitilis-ВНИИСХМ-54. 2 табл., 1 ил.
Поиск по сайту

1. С помощью поисковых систем

   С помощью Google:    

2. Экспресс-поиск по номеру патента


введите номер патента (7 цифр)

3. По номеру патента и году публикации

2000000 ... 2099999   (1994-1997 гг.)

2100000 ... 2199999   (1997-2003 гг.)
Номер патента: 2054483
Класс(ы) патента: C12P1/06, C12P1/06, C12R1:465
Номер заявки: 93057665/13
Дата подачи заявки: 28.12.1993
Дата публикации: 20.02.1996
Заявитель(и): Товарищество с ограниченной ответственностью Научно- производственное объединение "Фармбиомед"
Автор(ы): Дриняев Виктор Антонович[RU]; Березкина Надежда Евгеньевна[RU]; Кругляк Елена Борисовна[RU]; Мосин Владимир Александрович[RU]; Юркив Василий Андреевич[RU]; Лисовенко Василий Трофимович[UA]; Зиновьев Олег Анатольевич[RU]
Патентообладатель(и): Товарищество с ограниченной ответственностью Научно- производственное объединение "Фармбиомед"
Описание изобретения: Изобретение относится к получению биологически-активных веществ путем микробиологического синтеза, а именно к производству антипаразитарных препаратов на основе авермектинов.
Известен штамм продуцент авермектинов Streptomyces avermitilis ATCC 31372, продуцирующий в среднем 500 мкг/мл авермектинов.
Цель изобретения создание штамма, продуцирующего повышенные количества авермектинов с преобладающим содержанием в авермектиновом комплексе авермектинов серии В1 и В) наиболее активных в биологическом отношении.
Цель достигается получением штамма Streptomyces avermitilis ВНИИСХМ-54, продуцирующего в среднем 1500 мкг/мл авермектинов при размахе изменчивости 1200-1800 мкг/мл. Предлагаемый штамм был получен путем направленной селекции из популяции штамма Streptomyces avermitilis-51. Отбор активных вариантов проводили по двум признакам: по способности к авермектинообразованию (оценивалась способность вариантов продуцировать весь авермектиновый комплекс); и по способности к биосинтезу авермектинов серии В1 (оценивалась способность вариантов продуцировать только авермектин В и авермектин В). Схема получения штамма представлена на чертеже.
На чертеже приведено общее содержание авермектинов (мкг/мл) процентное содержание авермектинов серии В1 в авермектиновом комплексе (%).
Предлагаемый штамм характеризуется следующими культурально-морфологическими и физиологическими признаками.
Микроморфологические признаки штамма.
Культура имеет спороносцы в виде правильных спиралей.
Макроморфологические и культуральные признаки.
На 2% -ном глюкозокартофельном агаре на 14-21 день роста при 28оС, рН 6,8-7,2 образуются колонии диаметром 10 мм со светло-серым воздушным мицелием и темно-каштановой обратной стороной колонии. В популяции всегда имеется до 5% светло-серых колоний с бежевой обратной стороной. Край колоний неровный с белым ободком. Поверхность колонии складчатая. В центре колонии имеется возвышение, иногда с кратером. К десятому дню роста на поверхности колонии образуются белые бархатистые включения.
В табл. 1 представлены данные о цвете воздушного и субстратного мицелия, интенсивности спороношения, а также о наличии или отсутствии растворимых пигментов на различных органических и синтетических агаризованных средах.
Сведения о физиолого-биохимических признаках суммированы в табл. 2.
Максимальное накопление авермектинов наблюдается на 5-7-е сутки при 28оС и скорости растворения кислорода 1,0-1,2 мМоль О2/л/мин.
Антагонистические свойства.
Мицелиальные экстракты вызывают гибель нематод, относящихся к родам: Haemonehus, Trichostronglus, Ostrertagis, Nematodimes, Coopema, Ascams, Bunostomum, Oesophagostonum, Chabertia, Triehuris, Strongylus, Trichonema, Dictyocanlus, Capillaria, Meterakis, Toxocara, Oxyuris, Ancylostama, Uncinaria, Toxascaris, Parascaris, Ascoridia.
Также их действие губительно для клещей, афидов, вшей, блох, мух, тараканов, двукрылых и прямокрылых вредителей, платяной моли, ковровых и обойных жучков.
Предлагаемый штамм иллюстрируется следующим примером.
Споры штамма S. avermitilis-ВНИИСХМ-54 выращивают на овсяном агаре в течение 10 суток при 28 ± 1оС. Кусочек агаровой среды со спорами вносили в качалочные колбы емкостью 750 мл, содержащие 75 мл среды следующего состава, глюкоза 4,0; соевая мука 0,6; белково-витаминный концентрат 1,0; кукурузный экстракт 0,3; СаСО3 0,1; К2НРО4 0,06; вода водопроводная. Глюкозу стерилизуют отдельно при 0,5 атм 30 мин, она вносится в колбы в момент засева. Остальные компоненты стерилизуют при 0,8 атм 40 мин. Значение рН до стерилизации 6,2.
Колбы устанавливают на качалку с числом оборотов 220 в минуту и выращивают инокулят при температуре 28 ± 1оС в течение 24 ч. Затем инокулят в количестве 5% передают в колбы с ферментационной средой следующего состава, глюкоза 7,0; соевая мука 0,6; белково-витаминный концентрат 1,0; кукурузный экстракт 0,3; СаСО3 0,1; К2НРО4 0,06; вода водопроводная. Значение рН до стерилизации 6,2. Глюкозу стерилизуют при 0,5 атм 30 мин, а остальные компоненты при 0,8 атм 40 мин. Глюкозу вносят в колбы в момент засева среды инокулятом.
Ферментацию проводили в течение 168 ч при 28оС. Авермектины выделяли из мицелия следующим образом. Вначале отделяли мицелий на центрифуге при 3000 об/мин в течение 10 мин. К влажному осадку, полученному из 10 мл культуральной жидкости, добавляли 10 мл охлажденной водопроводной воды, тщательно перемешивали при 3000 об/мин 5 мин. К влажному промытому осадку добавляли 10 мл этанола и проводили экстракцию авермектинов при комнатной температуре при постоянном перемешивании в течение 20 мин. После отделения мицелия при 3000 об/мин в течение 5 мин в центрифугах определяли общее содержание и компонентный состав авермектинов методом тонкослойной хроматографии с количественной оценкой метаболитов в пятнах на хроматограмме с помощью сканирующего спектрофотометра КМ-3 фирмы "Opton" (Австрия) при длине волны 244 нм (максимуме поглощения авермектинов). Хроматографическое разделение осуществляли на пластинах силикагеля G-60 фирмы "Merk" без люминофора в системе растворителей гексан: ацетон:метанол (14,0:6,0:0,5). Концентрацию авермектинов определяли по уравнениям калибровочных кривых для авермектинов А2 и В1.
Среднее содержание авермектинов в мицелии S. avermitilis-ВНИИСХМ-54 составляет 1500 мкг/мл при размахе изменчивости 1200-1800 мкг/мл. Компонентный состав авермектинов следующий, группа А1 + А) 18,0 ± 1,85; А2) 26,32 ± 1,62; В1) 36,75 ± 1,35 и В2+ В) 18,88 ± 1,64.
Известный штамм S. avermitilis-51 продуцирует в среднем 700 мкг/мл авермектинов.
Таким образом, предлагаемый штамм продуцент авермектинов S. avermitilis-ВНИИСХМ-54 позволяет получать авермектинов в два раза больше, чем известный штамм S. avermitilis-51.
Формула изобретения: Штамм актиномицета Streptomyces avermitilis ВНИИСХМ-54 - продуцент авермектинов.