Главная страница  |  Описание сайта  |  Контакты
5-ГИДРОКСИ-3,6-ДИМЕТИЛУРАЦИЛ, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ МЕМБРАНОСТАБИЛИЗИРУЮЩУЮ И АНТИРАДИКАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ
5-ГИДРОКСИ-3,6-ДИМЕТИЛУРАЦИЛ, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ МЕМБРАНОСТАБИЛИЗИРУЮЩУЮ И АНТИРАДИКАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ

5-ГИДРОКСИ-3,6-ДИМЕТИЛУРАЦИЛ, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ МЕМБРАНОСТАБИЛИЗИРУЮЩУЮ И АНТИРАДИКАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ

Патент Российской Федерации
Суть изобретения: Использование: в качестве мембраностабилизирующего и антирадикального средства в медицине. Сущность изобретения продукт: 5-гидрокси-3,6-диметилурацил БФ C6H8N2O3, выход 55,3%. Реагент 1: 6-метилурацил-5-аммонийсульфат. Реагент 2: диметилсульфат. Условия процесса: в воде в присутствии щелочи при 85-95oС. 3 табл.
Поиск по сайту

1. С помощью поисковых систем

   С помощью Google:    

   С помощью Яндекс:  

2. Экспресс-поиск по номеру патента


введите номер патента (7 цифр)

3. По номеру патента и году публикации

2000000 ... 2099999   (1994-1997 гг.)

2100000 ... 2199999   (1997-2003 гг.)
Номер патента: 2066319
Класс(ы) патента: C07D239/60, A61K31/505
Номер заявки: 4917756/04
Дата подачи заявки: 11.03.1991
Дата публикации: 10.09.1996
Заявитель(и): Институт химии Башкирского научного центра Уральского отделения РАН; Башкирский государственный медицинский институт
Автор(ы): Кривоногов В.П.; Мышкин В.А.; Хайбуллина З.Г.; Толстиков Г.А.; Срубилин Д.В.; Муринов Ю.И.; Абдрахманов И.Б.; Вакарица А.Ф.; Алехин Е.К.
Патентообладатель(и): Институт органической химии Уральского отделения РАН; Башкирский государственный медицинский университет
Описание изобретения: Изобретение относится к органической химии, конкретно к новому химическому соединению 5-гидрокси-3,6-диметилурацилу формулы

проявляющему мембраностабилизирующую и антирадикальную активность.
Это соединение может найти применение в медицине.
Изучаемое соединение и его свойства в литературе не описаны.
Известное соединение аналогичного строения и назначения ионол (2,6-ди-трет-бутил-4-метилфенол) (1) как ингибитор перекисного окисления липидов в биологических мембранах формулы

даже при высокой действующей дозе не обеспечивает достаточную мембраностабилизирующую и антирадикальную активность [1]
Новое соединение 5-гидрокси-3,6-диметилурацил характеризуется более выраженной мембраностабилизирующей и антирадикальной активностью. Его получают в условиях известного способа [2] путем обработки 6-метилурацил-5-аммоний-сульфата в щелочной среде, где молярное соотношение компонентов соответственно равно 1:3:3, при температуре 85-95oC в течение 2 ч с последующей фильтрацией выпавших кристаллов. Выход целевого продукта составляет 55,3%
5-Гидрокси-3,6-диметилурацил малорастворимое в воде и нерастворимое в органических растворителях соединения.
По данным элементного анализа для C6H8N2O3. Молек. вес 156,14.
Вычислено C 46,15; H 5,16; N 17,94; O 30,74\
Найдено C 45,95; H 5,10; N 17,80.
Структура 5-гидрокси-3,6-диметилурацила доказана УФ, ИК-спектрами. Так, максимум поглощения УФ спектра с изменением рН среды от 1 до 12 дает батохромный сдвиг на 34 нм.
pH 12 λmax 313,50; λmin 276,25
pH 7 λmax 278,65; λmin 245,15
pH 1 λmax 278,65; λmin 245,15 что характерно для урацилов, замещенных по третьему атому азота цикла [3] В ИК-спектре соединения 5-гидрокси-3,6-диметилурацила наблюдаются две интенсивные полосы поглощения в области VC=O (1680, 1720 см-1), характерные для N-алкилурацилов, имеются полосы поглощения в области 1528 νCNNH и 3144 см-1 (VNH), а также полоса поглощения в области 3328 см-1, характерная для OН группы.
Структура подтверждена также данными ЯМР 1H и 13C.
ЯМР 1H (δ, м.д. CDCl3, ТМС): 2,288 (C, 3H, C=C-CH3); 3,408 (c, 3H, N-CH3).
ЯМР 13C: 159,99 (C4=O); 150,33 (C2=O); 130,36 (=CCH3); 129,18 (=C5-OH); 31,72 (CH3-N3).
Острая токсичность 5-гидрокси-3,6-диметилурацила определялась на мышах обоего пола массой 20±2 г при однократном введении его вунтрибрюшинно и внутрь. Изучаемое соединение исследовано в диапазоне доз 750-5000 мг/кг. Результаты опытов представлены в табл. 1. Среднесмертная доза (ЛД50), рассчитанная по методу Литчфильда-Уилкоксона, равна 1100 (935±1265) мг/кг при внутрибрюшинном способе введения в организм мышей.
В то же время введение соединения внутрь мышам в дозах 3000-5000 мг/кг не вызывала летальных исходов.
Мембраностабилизирующая и антирадикальная активность 5-гидрокси-3,6-диметилурацила изучалась на крысах-самцах, массой 170-220 г. Исследовали влияние 5-гидрокси-3,6-диметилурацила на интенсивность процессов перекисного окисления липидов. Использовали модель отравления крыс карбофосом. Контрольной группе крыс карбофос вводили однократно в дозе ЛД50 (260 мг/кг внутрижелудочно). Животных опытных групп лечила атропином (5 мг/кг) и дипироксимом (25 мг/кг) внутрибрюшинно: через 0,5 мин, 3 и 6 ч после отравления, или, помимо антидотов на 2, 3 и 4 сутки вводили 5-гидрокси-3,6-диметилурацил по 50 мг/кг. Действие исследуемых препаратов сравнивали с эффективность ионола в дозе 120 мг/кг.
На 14-е сутки после отравления регистрировали биохимические показатели. Объектом биохимических исследований служили миокард и полушария головного мозга крыс. Исследования проводили на 14-е сутки после отравления карбофосом.
Продукты перекисного окисления липидов (ПОЛ) определяли в липидных экстрактах миокарда и полушарий головного мозга. Результаты опытов представлены в табл. 2.
Из данных табл. 2 видно, что содержание диеновых конъюгатов (ДК) в полушариях мозга и миокарда увеличилось в 3,3 и 3,8 раза выше нормы соответственно на 14-е сутки после отравления карбофосом.
Лечение атропином и дипироксимом снизило уровень ДК в полушариях и миокарде по сравнению с нелеченными животными, в то же время он существенно выше, чем у здоровых крыс.
Лечение антиоксидантами (ионолом и производным пиримидина) дополнительно к антидотам было более эффективным, чем применение только атропина и дипироксима. В то же время 5-гидрокси-3,6-диметилурацил был эффективнее ионола: применение ионола нормализовало содержание ЛК в полушариях мозга, но не в миокарде, в то же время эффект 5-гидрокси-3,6-диметилурацила наблюдался в обоих органах. Его эффективная доза равна 50 мг/кг, а аналогичная доза ионола составила 120 мг/кг.
Методом хемилюминесценции исследована антирадикальная активность двух препаратов путем вычисления константы К7 скорости реакции взаимодействия перекисных радикалов этилбензола с молекулами изучаемых соединений (Шляпинтох и др. 1966).
Результаты опытов даны в табл. 3.
Сущность поясняется примерами конкретного выполнения.
Пример 1. 5-Гидрокси-3,6-диметилурацил.
Т трехгорлую колбу емкостью 1000 мл, снабженную механической мешалкой, обратным холодильником, капельной воронкой, загружают 60 г (1,5 моля) едкого натра, заливают 400 мл воды, включают мешалку и перемешивают до растворения едкого натра, полученный раствор охлаждают до 30-40oC, а затем присыпают 119,6 г (0,5 моля), 6-метилурацил-5-аммонийсульфата и перемешивают до растворения. Реакционную смесь охлаждают до 6-15oC и при этой температуре прибавляют по каплям в течение 1 ч 190,5 г (1,51 моля) или 143 мл диметилсульфата. После полного прибавления диметилсульфата температуру бани нагревают в течение 1-2 ч до 85-95oC и при этой температуре перемешивают 2 ч, охлаждают, вливают 200 мл хлороформа, перемешивают 10 мин, кристаллы отфильтровывают на шоттовской воронке, промывают (4х50 мл) водой до нейтральной реакции, ацетоном (2х50 мл), подтягивают водоструйным насосом и получают 43,2 г (0,2767 моля) 55,3% 5-гидрокси-3,6-диметилурацила с Т.пл. > 270oC, мало растворимого в воде, нерастворимого в органических растворителях.
Найдено C 45,95; H 5,10; N 17,80.
Вычислено для С6H8N2O3 C 46,15; H 5,16; N 17,94; O 30,74; M.в. 156,14.
ИК-спектр (d, cм-1): 1096-1256 (≡C-OH,, VCN); 1376 (δs, CH3); 1604, 1680, 1720 (VC=O); 1528 (nCNNH), 3144 (VNH); 3226, 3248 (2VCN); 3328 (OH); 2856, 2880, 2928 (VC=C, Vалиф.CH); 1460 (, CH3).
По данным ТСХ не имеет примеси 5-гидрокси-6-метилурацила.
Пример 2. Мембраностабилизирующая и антирадикальная активность.
5-гидрокси-3,6-диметилурацила изучалась на крысах-самцах массой 170-220 г. Исследовали влияние данного соединения на интенсивность процессов перекисного окисления липидов. Использовали модель отравления крыс карбофосом. Контрольной группе крыс карбофос вводили однократно в дозе ЛД50 (260 мг/кг внутрижелудочно). Животных опытных групп лечили атропином (5 мг/кг и дипироксимом (25 мг/кг) внутрибрюшинно через 0,5 мин, 3 и 6 ч после отравления или, помимо антидотов, на 2, 3 и 4 сутки вводили 5-гидрокси-3,6-диметилурацил по 50 мг/кг.
Действие исследуемого препарата сравнивали с эффективностью ионола в дозе 120 мг/кг.
На 14-е сутки после отравления регистрировали биохимические показатели. Объектом биохимических исследований служили миокард и полушария головного мозга крыс. Исследования проводили на 14-е сутки после отравления карбофосом.
Продукты перекисного окисления липидов (ПОЛ) определяли в липидных экстрактах миокарда и полушарий головного мозга. Экстракцию липидов проводили по методу Фолча смесью метанол-хлороформ в соотношении 1:2. Пробы гомогенизировали на холоду в продутых аргоном реагентах. Липиды определяли гравиметрически, упаривая растворитель на вакуумном роторном испарителе при 50oC. Продукты ПОЛ диеновые конъюгаты определяли спектрофотометрически.
Липиды в концентрации 1 мг/кг растворяли в системе метанолгептан в соотношении 3: 1, спектр поглощения снимали на спектрофотометре СФ-16 в ультрафиолетовой области (максимум поглощения 232 нм).
Различия результатов в сериях "опыт-контроль" считали достоверными при уровне вероятности различий 95% (р <0,05). Результаты опытов представлены в табл. 2.
Они свидетельствуют о значительном увеличении содержания диеновых конъюгатов (ДК) в полушариях мозга (2-6 раза выше нормы) и миокарде (3,2 раза выше нормы) крыс на 14-е сутки после отравления карбофосом.
Лечение атропином и дипироксимом снизило уровень ДК в полушариях мозга и миокарде по сравнению с нелеченными животными, в то же время, он был существенно выше, чем у здоровых крыс.
Лечение антиоксидантами (ионолом и производными пиримидина) дополнительно к антидотам было более эффективным, чем применение только атропина и дипироксима. В то же время 5-гидрокси-3,6-диметилурацил был эффективнее ионола: применение ионола нормализовало содержание ДК в полушариях мозга, но не в миокарде, в то же время эффект исследуемого производного пиримидина наблюдался в обоих органах. Его эффективная доза равна 50 мг/кг, а аналогичная доза ионола составляет 120 мг/кг.
Пример 3. Методом хемилюминесценции исследована антирадикальная активность двух препаратов путем вычисления константы К7 скорости реакции взаимодействия перекисных радикалов этилбензола с молекулами изучаемых соединений. Результаты опытов сведены в табл. 3.
Таким образом, производное пиримидина-5-гидрокси-3,6-диметилурацила обладает выраженной мембраностабилизирующей активностью in vivo. Действующая доза препарата в 2,5 раза меньше, чем у ионола. 5-Гидрокси-3,6-диметилурацил обладает выраженной антирадикальной активностью, сопоставимой действием ионола, он практически не токсичен.
Формула изобретения: 5-Гидрокси-3,6-диметилурацил формулы

проявляющий мембраностабилизирующую и антирадикальную активность.