Главная страница  |  Описание сайта  |  Контакты
3-0-СУКЦИНОИЛ-11-ОКСО-УРСОЛОВАЯ КИСЛОТА И ЕЕ ДИАММОНИЙНАЯ СОЛЬ, ПРОЯВЛЯЮЩАЯ ИММУНОСТИМУЛИРУЮЩУЮ АКТИВНОСТЬ
3-0-СУКЦИНОИЛ-11-ОКСО-УРСОЛОВАЯ КИСЛОТА И ЕЕ ДИАММОНИЙНАЯ СОЛЬ, ПРОЯВЛЯЮЩАЯ ИММУНОСТИМУЛИРУЮЩУЮ АКТИВНОСТЬ

3-0-СУКЦИНОИЛ-11-ОКСО-УРСОЛОВАЯ КИСЛОТА И ЕЕ ДИАММОНИЙНАЯ СОЛЬ, ПРОЯВЛЯЮЩАЯ ИММУНОСТИМУЛИРУЮЩУЮ АКТИВНОСТЬ

Патент Российской Федерации
Суть изобретения: Изобретение относится к новым биологически активным соединениям, конкретно к З-О-сукциноил-11-оксо-урсоловой кислоте, ее диаммонийной соли формулы

где Х = Н, NH4, проявляющей иммуностимулирующую активность. 1 табл.
Поиск по сайту

1. С помощью поисковых систем

   С помощью Google:    

2. Экспресс-поиск по номеру патента


введите номер патента (7 цифр)

3. По номеру патента и году публикации

2000000 ... 2099999   (1994-1997 гг.)

2100000 ... 2199999   (1997-2003 гг.)
Номер патента: 2128185
Класс(ы) патента: C07J73/00, A61K31/56
Номер заявки: 97116071/04
Дата подачи заявки: 17.09.1997
Дата публикации: 27.03.1999
Заявитель(и): Новосибирский институт органической химии СО РАН; Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор"
Автор(ы): Толстиков Г.А.; Чернов С.В.; Шульц Э.Э.; Ильичева Т.Н.; Проняева Т.Р.; Покровский А.Г.
Патентообладатель(и): Новосибирский институт органической химии СО РАН; Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор"
Описание изобретения: Изобретение относится к новым химическим соединениям класса тритерпеноидов, конкретно к 3-O-сукциноил-11-оксо-урсоловой кислоте формулы (I)

где X - H, NH4,
Обладающей иммуностимулирующей активностью.
Аналогами по строению соединения I являются 3-O-сукциноил-глицирретовая кислота II, а также глицирризиновая кислота, а также глицирризиновая кислота III.


Соединение II в виде динатриевой соли являются высокоэффективным противоязвенным средством и используется в клинике язвы желудка (препарат карбеноксолон [1] ). Иммуностимулирующие свойства карбеноксолона неизвестны. Глицирризиновая кислота III является иммунорегулятором. Однако ее недостаток состоит в том, что, обладая в малых дозах иммуностимулирующим действием, в высоких дозах она проявляет себя как иммуносупрессор [2,3]. Это свойство может отрицательно сказаться при передозировках при длительном применении.
Задачей изобретения является получение нового вещества, обладающего иммуностимулирующим действием в широком интервале доз.
Поставленная задача решается получением нового вещества -3-O-сукциноил-11-оксо-урсоловой кислоты, формулы I.
Способ получения иммуностимулятора I заключается в обработке урсоловой кислоты (IV) янтарным ангидридом в присутствии безводного пиридина и окислении образующейся 3-O-сукциноил-урсоловой кислоты (V, выход 90%) хромовым ангидридом в уксусной кислоте (выход 62%).

Соединение I может использоваться как непосредственно, так и в виде водорастворимых солей, например диаммонийной.
Достоинство нового соединения I состоит в том, что исходным соединением для его синтеза является урсоловая кислота IV, которая легко может быть получена экстракцией доступного растительного сырья - шротов, накапливающихся при переработке облепихи, клюквы или брусники.
Соединение I относится к 3-ему классу умеренно опасных веществ. Лд50 вещества при внутрибрюшинном введении составляет 500 мг/кг.
Иммуностимулирующие свойства патентуемого соединения изучали на беспородных мышах массой 18-20 г при иммунизации слабым антигеном. Исследуемые соединения вводили в дозах 5 мг/кг или 100 мг/кг внутрибрюшинно или подкожно. Контрольной группе животных вводили бычий альбумин без препарата (отрицательный контроль) или с полным адьювантом Фрейнда (положительный контроль). Результаты испытаний приведены в таблице.
Из данных табл. видно, что вещество (I) обладает выраженными иммуностимулирующими свойствами, так как титры антител в сыворотках, полученных от иммунизации альбумином с этим препаратом сходны с титрами антител в сыворотках при иммунизации с полным адьювантом Фрейнда и в 30 раз выше, чем при введении альбумина без препарата. Необходимо отметить, что глицирризиновая кислота (III) и кислый сукцинат урсоловой кислоты (V) по активности существенно уступают полному адьюванту Фрейнда.
Данное изобретение иллюстрируется примерами.
Пример 1. Синтез 3-O-сукциноил урсоловой кислоты (V). В круглодонную колбу емкостью 100 мл загружали 10 г (0.0219 моль) высушенной кислоты в 30 мл толуола, добавляли 6 г (0.06 моль) янтарного ангидрида и 15 мл сухого пиридина.
Реакционную массу кипятили в течение 3 ч, растворитель отогнали в вакууме. Остаток растворили при кипячении в 50 мл воды, после охлаждения выпавший осадок отфильтровали и промыли водой (3х10 мл). После высушивания получили 11.1 г (90%) кислого сукцината урсоловой кислоты (V). Т.пл. 218-220oC (из метанола). ИК спектр ν, см-1):3440 (OH), 1720, 1670 (C=O). Спектр ПМР (CD3OD, δ, м.д.): 0.90 с, 0.92 с, 0.93 с, 1.00 с, 1.05 с, 1.17 с (21H, Me), 1.32-1.69 м (12H), 1.94 м (4H), 2.23 д (1H, H11), 2.61 м (4H, OCOCH2CH2), 3.34 т (1H,H19), 4.54 м (1H,H3), 5.26 м (1H,H12).
Пример 2. Получение 3-O-сукциноил 11-кетоурсоловой кислоты (I). В круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную мешалкой и термометром загружали 3,0 г (0,054 моль) кислого сукцината урсоловой кислоты (V), 40 мл ледяной уксусной кислоты и нагревали при перемешивании до растворения. К раствору по каплям добавляли 2,0 г (0,02 моль) хромового ангидрида в 15 мл уксусной кислоты. Смесь перемешивали при температуре 97+2oC в течение 2 ч, затем реакционную массу вылили в 300 мл воды, образовавшийся осадок отфильтровали, промыли 1%-ным раствором соды и водой. Продукт сушили на воздухе и хроматографировали на колонке с силикагелем. Получили 1.9 г (62%) вещества (I), т.пл. 231-233oC (из метанола). ИК спектр ν, см-1):3440 (OH), 1720, 1670 (C=O). Спектр ПМР (CD3OD, δ, м.д.): 0.93 с, 0.94 с, 1.03 с, 1.16 с, 1.19 с, 1.23 с, 1.40 с (21H, Me), 1.31-1.65 м (12H), 2.15 м (1H, H11), 2.50 м (1H, H9), 2.61 м (4H, OCOCH2CH2), 2.80 м(1H,H18), 3.56 т (1H, H19), 4.55 м (1H,H3), 5.59 с (1H, H12). C34H52O6.
Пример 3. Получение диаммонийной соли (I). Раствор 1.9 г кислоты (I) в 50 мл метил-трет.бутилового эфира насыщали аммиаком в течение 1 мин при 0oC. Образовавшийся осадок отфильтровали, промыли эфиром и высушили на воздухе. Получили 1.8 г (90%) диаммонийной соли (I), т.пл.. Спектр ПМР (δ, м.д., J, Гц): 0.93 с, 0.94 с, 1.02 с, 1.06 с, 1.19 с, 1.21 с, 1.38 с (21H, Me), 1.31-1.65 м (17H), 2.10 м (2H,CH2), 2.54 м (1H, H9 и 4H, OCOCH2CH2), 2.80 м (1H, H18), 4.50 м (1H, H3), 5.57 с (1H, H12). Уф спектр λмакс., нм (ε): 253 (4200). C34H56N2O7.
Пример 4. Иммуностимулирующие свойства соединения (I) изучали на 144 животных. Беспородным мышам вводили подкожно 500 мкг бычьего альбумина в 0.5 мл стерильного физиологического раствора. Исследуемое соединение вводили на следующий день в дозах 5 мг/кг или 100 мг/кг внутрибрюшинно или подкожно. Контрольным животным вводили бычий альбумин без препарата (отрицательный контроль) или с полным адьювантом Фрейнда (положительный контроль). Повторное введение альбумина в дозе 100 мг/мышь проводили на 28 сутки. Сыворотки получали на 14 и 36 сутки и исследовали методом иммуноферментного анализа индивидуально от каждого животного. Эксперименты повторяли дважды, на каждую дозу и способ введения брали по 6 мышей.
Таким образом, новое соединение (I) обладает следующими преимуществами:
- оно доступно, так как получается из доступного сырья (урсоловой кислоты);
- способ получения его прост в технологическом оформлении и не требует дорогостоящих реагентов и оборудования:
- соединение (I) обладает высокой иммуностимулирующей активностью (на уровне адьюванта Фрейнда), не проявляя в то же время иммуносупрессорных свойств, присущих его ближайшему аналогу - глицирризиновой кислоте.
Формула изобретения: 3-О-сукциноил-11-оксо-урсоловая кислота и ее диаммонийная соль формулы

где Х - Н, NH4,
проявляющая иммуностимулирующую активность.