Главная страница  |  Описание сайта  |  Контакты
ШТАММ А/17/НАНЧАНГ/ 95/4 (НЗ N 2) ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ВЗРОСЛЫХ
ШТАММ А/17/НАНЧАНГ/ 95/4 (НЗ N 2) ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ВЗРОСЛЫХ

ШТАММ А/17/НАНЧАНГ/ 95/4 (НЗ N 2) ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ВЗРОСЛЫХ

Патент Российской Федерации
Суть изобретения: Изобретение предназначено для получения живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых людей и детей, соответствующей по антигенным свойствам актуальному вирусу А/Нанчанг/ 933/95 (Н3N2). Вакцинный штамм А/17/Нанчанг/95/4 (Н3N2) реассортант, полученный путем скрещивания эпидемического вируса А/Нанчанг/933/95 (Н3N2) с холодоадаптированным температуро-чувствительным вирусом А/Ленинград/134/17/57 (Н2N2) - донором аттенуации. Штамм безвреден для взрослых. Его свойства дают возможность гарантированно получать реассортантные вакцинные штаммы из вновь появляющихся эпидемических вирусов. Штамм А/17/Нанчанг/95/4 (Н3N2) активно размножается в развивающихся куриных эмбрионах при оптимальной температуре 34oС. Характеризуется температурочувствительностью и холодоадаптированностью. Реассортант унаследовал от эпидемического вируса два гена, кодирующих поверхностные белки (гемагглютинин и нейраминидазу) и шесть генов, кодирующих негликозилированные белки от донора аттенуации. Штамм А/17/Нанчанг/95/4 (Н3N2) ареактогенен для взрослых при интраназальном введении и удовлетворяет показателям иммуногенности. Вакцинный штамм А/17/Нанчанг/95/4 (Н3N2) по биологическим свойствам и показателям реактогенности соответствует требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам фармакопейной статьей ФС 42-299 ВС-89 на живую гриппозную вакцину для интраназального применения для взрослых. 1 табл.
Поиск по сайту

1. С помощью поисковых систем

   С помощью Google:    

2. Экспресс-поиск по номеру патента


введите номер патента (7 цифр)

3. По номеру патента и году публикации

2000000 ... 2099999   (1994-1997 гг.)

2100000 ... 2199999   (1997-2003 гг.)
Номер патента: 2128223
Класс(ы) патента: C12N7/00, A61K39/145, C12N7/00, C12R1:91
Номер заявки: 97107558/13
Дата подачи заявки: 07.05.1997
Дата публикации: 27.03.1999
Заявитель(и): Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН
Автор(ы): Киселева И.В.; Руденко Л.Г.; Александрова Г.И.; Климов А.И.; Ларионова Н.В.
Патентообладатель(и): Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН
Описание изобретения: Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано в здравоохранении для профилактики эпидемического гриппа среди взрослых живой интраназальной гриппозной вакциной из штамма A/17/Нанчанг/95/4 (НЗN2). Известный вакцинный штамм 17/Ф вируса гриппа A (HЗN2) - прототип [1] - утратил антигенную актуальность и вследствие этого не сможет вызвать защитную реакцию во время эпидемии гриппа, вызванной штаммом, аналогичным вирусу гриппа A/Нанчанг/933/95 (HЗN2).
Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является получение вакцинного штамма актуальной антигенной разновидности на основе эпидемического вируса A/Нанчанг/933/95 (HЗN2).
Вакцинный штамм A/17/Нанчанг/95/4 (HЗN2) получен методом генетической реассортации эпидемического вируса A/Нанчанг/933/95 (HЗN2) с холодоадаптированным штаммом A/Ленинград/134/17/57 (H2N2) - донором аттенуации - с последующей селекцией в присутствии антисыворотки к вирусу A/Ленинград/134/17/57 (H2N2). Донор аттенуации - холодоадаптированный температурочувствительный штамм вируса гриппа A/Ленинград/134/17/57 (H2N2), разрешенный для получения безвредных живых интраназальных вакцин для взрослых [2].
Методом рестрикционного анализа ДНК копий генов вакцинного и родительских штаммов установлено, что вакцинный штамм A/17/Нанчанг/95/4 (HЗN2) унаследовал 6 генов, кодирующих внутренние белки (PB1, PB2, PA, NP, M, NS) от донора аттенуации A/Ленинград/134/17/57 (H2N2), и 2 гена, кодирующих поверхностные белки - HA (гемагглютинин) и NA (нейраминидазу) - от эпидемического вируса A/Нанчанг/933/95 (HЗN2). Гемагглютинин в РТГА идентичен вирусу A/Нанчанг/933/95 (HЗN2), антисывороткой к которому полностью нейтрализуется. Штамм является температурочувствительным (разность в показателях инфекционной активности при 34oC и 40oC составляет 8.0 lg ЭИД50/0,2 мл) и холодоадаптированным (разность в показателях инфекционной активности при 34oC и 25oC - 3.0 lg ЭИД50/0,2 мл).
Таким образом, представленный вакцинный штамм A/17/Нанчанг/95/4 (HЗN2) характеризуется сочетанием полезных признаков, необходимых вакцинному штамму: антигенной специфичностью поверхностных белков эпидемического вируса A/Нанчанг/933/95 (HЗN2), структурой генома, оптимальной для реассортантных вакцинных штаммов, температурочувствительностью и холодоадаптированностью, что коррелирует с аттенуацией для человека, характерной для донора аттенуации.
Морфология штамма - полиморфная, типичная для вируса гриппа.
ХАРАКТЕРИСТИКА ШТАММА
Инфекционная активность при репродукции в развивающихся куриных эмбрионах при 34oC в течение 48 часов - 8,5 lg ЭИД50/0,2 мл.
Гемагглютинирующая активность -1:256-1:512.
Штамм проявляет генетическую стабильность биологических признаков после 5 пассажей на куриных эмбрионах (при использовании больших заражающих доз).
Данные из паспорта на вакцинный штамм A/17/Нанчанг/95/4 (HЗN2) приведены ниже:
1. Название штамма - A/17/Нанчанг/95/4 (HЗN2)
2. Серия - серия 1
3. Метод получения и характеристика родительских вирусов при представлении рекомбинантного штамма: рекомбинация
а). эпидемический вирус - A/Нанчанг/933/95 (HЗN2)
б). донор аттенуации - A/Ленинград/134/17/57 (H2N2)
4. Количество пассажей - 5 в процессе рекомбинации
5. Характеристика штамма до лиофилизации:
а). оптимальные условия репродукции - 34oC, 48 часов;
б). гемагглютинирующая активность - 1:256;
в). инфекционная активность - 8.5 lg ЭИД50/0,2 мл;
г). чувствительность к ингибиторам - ингибиторочувствительный;
д). разность в показателях инфекционной активности при 34oC и 40oC - 8.0 lg ЭИД50/0,2 мл;
е). разность в показателях инфекционной активности при 34oC и 25oC - 3.0 lg ЭИД50/0,2 мл.
ж). структура генома рекомбинанта:
- гены от эпидемического вируса - HA, NA
- гены от донора аттенуации - PA, PB1, PB2, NP, M, NS
6. Характеристика штамма после лиофилизации:
а). дата лиофилизации - 08 июля 1996 года;
б). объем материала в ампуле - 1 мл;
в). количество доз в серии - 3;
г). инфекционная активность - 7.5 lg ЭИД50/0.2 мл;
д). гемагглютинирующая активность -1:128.
7. Рекомендуемое разведение при вакцинации - 1:3.
8. Антигенная специфичность
а). гемагглютинина в РТГА - идентичен вирусу A/Нанчанг/933/95 (HЗN2), антисывороткой к которому полностью нейтрализуется;
б). нейраминидазы - идентична вирусу A/Нанчанг/933/95 (H3N2) по данным рестрикционного анализа ДНК копий генов.
9. Безвредность для мышей при подкожном введении - безвреден.
10. Бактериологический контроль лиофилизированного материала:
дата проведения - 1 июля 1996 года
результат - стерилен.
11. Контроль на отсутствие посторонних вирусов - посторонние вирусы отсутствуют.
Штамм A/17-Нанчанг/95/4 (H3N2) аректогенен и иммуногенен для взрослого контингента.
Пример. При вакцинации 92 взрослых лиц интраназально рекомбинантным вакцинным штаммом A/17/Нанчанг/95/4 (HЗN2) с инфекционной активностью 7,5 lg ЭИД50/0,2 мл в разведении 1:2 в объеме 0,5 мл сильных температурных реакций с повышением температуры свыше 38,5oC не наблюдалось. Средние реакции с кратковременным повышением температуры в диапазоне 37,6-38,5oC наблюдались в 2,2%. Слабых температурных реакций (до 37,5oC) не было. Показатель реактогенности (разница в проценте средних реакций у привитых вакциной и получивших плацебо) составил 0%.
В группе из 77 лиц, получивших плацебо, средние температурные реакции отмечались в 6,5%, слабые реакции также наблюдались в 6,5% случаев (табл. 1).
Таким образом, вакцинный штамм A/17/Нанчанг/95/4 (HЗN2) по показателям реактогенности соответствует требованиям, предъявляемым фармакопейной статьей ФС 42-299 ВС-89 к вакцинным штаммам для живой гриппозной вакцины для интраназального применения для взрослых.
Источники информации.
1. Штамм 17/Ф вируса гриппа A (H3N2), используемый для получения живой интраназальной вакцины для взрослых людей. Авторское свидетельство N 1222276. Опубликовано 07.04.86, БИ N 13.
2. Александрова Г. И., Климов А.И. Живая вакцина против гриппа. -СПб.: Наука, 1994, с. 151.
Формула изобретения: Штамм вируса гриппа А/17/Нанчанг/95/4 (НЗN2) ГИСК N 1001 (Государственный институт стандартизации и контроля им.Л.А.Тарасевича), используемый для получения живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых.