Главная страница  |  Описание сайта  |  Контакты
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО АДАПТОГЕННОЙ АКТИВНОСТЬЮ
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО АДАПТОГЕННОЙ АКТИВНОСТЬЮ

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО АДАПТОГЕННОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Патент Российской Федерации
Суть изобретения: Изобретение относится к фармации и касается способа получения средства, обладающего адаптогенной активностью. Сущность изобретения: растительное сырье - корни и корневища левзеи сафлоровидной, родиолы розовой, корни бадана толстолистного, траву крапивы двудомной, тимьяна ползучего, мяты перечной, цветков календулы лекарственной, плодов боярышника кроваво-красного и корианда экстрагируют 35-45%-ным этиловым спиртом в соотношении сырье: экстрагент 1:(10-15) в течение 72 ч при комнатной температуре трехкратно при периодическом перемешивании. Компоненты сырья подают на экструкцию при следующем соотношении, мас. ч: левзея сафлоровидная (корни и корневища) - 7-9; родиола розовая (корни и корневища) - 3-5; бадан толстолистный (корни) - 1-3; тимьян ползучий (трава) - 1-3; крапива двудомная (листья) - 3-5; мята перечная (трава) - 3-5; календула лекарственная (цветки) - 0,80-1,2; боярышник кроваво-красный (плоды) - 7-9; кориандр (плоды) - 1-3. Способ позволяет увеличить выход продукта, повысить его адаптогенную активность, удешевить продукт. 8 табл.
Поиск по сайту

1. С помощью поисковых систем

   С помощью Google:    

2. Экспресс-поиск по номеру патента


введите номер патента (7 цифр)

3. По номеру патента и году публикации

2000000 ... 2099999   (1994-1997 гг.)

2100000 ... 2199999   (1997-2003 гг.)
Номер патента: 2135198
Класс(ы) патента: A61K35/78, A61K9/08
Номер заявки: 97103312/14
Дата подачи заявки: 05.03.1997
Дата публикации: 27.08.1999
Заявитель(и): Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН
Автор(ы): Николаева Г.Г.; Николаев С.М.; Цыренжапова О.Д.; Даргаева Т.Д.
Патентообладатель(и): Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН
Описание изобретения: Изобретение относится к области фармации и касается способа получения средства из растительного сырья, обладающего адаптогенной активностью.
Известен способ получения средства, обладающего адаптогенной активностью, включающий экстракцию корней элеутерококка раствором этанола (ВФС 42-1281-82) /3/. Недостатком указанного способа является низкий выход экстрактивных веществ (6%) /3/, ограниченность ресурсов этого сырья и высокая его стоимость.
Задачей способа является повышение выхода действующих экстрактивных веществ, повышение адаптогенной активности и удешевление конечного продукта за счет рационального использования широко распространенного растительного сырья, имеющего надежную обеспеченную сырьевую базу.
Указанная цель достигается посредством того, что способ включает экстракцию 35-45%-ным этиловым спиртом высушенной и измельченной смеси следующего растительного состава (мас.ч.):
Левзея сафлоровидная (корни и корневища) - 7,0-9,0
Родиола розовая (корни и корневища) - 3,0-5,0
Бадан толстолистный (корни) - 1,0-3,0
Мята перечная (трава) - 3,0-5,0
Тимьян ползучий (трава) - 1,0-3,0
Крапива двудомная (листья) - 3,0-5,0
Боярышник кроваво-красный (плоды) - 7,0-9,0
Кориандр посевной (плоды) - 1,0-3,0
Календула лекарственная (цветки) - 0,8-1,2
При этом соотношение сырье : экстрагент составляет 1 : (10-15). Экстракцию проводят при комнатной температуре (T - 18 - 22oC) в течение 72 ч трехкратно. Предлагаемый способ получения средства достаточно прост, не требует трудоемких затрат, позволяет получить продукт постоянного состава.
Выявленные отличительные признаки позволяют сделать вывод о соответствии предлагаемого технологического решения критерию "новизна".
Дальнейшие исследования и приведенные в тексте данные позволяют сделать заключение о соответствии предлагаемого решения критерию "существенные отличия", так как, во-первых, подобного состава не было обнаружено в литературных источниках, и во-вторых, доказано, что только предложенные в формуле изобретения признаки позволяют достигать поставленной цели.
Для доказательства существенности предложенных признаков способа, а именно концентрация экстрагента, соотношение сырье - экстрагент, длительность и кратность процесса экстракции проведены серии экспериментов, данные которых представлены ниже.
Измельчение сырья проводили согласно требованиям ГФ XI изд./4/ для каждого сырья в отдельности. Коэффициент поглощения экстрагента данным сбором составляет - 2,0.
Выбор оптимальных параметров экстракции контролировали по выходу экстрактивных веществ.
Для подбора типа экстрагента изучены процессы экстрагирования сырья водой и этиловым спиртом различной концентрации: от 10% до 95%. Результаты анализа приведены в таблице 1. Установлено, что максимальный выход экстрактивных веществ получен при экстракции сырья 35 - 45%-ным этиловым спиртом (средняя концентрация 40%).
На выход экстрагируемых веществ оказывает влияние соотношение сырье : экстрагент. Были проверены соотношения - 1:7; 1:10; 1:15; 1:20; 1:30; 1:35; 1:40; 1:50. Результаты анализа представлены в таблице 2.
Наибольший выход суммы экстрактивных веществ достигается при соотношении сырье : экстрагент - 1: (10-20). Среднее значение 1:15. Дальнейшее увеличение объема нецелесообразно, поскольку содержание действующих веществ уменьшается.
Продолжительность настаивания и кратность экстракции определены по следующей методике: в колбу, вместимостью 150 мл загружали навеску сырья в количестве 10 г, заливали 15-кратным количеством 40%-ного этилового спирта, настаивали при комнатной температуре. Через определенные промежутки времени извлечение сливали и анализировали на содержание экстрактивных веществ (1 контакт фаз). Частично истощенное сырье заливали 40%-ным этиловым спиртом в объеме, равном слитому, и настаивали в течение того же времени, что и в первый раз. Извлечение сливали и определяли содержание экстрактивных веществ (2 контакт фаз). Третье настаивание проводили так же, как и предыдущие (3 контакт фаз). Сливы проводили через равные промежутки времени: 24; 48; 72; 96; 120; 144 и 168 ч. Результаты анализов представлены в таблице 3, которые показывают, что равновесное состояние при трех контактах фаз достигается через 72 ч ( 3 сут). Таким образом, трехкратная экстракция обеспечивает наиболее полный выход действующих веществ.
Проведены дополнительные эксперименты зависимости выхода экстрактивных веществ от перемешивания. Установлено, что выход суммы экстрактивных веществ при постоянном перемешивании равен 20,97%; при периодическом перемешивании - 20,91%. На основании полученных данных можно заключить, что достаточным является периодическое перемешивание, так как величина суммы экстрактивных веществ не изменяется.
Определение выхода суммы экстрактивных веществ во всех указанных экспериментах проводили по следующей однотипной методике по ГФ XI издания "Определение экстрактивных веществ в растительном материале" /4/.
Методика эксперимента получения суммы экстрактивных веществ:
Измельченное воздушно-сухое сырье 10,000 г (точная навеска) заливают 40%-ным этиловым спиртом в соотношении сырье - экстрагент - 1:15, закрывают пробкой и настаивают в течение 72 ч при периодическом перемешивании. Извлечение отфильтровывают через бумажный фильтр в сухую колбу. 25 мл фильтрата переносят в предварительно высушенную при температуре 100oC до постоянной массы в точно взвешенную фарфоровую чашку и выпаривают на водяной бане досуха. Чашку с остатком сушат при температуре 100-105oC до постоянной массы и взвешивают. Содержание экстрактивных веществ в процентах на абсолютно-сухое сырье вычисляют по формуле

где М - масса сухого остатка, г;
m - масса сырья, г;
b - потеря в массе при высушивании.
По данным литературы, о химическом составе используемых растений известно, что в предложенном составе растительного сырья содержатся эфирные масла (ментол, ментон, метилацетат, лимонен): углеводы (глюкоза, фруктоза, сахароза): витамины (A, C, E, PP, каротин); органические кислоты (яблочная, муравьиная и др.); тритерпеноиды (олеаноловая кислота); флавоноиды (лютеолин, гиперозид, кверцетин, кемпферол, витексин, рутин); следы алкалоидов и кумаринов, а также ряд других ценных биологических веществ /1, 2, 6/.
Нами проведен химический анализ данной композиции сырья на содержание основных биологически активных соединений по методикам, описанным в ГФ XI изд./4/.
1. Обнаружение органических кислот.
Полученное спиртовое извлечение объемом 0,1 мл наносят микропипеткой на линию старта пластинки "Silufol". Параллельно наносят спиртовые растворы "свидетелей"- яблочную, лимонную, янтарную, щавелевую кислоты капилляром в одно касание на стартовую линию хроматографической пластинки. Высушенную пластинку помещают в хроматографическую камеру со свежеприготовленной, насыщенной системой 96%-ный этанол-аммиак (34%) -(16:4,5). Время хроматографирования 1 ч. Хроматограмму высушивают на воздухе и проявляют спиртовым раствором бромкрезолового зеленого. Отмечают пятна желтого цвета на бледно-розовом фоне. В исследуемом сборе обнаружены: яблочная кислота с Rf - 0,86; лимонная кислота с Rf - 0,65; янтарная кислота с Rf - 0,23.
2. Обнаружение тритерпеноидов.
Полученное спиртовое извлечение объемом 0,1 мл наносят микропипеткой на линию старта пластинки "Silufol". Одновременно на стартовую линию той же пластинки в качестве "свидетеля" наносят 0,01 мл спиртового раствора олеаноловой кислоты. Высушенную пластинку помещают в хроматографическую камеру, насыщенную системой бензол-ацетон (8:2), хроматографируют восходящим методом. Когда фронт растворителя пройдет 15 см, пластинку вынимают из камеры и влажную опрыскивают 20%-ным раствором серной кислоты, затем нагревают в сушильном шкафу при T = 110oC в течение 10 минут. Олеаноловая кислота проявляется в виде коричневого пятна с Rf - 0,41.
3. Обнаружение каротиноидов.
Полученное спиртовое извлечение объемом 0,1 мл наносят микропипеткой на линию старта пластинки "Silufol", рядом наносят "свидетель"-b-каротин. Пластинку помещают в камеру, предварительно насыщенную системой циклогексан-эфир (80: 20). Хроматографирование ведут 15-20 минут (пробег растворителя 13-15 см). После этого хроматограмму высушивают на воздухе. Проявляющим реактивом является 10%-ный раствор фосфорномолибденовой кислоты в этиловом спирте. После опрыскивания и прогревания пластинки при температуре 60-80oC каротиноиды проявляются в виде пятен синего цвета на желто-зеленом фоне. Rf b-каротина - 0,45.
4. Обнаружение розавина и салидрозида.
На линию старта пластинки "Silufol-UV-254" микропипеткой наносят 0,1 мл полученного извлечения. Пластинку с нанесенной пробой помещают в камеру, которую предварительно насыщают не менее 24 ч смесью растворителей: хлороформ - метиловый спирт - вода (26:14:3), хроматографируют восходящим способом.
Когда фронт растворителя пройдет около 13 см, пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 5 минут и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм. На хроматограмме обнаруживается пятно фиолетового цвета с Rf - 0,4 (розавин).
Хроматограмму опрыскивают 10%-ным раствором натрия карбоната, помещают в сушильный шкаф и выдерживают при температуре 110oC в течение 2 мин, затем опрыскивают диазотированным сульфацилом и нагревают при температуре 110oC в течение 2 мин. На хроматограмме проявляется пятно красноватого цвета с Rf около 0,42 (салидрозид).
5. Обнаружение эфирных масел.
Определение содержания эфирного масла проводят по ГФ XI, т.1, с.290 /4/.
30 г Измельченного сырья помещают в круглодонную колбу вместимостью 1000 мл, приливают 500 мл воды и закрывают резиновой пробкой с обратным шариковым холодильником. В пробке снизу укрепляют металлические крючки, на которые при помощи тонкой проволоки подвешивают градуированный приемник так, чтобы конец холодильника находился над воронкообразным расширением приемника, не касаясь его. Колбу с содержимым нагревают и кипятят в течение часа.
Объем масла замеряют после окончания перегонки и охлаждения прибора до комнатной температуры.
Содержание эфирного масла вычисляют по формуле:

где V - объем эфирного масла, мл;
m - масса сырья, г;
W - потеря в массе при высушивании сырья, %.
Содержание эфирного масла заданной композиции сырья составляет около 1%.
6. Обнаружение флавоноидов.
Полученное спиртовое извлечение объемом 0,1 мл наносят на бумажную хроматограмму на линию старта полоской в 5 см. Рядом на линию старта наносят в виде точек (одно касание капилляра) "свидетели" флавоноидов: гиперозид, кверцетин, кемпферол, витексин и рутин. Хроматографируют нисходящим способом в системе н-бутанол - уксусная кислота-вода (4:1:2). Длина пробега подвижной фазы 10 -15 см. Хроматограмму высушивают на воздухе и проявляют 2-5%-ным спиртовым раствором хлористого алюминия, затем сушат в сушильном шкафу при температуре 110oC в течение 2 мин. Хроматограмму просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм, флавоноловые агликоны кверцетин и кемпферол имеют высокие значения Rf - кверцетин - 0,8: кемпферол - 0,76 в виде желтых пятен, а флавоновые гликозиды - гиперозид - желтое пятно с Rf - 0,4, рутин - Rf - 0,58.
7. Обнаружение сахаров. Полученное спиртовое извлечение объемом 0,2 мл наносят на бумажную хроматограмму на линию старта полоской в 5 см. Рядом на линию старта наносят в виде точек 0,1 мл раствора "свидетелей" сахаров: глюкозу, сахарозу, фруктозу. Хроматографируют нисходящим способом в системе н-бутанол-пиридин-вода (6:4:3), с перетеканием. Время хроматографирования 24 ч. Хроматограмму высушивают на воздухе, проявляют анилин-фталатным реактивом и сушат в сушильном шкафу при температуре 110oC в течение 2 мин. Пятна сахаров окрашиваются в коричневый цвет с Rf - 0,87 (сахароза) и 0,54 - (глюкоза).
Анализируя полученные результаты качественного химического анализа с литературными данными /6/, делаем вывод, что данный сбор содержит основные биологически активные соединения: органические кислоты (яблочная, лимонная); эфирные масла (0,1%); тритерпеноиды (олеаноловая кислота); флавоноидные соединения (гиперозид, кверцетин, кемпферол, рутин); сахара (глюкозу, сахарозу).
Фармакологические исследования проводили в соответствии с общепринятыми требованиями /7/.
Об адаптогенной активности суммарного средства судили по влиянию на физическую работоспособность животных /2/.
Опыты проведены на белых беспородных крысах с исходной массой 160-170 г. Исследуемое деалкоголизированное суммарное средство разводили 20%-ным раствором этилового спирта, вводили внутрижелудочно в экспериментально-терапевтической дозе 30 мг/кг 1 раз в день в течение 10 сут.
В качестве препарата сравнения использовали жидкий экстракт элеутерококка в дозе 30 мг/кг после предварительного удаления спирта путем выпаривания до 1/2 объема и последующего доведения объема до первоначального 20%-ным этиловым спиртом. Влияние суммарного средства на выносливость животных определяли по длительности бега в третбане до полного утомления (в минутах). Полученные результаты обработаны статистическим методом с использованием коэффициента Молденгауэра /5/ и представлены в таблице 4.
Данные фармакологического эксперимента позволяют сделать вывод, что после многократного введения суммарного средства длительность бега животных в третбане увеличивается почти на 39,4% тогда как после введения экстракта элеутерококка - на 27,9%. Изучено также влияние суммарного средства на острую токсичность по методу Кербера. Опыты проведены на белых беспородных мышах массой 18-20 г, которым однократно внутрижелудочно вводили сумму экстрактивных веществ в разных дозах. В результате исследований было установлено, что при внутрижелудочном введении ЛД50 выявить не удалось, в связи с тем, что максимально возможный объем вводимого экстракта не приводил к гибели белых мышей при наблюдении в течение 14 сут. В первые два дня наблюдали лишь снижение двигательной активности, признаки некоторой заторможенности животных, которые уже к концу второго дня у большинства мышей бесследно проходили. С третьего дня все животные мало отличались от интактных. При внутрибрюшинном введении ЛД50 соответствовало по Керберу 11089 + 214 мг/кг, что позволяет отнести данное средство к группе практически безвредных веществ по существующей классификации.
Таким образом, предлагаемый способ позволяет получить превосходящее по адаптогенной активности экстракту элеутерококка средство из более доступного и дешевого растительного сырья, увеличить выход экстрактивных веществ, что будет способствовать более рациональному использованию растительных ресурсов.
Кроме того, полученное средство может служить дополнительным источником для разработок и создания на его основе напитков, бальзамов, валеологических добавок и других продуктов, необходимых населению.
Примеры конкретного выполнения способа.
Пример 1. Получение средства при нижних граничных соотношениях: измельченные и просеянные через сито N 30 корни и корневища левзеи сафлоровидной - 686 г, родиолы розовой - 343 г; корней бадана толстолистного - 171 г; измельченные и просеянные через сито N 50 травы мяты перечной - 343 г, тимьяна ползучего - 171 г; листьев крапивы двудомной - 343 г; измельченные и просеянные через сито N 05 плоды боярышника кроваво-красного - 686 г и кориандра - 171 г; цветков календулы лекарственной - 85 г смешивают, после чего загружают в перколятор и заливают 39,54 л 35%-ным этиловым спиртом, с учетом коэффициента водопоглощения при соотношении сырье-экстрагент 1:10. Экстракцию проводят при комнатной температуре при периодическом перемешивании в течение 72 ч. Извлечения сливают, дают отстояться и фильтруют. Объем слива 34,8 л. Прозрачная жидкость светло-коричневого цвета, плотность 0,956 г/см3. Процентное содержание этанола - 34,7%. Шрот заливают снова 35% этанолом в объеме равном слитому (34,8 л), проводят экстракцию аналогично первой. Второе извлечение фильтруют, объем слива - 34,6 л (плотность - 0,957 г/см3). Третью экстракцию проводят аналогично двум предыдущим. Объем третьего слива - 39,50 л (плотность 0,957 г/см3). Три слива объединяют, тщательно перемешивают, плотность экстракта 0,956 г/см3. Процентное содержание этанола 34,7%, сухой остаток 19,1%.
Определение адаптогенной активности
Полученное извлечение в дозе 30 мг/кг деалкоголизировали, разводили 20%-ным этиловым спиртом, вводили 2 опытной группе, состоящей из 10 животных. Первой опытной группе животных вводили 20% экстракт элеутерококка в дозе 30 мг/кг. Контрольной группе белых крыс животных вводили 20%-ный этиловый спирт. Результаты проведенных исследований свидетельствуют, что полученное средство превосходит по активности экстракт элеутерококка (таблица 5).
Пример 2. Получение средства при средних граничных соотношениях: измельченное и просеянное через сито N 30 корни и корневища левзеи сафлоровидной - 880 г, родиолы розовой - 440 г, корней бадана толстолистного - 220 г, измельченные и просеянные через сито N 50 травы мяты перечной - 440 г, тимьяна ползучего -220 г; листьев крапивы двудомной - 440 г; измельченные и просеянные через сито N 05 плоды боярышника кроваво-красного - 880 г и кориандра - 220 г цветков календулы - 110 г смешивают и тщательно перемешивают. Полученную смесь трав загружают в перколятор, заливают 43,08 л 40%-ным этиловым спиртом при соотношении сырье экстрагент 1:15 с учетом коэффициента водопоглощения.
Экстракцию проводят при комнатной температуре при периодическом перемешивании в течение 72 ч. Фильтруют под вакуумом. Объем первого слива равен 40,5 л плотность 0,9488 г/см3. Шрот заливают снова в объеме равном слитому - 40,5 л, проводят экстракцию аналогично первой. Объем второго слива равен 40,0 л, плотность 0,9489 г/см3. Третью экстракцию и фильтрованием проводят аналогично первым двум. Объем третьего слива равен 40,0 л, плотность 0,9888 г/см3. Полученные спиртовые извлечения смешивают и тщательно перемешивают, плотность 0,9484 г/см3. Процентное содержание этанола - 39,7%, сухой остаток 20,9%.
Определение адаптогенной активности
Деалкоголизированный спиртовый экстракт в дозе 30 мг/кг, разведенный в 20%-ном этиловом спирте, вводили группе животных, состоящей из 10 белых крыс. Деалкоголизированный экстракт элеутерококка в дозе 30 мг/кг вводили 2 опытной группе животных. Контроль получал эквиобъемное количество 20%-ного раствора этилового спирта. Результаты исследований приведены в таблице 6.
Пример 3. Получение средства при верхних граничных пределах: измельченное и просеянное через сито N 30 корни и корневища левзеи сафлоровидной - 1074 г, родиолы розовой - 490 г, корней бадана толстолистного - 269 г, измельченные и просеянные через сито N 50 травы мяты перечной - 490 г, тимьяна ползучего - 269 г; листьев крапивы двудомной - 490 г, цветков кадендулы - 135 г; плодов боярышника кроваво-красного - 1074 г и кориандра - 269 г загружают в перколятор, заливают 78,6 л 45%-ным этиловым спиртом в соотношении сырье-экстрагент 1:20 с учетом коэффициента водопоглощения. Экстракцию проводят при комнатной температуре при периодическом перемешивании в течение 72 ч. Фильтруют под вакуумом, объем первого слива равен 71,5 л, плотностью 0,9395 г/см3. Шрот заливают снова 45%-ным этиловым спиртом. Второе извлечение проводят через 24 ч, объем слива 71,0 л. Третью экстракцию проводят аналогично двум, объем третьего слива равен 71,0 л, плотность экстракта 0,9396 г/см3. Извлечения смешивают, тщательно перемешивают. Плотность экстракта 0,9394 г/см3, процентное содержание этанола 44,96%, сухой остаток - 18,4%.
Определение адаптогенной активности
Деалкоголизированный спиртовый экстракт в дозе 30 мг/кг, разведенный в 20%-ном этиловом спирте, вводили опытной группе, состоящей из 10 белых крыс. Деалкоголизированный экстракт элеутерококка вводили 2 опытной группе животных в дозе 30 мг/кг. Контрольной группе вводили эквиобъемное количество - 20%-ный этиловый спирт. Результаты исследований приведены в таблице 7.
Подсчитать экономический эффект предлагаемого способа в настоящее время не представляется возможным, однако вышеуказанные преимущества в сочетании с простой схемой получения способствуют расширению ассортимента средств с адаптогенной активностью (см.табл.8).
Литература:
1. Атлас ареалов и ресурсов лекарственных растений СССР.- М.: 1976, 340 с.
2. Брехман И.И. Элеутерококк. -Л.: Наука, 1968.
3. Временная фармакопейная статья. ВФС - 42-1281-82 (спиртовый экстракт элeутepoкoккa). -М.: 1982, 4 с.
4. Государственная фармакопея СССР. XI изд. -М.: 1989.
5. Монцевичюте-Эрингене Е.В. Упрощенные математико-статистические методы в медицинской исследовательской работе. Патол. физиол. и экспер. терапия. - 1964. N 4, с. 71-78.
6. Соколов С. Я., Замотаев И.П. Справочник по лекарственным растениям. -М.: 1984, 469 с.
7. Требования к доклиническому изучению общетоксического действия новых фармакологических веществ. -М.: Медицина, 1984.
Формула изобретения: Способ получения средства, обладающего адаптогенной активностью, отличающийся тем, что проводят экстрагирование растительного сырья 35-45%-ным этиловым спиртом в соотношении сырье: экстрагент 1:(10-15) в течение 72 ч при комнатной температуре трехкратно при периодическом перемешивании, в качестве растительного сырья используют корни и корневища левзеи сафлоровидной, родиолы розовой; корни бадана толстолистного; листья крапивы двудомной; траву мяты перечной, тимьяна ползучего; цветки календулы лекарственной; плоды боярышника кроваво-красного и кориандра при следующем их соотношении, мас.ч.:
Левзея сафлоровидная (корни и корневища) - 7,0-9,0
Родиола розовая (корни и корневища) - 3,0-5,0
Бадан толстолистный (корни) - 1,0-3,0
Тимьян ползучий (трава) - 1,0-3,0
Крапива двудомная (листья) - 3,0-5,0
Мята перечная (трава) - 3,0-5,0
Календула лекарственная (цветки) - 0,8-1,2
Боярышник кроваво-красный (плоды) - 7,0-9,0
Кориандр (плоды) - 1,0-3,0