Forbidden

You don't have permission to access /zzz_siteguard.php on this server.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ЛЕПТОСПИР - Патент РФ 2138292
Главная страница  |  Описание сайта  |  Контакты
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ЛЕПТОСПИР
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ЛЕПТОСПИР

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ЛЕПТОСПИР

Патент Российской Федерации
Суть изобретения: Изобретение относится к области медицины и ветеринарии и может быть использовано для получения противолептоспирозных сывороток для приготовления диагностических и лечебных препаратов. Способ предусматривает введение лептоспир продуценту сыворотки с последующим забором крови. Предложено лептоспиры первоначально вводить в одну конечность внутримышечно и в область лимфатического узла по 1х108 - 1,5x108 микробных клеток (мк) на 1 кг массы и через 5-6 суток - в другую конечность по той же схеме. Через 35-40 дней проводят ревакцинацию в нарастающей дозе: первую - внутримышечно 1х108 - 1,5х108 мк, затем подкожно 2х108 - 2,5х108 мк, 3х108 - 3,5х108 мк, 5х108 - 5,5х108 мк, 6х108 - 6,5х108 мк на кг массы через каждые двое суток. Способ позволяет получить сыворотки со стабильно высокими титрами специфических антител и сократить сроки иммунизации.
Поиск по сайту

1. С помощью поисковых систем

   С помощью Google:    

2. Экспресс-поиск по номеру патента


введите номер патента (7 цифр)

3. По номеру патента и году публикации

2000000 ... 2099999   (1994-1997 гг.)

2100000 ... 2199999   (1997-2003 гг.)
Номер патента: 2138292
Класс(ы) патента: A61K39/42
Номер заявки: 98118619/14
Дата подачи заявки: 13.10.1998
Дата публикации: 27.09.1999
Заявитель(и): Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им.Пастера
Автор(ы): Стоянова Н.А.; Токаревич Н.К.; Пермяков Г.М.
Патентообладатель(и): Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им.Пастера
Описание изобретения: Изобретение относится к области медицины и ветеринарии и может найти применение для получения противолептоспирозных сывороток с целью приготовления диагностических и лечебных препаратов.
Наиболее близким по сущности к предлагаемому изобретению является способ получения гипериммунной сыворотки к лептоспирам, предусматривающий введение антигена лептоспир продуценту сыворотки с последующим забором крови от продуцента (см. Тарасевич Н.Н.- Иммунология и серологическая диагностика лептоспирозной инфекции.- М. -Медицина.- 1972.-С. 137).
Однако недостатком способа является:
- недостаточная стабильность титров антител в сыворотках от 1: 20000 до 1:200000;
- длительная иммунизация, следовательно, и сроки получения сыворотки составляют более 80-82 дней;
- необходимость получения из лептоспир сухой массы клеток, что усложняет способ и ограничивает возможности его применения.
Изобретение направлено на получение сывороток со стабильно высокими титрами специфических антител и сокращение сроков иммунизации.
Способ получения гипериммунной сыворотки против лептоспир предусматривает введение лептоспир продуценту сыворотки с последующим забором крови от продуцента. Можно использовать лептоспиры любой серологической группы, в зависимости от цели (лечебная сыворотка, агглютинирующая сыворотка для типирования лептоспир, для приготовления диагностикума). Так, например, использование лептоспир серогрупп Icterohaemorrhagiae и Canicola позволяет получить сыворотку для лечения лептоспироза у собак.
Авторами разработана оригинальная схема введения лептоспир продуценту. Для достижения поставленной цели лептоспиры первоначально вводят в одну конечность внутримышечно и в область лимфатического узла в дозе по (1,0·108-1,5·108) мк на кг массы продуцента. По истечении 5-6 суток по той же схеме лептоспиры вводят в другую конечность. Ревакцинацию проводят через 35-40 дней в нарастающей дозе (1·108-1,5·108 мк, (2·108-2,5·108) мк, (3·108-3,5·108) мк, (5·108-5,5·108) мк, (6·108-6,5· 108) мк на кг массы через каждые двое суток. Первую - внутримышечно, остальные подкожно. Через 8-10 дней проводят забор крови. Иммунизация концентрированным антигеном позволяет уменьшить объем вводимого препарата, а смена выбранных рецепторных зон приводит к включению в иммуногенез значительного количества иммунокомпетентных клеток и обеспечивает депонирование антигена для пролонгированного раздражения; выбранный порядок введения антигена, его концентрация и интервалы между инъекциями исключают появление у реципиента рефракторного состояния, это обеспечивает получение высокоактивной специфической сыворотки, а также воспроизводимость способа. Кроме того, предлагаемый способ позволяет максимально сократить расход антигена, а следовательно, число вакцинированных животных и время содержания их в опыте.
Изобретение реализуется следующим образом.
Пример 1. Получение гипериммунной сыворотки.
Культуры лептоспир серогрупп Icterohaemorrhagiae и Canicola, выращенные на питательной среде Терских, инактивировали в течение 30 минут при 56o, концентрировали центрифугированием при 10000 об/ч разводили физиологическим раствором до концентрации 5 · 10 мк/мл, соединяли в равных объемах лептоспиры двух серогрупп и иммунизировали баранов - самцов массой 35-40 кг по следующей схеме:
1-я иммунизация. 4 мл антигена внутримышечно в левую заднюю ногу и 4 мл антигена в область подколенного лимфатического узла левой ноги.
2-я иммунизация через 5 дней - 4 мл антигена - в правую заднюю ногу и 4 мл антигена в правый подколенный узел.
3-я иммунизация через 35 дней - 8 мл антигена внутримышечно.
4-я иммунизация через 2 дня - 16 мл антигена подкожно.
5-я иммунизация через 2 дня - 24 мл антигена подкожно.
6-я иммунизация через 2 дня - 40 мл антигена подкожно.
7-я иммунизация через 2 дня - 48 мл антигена подкожно.
Через 10 дней после последней иммунизации производили кровопускание и определяли титр антител в реакции микроагглютинации с лептоспирами серогрупп Icterohaemorrhagiae и Canicola. Титр антител составляет 1:50000 1:100000.
Весь цикл иммунизации баранов составляет 58 дней.
Пример 2.
Культуры лептоспир серогруппы Grippotyphosa для иммунизации готовили так же, как в примере 1, и вводили их баранам массой 35-40 кг по следующей схеме:
1-я иммунизация - 6 мл антигена внутримышечно в левую заднюю ногу и 6 мл антигена в область подколенного лимфатического узла левой ноги.
2-я иммунизация - через 5 дней - 6 мл антигена в правую заднюю ногу внутримышечно и столько же антигена в область правого подколенного узла.
3-я иммунизация - через 35 дней - 12 мл антигена внутримышечно.
4-я иммунизация - через 2 дня - 20 мл антигена подкожно.
5-я иммунизация - через 2 дня - 28 мл антигена подкожно.
6-я иммунизация - через 2 дня - 44 мл антигена подкожно.
7-я иммунизация - через 2 дня - 52 мл антигена подкожно.
Через 8 дней после последней иммунизации производили забор крови.
В реакции микроагглютинации с лептоспирами серогруппы Grippotyphosa титр антител составил 1:50000-1:100000.
Весь цикл иммунизации баранов составил 58 дней.
Пример 3.
Культуру лептоспир серогруппы Pomona готовили для иммунизации так же, как в примере 1, и вводили кроликам массой 3 кг по следующей схеме:
1-я иммунизация - 0,3 мл антигена внутримышечно в левую заднюю ногу и 0,3 мл антигена в левый подколенный лимфатический узел.
2-я иммунизация - через 5 дней - 0,3 антигена внутримышечно в область правой задней ноги и 0,3 мл - в правый подколенный узел.
3-я иммунизация - через 35 дней - 0,6 мл антигена внутримышечно.
4-я иммунизация - через 2 дня - 1,2 мл антигена подкожно.
5-я иммунизация - через 2 дня - 1,8 мл антигена подкожно.
6-я иммунизация - через 2 дня - 3 мл антигена подкожно.
7-я иммунизация - через 2 дня -3,6 мл антигена подкожно.
Через 10 дней после последней иммунизации производили забор крови. В реакции микроагглютинации титр антител 1:50000. Весь цикл иммунизации составил 58 дней.
Пример 4.
Культуру лептоспир серогруппы Pomona готовили для иммунизации так же, как в примере 1, и вводили кроликам массой 3 кг по следующей схеме:
1-я иммунизация - 0,3 мл антигена внутримышечно в левую заднюю ногу и 0,3 мл в левый подколенный лимфатический узел.
2-я иммунизация - через 5 дней - 0,3 мл антигена внутримышечно в область правой задней ноги и 0,3 мл - в правый подколенный узел.
3-я иммунизация - через 5 дней - 0,6 мл антигена внутримышечно.
4-я иммунизация - через 5 дней - 1,2 мл антигена вводим подкожно.
5-я иммунизация - через 5 дней - 1,8 мл антигена подкожно.
6-я иммунизация - через 5 дней - 3 мл антигена подкожно.
7-я иммунизация - через 5 дней - 3,6 мл антигена подкожно.
Через 10 дней после последней иммунизации производили забор крови. В реакции микроагглютинации титр антител 1: 6400-1: 12800.
Весь цикл иммунизации составил 40 дней.
В последующие дни (через 20 и 30 дней после последней иммунизации) нарастания титра антител не было.
Изменение интервалов между введением антигена сократило сроки иммунизации, но не позволило получить сыворотки с высокими титрами антител.
Формула изобретения: Способ получения гипериммунной сыворотки против лептоспир путем введения лептоспир продуценту сыворотки с последующим забором крови от продуцента, отличающийся тем, что лептоспиры первоначально вводят в одну конечность внутримышечно и в область лимфатического узла по 1 х 108 - 1,5 х 108 микробных клеток (мк) на 1 кг массы, через 5 - 6 суток в другую конечность по той же схеме, а через 35 - 40 дней проводят ревакцинацию в нарастающей дозе: первую - внутримышечно 1 х 108 - 1,5 х 108 мк, затем подкожно 2 х 108 - 2,5 х 108 мк, 3 х 108 - 3,5 х 108 мк, 5 х 108 - 5,5 х 108 мк, 6 х 108 - 6,5 х 108 мк на 1 кг массы через каждые двое суток.