Forbidden

You don't have permission to access /zzz_siteguard.php on this server.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТАФИЛОКОККОВОЙ АНАТОКСИН-ВАКЦИНЫ - Патент РФ 2139091
Главная страница  |  Описание сайта  |  Контакты
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТАФИЛОКОККОВОЙ АНАТОКСИН-ВАКЦИНЫ
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТАФИЛОКОККОВОЙ АНАТОКСИН-ВАКЦИНЫ

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТАФИЛОКОККОВОЙ АНАТОКСИН-ВАКЦИНЫ

Патент Российской Федерации
Суть изобретения: Изобретение предназначено для получения препарата для профилактики и лечения стафилококковых инфекций, обладающего иммуностимулирующим действием. Стафилококки выращивают в течение 10 дней. Далее осуществляют деструкцию стафилококков автоклавированием при 1,0 атм в течение 30 мин. Проводят детоксикацию добавлением к суспензии стафилококков формалина в два этапа. Формалин добавляют в начале до концентрации его в смеси 0,3-0,4% и инкубируют при температуре 37-40°С в течение 7-10 сут. Затем - до конечной концентрации 0,5-0,6% и инкубацией при температуре 44-46°С в течение 5-8 сут. Деструкцию стафилококков можно проводить гамма-облучением Со60 дозой 1,0-2,0·106R. Далее целевой продукт сорбируют на гидроокиси алюминия и стерилизуют автоклавированием. Изобретение повышает срок хранения и стабилизацию целевого продукта. 1 з.п.ф-лы.
Поиск по сайту

1. С помощью поисковых систем

   С помощью Google:    

2. Экспресс-поиск по номеру патента


введите номер патента (7 цифр)

3. По номеру патента и году публикации

2000000 ... 2099999   (1994-1997 гг.)

2100000 ... 2199999   (1997-2003 гг.)
Номер патента: 2139091
Класс(ы) патента: A61K39/085, C12N1/06, C12N13/00, C12N1/06, C12R1:44
Номер заявки: 99100824/13
Дата подачи заявки: 26.01.1999
Дата публикации: 10.10.1999
Заявитель(и): Закрытое акционерное общество "Агробизнесцентр"
Автор(ы): Евглевский А.А.
Патентообладатель(и): Закрытое акционерное общество "Агробизнесцентр"
Описание изобретения: Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к ветеринарии, и может быть использовано для профилактики и лечения маститов, ускорения заживления ран, иммуностимуляции и неспецифической профилактики ринотрахеита и парагриппа-3 крупного рогатого скота.
Известен способ получения стафилококковой анатоксин-вакцины путем выращивания с последующей деструкцией стафилококков, отделением культуральной жидкости, детоксикацией ее формалином, сорбцией целевого продукта на гидроокиси алюминия и его стерилизацией автоклавированием (Патент РФ N 1706631, МКИ6 A 61 K 39/085. Способ получения анатоксин-вакцины против стафилококкоза птиц. Бюл. N 3, 1992). В известном способе деструкцию проводят нагреванием микробных клеток до 85-100oC в течение 1,0-1,5 часов, к культуральной жидкости добавляют формалин одномоментно из расчета 0,6-0,8% формалина в конечной концентрации при экспозиции 45-55oC в течение 7-10 дней.
Недостатком известного способа является получение анатоксин-вакцины плохого качества (содержание в ней токсина возрастает через короткое время хранения).
Целью предлагаемого изобретения является увеличение сроков хранения целевого продукта.
Поставленная цель достигается в способе получения стафилококковой анатоксин-вакцины путем выращивания стафилококков с последующей их деструкцией, детоксикацией смеси формалином, сорбцией целевого продукта на гидроокиси алюминия и его стерилизацией автоклавированием тем, что формалин добавляют в начале до концентрации его в смеси 0,3-0,4% и инкубацией при температуре 37-40oC в течение 7-10 суток, а затем - до конечной концентрации формалина в смеси 0,5-0,6% с последующей инкубацией при температуре 44-46oC в течение 5-8 суток.
Поставленная цель достигается также тем, что деструкцию стафилококков проводят гамма-облучением Co60 дозой 1,0-2,0·106R.
В патентной и научно-технической литературе неизвестны технические решения, аналогичные заявляемому, что позволяет сделать вывод о соответствии предложения условию патентоспособности - "новизна".
Только сочетание заявленных режимов в определенной последовательности позволяет достичь эффекта, указанного в цели изобретения, т.е. заявленный способ удовлетворяет условию патентоспособности - "изобретательский уровень", в частности, проведение добавления формалина в два этапа при определенных соотношениях компонентов позволило получить неочевидный положительный эффект. Нами впервые установлено, что в течение первого этапа добавления формалина при низких его концентрациях происходит взаимодействие свободных аминогрупп, и в первую очередь лизина. При этом образуются метилоламинные группы. На втором этапе в реакции участвуют активные радикалы циклических аминогрупп, содержащие фенольные, гуанидиновые и индольные группы - это тирозин, аргинин, гистидин и триптофан. Эти группы прочно соединяются за счет активных атомов водорода с метилоламинными группами остатков лизина через метиленовые мостики. При этом блокирование формалином активных радикалов токсина приводит к его более качественной детоксикации (обезвреживанию) и образованию полимеров. Следовательно, добавление формалина в два этапа приводит к двум процессам: собственно к детоксикации токсина и стабилизации образовавшегося полимера, которая достигается внесением новой порции формалина и повышением температуры реакционной смеси. Обратное превращение анатоксина в токсин в условиях предлагаемого способа исключено.
Способ используют для получения стафилококковой анатоксин-вакцины, используемой для профилактики стафилококкоза птиц, плотоядных, а также для профилактики и лечения маститов, пневмоний, ускорения заживления ран, иммуностимуляции и неспецифической профилактики ринотрахеита и парагриппа-3 крупного рогатого скота, поэтому заявленное предложение соответствует условию патентоспособности - "промышленная применимость".
Предлагаемое изобретение иллюстрируется на следующих примерах.
Пример 1. Стафилококки выращивают, как и в известном способе, на питательной среде в течение 10 дней. Затем проводят автоклавирование при 1,0 атм в течение 30 минут. Детоксикацию проводят добавлением к суспензии стафилококков формалина в два этапа: до концентрации его в смеси 0,3% и инкубацией при температуре 37oC в течение 7 суток с последующим добавлением формалина до его конечной концентрации 0,5% и инкубацией смеси при температуре 44oC в течение 5 суток. По завершении процесса детоксикации к суспензии стафилококков добавляют, как и в известном способе, гидроокись алюминия в конечной концентрации 1 мг/мл и расфасовывают по флаконам, закрывают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками, подвергают автоклавированию при 0,6 атм в течение 20 минут.
Пример 2. Стафилококки выращивают, как и в известном способе, на питательной среде в течение 15 дней. Затем проводят гамма-облучение Co60 силой 1,0·106R. Детоксикацию проводят добавлением к суспензии стафилококков формалина в два этапа: до концентрации его в смеси 0,4% и инкубацией при температуре 40oC в течение 10 суток с последующим добавлением формалина до его конечной концентрации 0,6% и инкубацией смеси при температуре 46oC в течение 8 суток. По завершении процесса детоксикации к суспензии стафилококков добавляют, как и в известном способе, гидроокись алюминия в конечной концентрации 1 мг/мл и расфасовывают по флаконам, закрывают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками, подвергают автоклавированию при 0,6 атм в течение 20 минут.
Пример 3. Стафилококки выращивают, как и в известном способе, на питательной среде в течение 10 дней. Затем проводят гамма-облучение Co60 силой 2,0·106R. Детоксикацию проводят добавлением к суспензии стафилококков формалина в два этапа: до концентрации его в смеси 0,3% и инкубацией при температуре 37oC в течение 7 суток с последующим добавлением формалина до его конечной концентрации 0,5% и инкубацией смеси при температуре 44oC в течение 5 суток. По завершении процесса детоксикации к суспензии стафилококков добавляют, как и в известном способе, гидроокись алюминия в конечной концентрации 1 мг/мл и расфасовывают по флаконам, закрывают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками, подвергают автоклавированию при 0,6 атм в течение 20 минут.
Пример 4. Стафилококки выращивают, как и в известном способе на питательной среде в течение 15 дней. Затем проводят автоклавирование при 1,0 атм в течение 20 минут. Детоксикацию проводят добавлением к суспензии стафилококков формалина в два этапа: до концентрации его в смеси 0,4% и инкубацией при температуре 40oC в течение 10 суток с последующим добавлением формалина до его конечной концентрации 0,6% и инкубацией смеси при температуре 46oC в течение 8 суток. По завершении процесса детоксикации к суспензии стафилококков добавляют, как и в известном способе, гидроокись алюминия в конечной концентрации 1 мг/мл и расфасовывают по флаконам, закрывают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками, подвергают автоклавированию при 0,6 атм в течение 20 минут.
Предлагаемый способ позволяет увеличить сроки хранения целевого продукта с 6 месяцев до 3-5 лет, т.е. в 5-10 раз.
Формула изобретения: 1. Способ получения стафилококковой анатоксин-вакцины путем выращивания стафилококков с последующей их деструкцией, детоксикацией смеси формалином, сорбцией целевого продукта на гидроокиси алюминия и его стерилизацией автоклавированием, отличающийся тем, что формалин добавляют в начале до концентрации его в смеси 0,3 - 0,4% с инкубацией при температуре 37 - 40oС в течение 7 - 10 сут, а затем - до конечной концентрации формалина в смеси 0,5 - 0,6% с последующей инкубацией при температуре 44 - 46oС в течение 5 - 8 сут.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что деструкцию стафилококков проводят гамма-облучением Co60 дозой 1,0 - 2,0 · 106 R.