Главная страница  |  Описание сайта  |  Контакты
ШТАММ БАКТЕРИЙ ENTEROBACTER GEG ROVIAE ГИСК N259, ОБЛАДАЮЩИЙ КОМПЛЕКСОМ ФАКТОРОВ ПАТОГЕННОСТИ
ШТАММ БАКТЕРИЙ ENTEROBACTER GEG ROVIAE ГИСК N259, ОБЛАДАЮЩИЙ КОМПЛЕКСОМ ФАКТОРОВ ПАТОГЕННОСТИ

ШТАММ БАКТЕРИЙ ENTEROBACTER GEG ROVIAE ГИСК N259, ОБЛАДАЮЩИЙ КОМПЛЕКСОМ ФАКТОРОВ ПАТОГЕННОСТИ

Патент Российской Федерации
Суть изобретения: Изобретение предназначено для получения термолабильного энтеротоксина (ЛТ-энтеротоксин) и анатоксина Enterobacter gergoviae при производстве вакцин. Штамм Enterobacter gergoviae N 185 выделен из испражнений больного с микозом стоп, депонирован в коллекции государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им Л.А.Тарасевича и имеет регистрационный номер 259. Внутрикожное введение 300 млн. микробных клеток 20-часовой бульонной культуры вызывает некроз кожи кролика диаметром 3,0 см. В опыте петля тонкой кишки кролика при введении 500 млн м.т. 20-часовой бульонной культуры дает положительный результат (V/L = 1,3). Гретый при 56oС в течение 45 мин центрифугат 20-часовой бульонной культуры вызывает отек лапки мышей до 30 мг, не вызывая некроза кожи кролика. Гретая при 100oС 20-часовая культура не вызывает накопления жидкости в изолированной петле тонкого кишечника кролика (V/L = 0,3). Среды для размножения - бульон Хоттингера (pH 7,2), содержащий 5% эритроцитов кролика при температуре 37oС в течение 24 ч. Генетические особенности : Hly+, Ent+, MS+, MR+. Устойчив к пенициллину, тетрациклину, цефалексину, олеандомицину, оксациллину, эритромицину, левомицетину, карбенициллину. Штамм Enterobacter gergoviae ГИСК N 259 обладает повышенной токсинопродуцирующей способностью. 1 табл.
Поиск по сайту

1. С помощью поисковых систем

   С помощью Google:    

2. Экспресс-поиск по номеру патента


введите номер патента (7 цифр)

3. По номеру патента и году публикации

2000000 ... 2099999   (1994-1997 гг.)

2100000 ... 2199999   (1997-2003 гг.)
Номер патента: 2161197
Класс(ы) патента: C12N1/20, A61K39/02, C12N1/20, C12R1:01
Номер заявки: 99124328/13
Дата подачи заявки: 18.11.1999
Дата публикации: 27.12.2000
Заявитель(и): Башкирский государственный медицинский университет
Автор(ы): Ахтариева А.А.; Алсынбаев М.М.; Габидуллин З.Г.; Хананова Р.К.; Булгаков А.К.; Кулагин В.Ф.; Суфиярова Р.З.; Габидуллин Ю.З.; Гафаров М.М.; Очилова Р.А.
Патентообладатель(и): Ахтариева Айгуль Атласовна
Описание изобретения: Изобретение относится к биотехнологии и может быть 1 использовано для получения термолабильного энтеротоксина (ЛТ- энтеротоксина) и анатоксина Enterobacter gergoviae при производстве вакцин.
Техническим результатом является штамм Enterobacter gergoviae N 185, обладающий повышенной токсинопродуцирующей способностью.
Штамм Enterobacter gergoviae N 185 выделен из испражнений больного с микозом стоп в 1998 г. в городской больнице г.Ишимбая Республики Башкортостан, депонирован в коллекции государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л. А. Тарасевича и имеет регистрационный номер 259.
Штамм Enterobacter gergoviae ГИСК N 259 характеризуется следующими признаками:
Культуральные признаки.
При выращивании на обычных питательных средах, при температуре 37oC штамм на поверхности питательной среды растет с образованием характерных изолированных колоний с желтоватым оттенком. При выращивании в бульоне Хоттингера (pH 7,2), при температуре 37oC, в течение 24 ч вызывает равномерное помутнение с выпадением осадка.
Способы определения активности ЛТ-энтеротоксина:
Субплантарное введение мышам весом 15-16 г 0,05 мл центрифугата 20-часовой бульонной культуры вызывает отек лапки мышей более 91 мг. Аксенова Е.В. 1980 г.
Интраназальное введение 0,05 мг 20-часовой бульонной культуры вызывает гибель 95% мышей-самцов весом 15-16 г в течение 2 часов 30 минут при явлениях тонических судорог и асфиксии; Войно-Ясенецкая Н.К. 1967 г.
Внутрикожное введение 300 млн. микробных клеток 20-часовой бульонной культуры вызывает некроз кожи кролика диаметром 3,0 см;
В опыте петля тонкой кишки кролика при введении 500 млн. м.т. 20-часовой бульонной культуры дает положительный результат (V/L=1,3)
Гретый при 56oC в течение 45 минут центрифугат 20-часовой бульонной культуры вызывает отек лапки мышей до 30 мг, не вызывая некроза кожи кролика. Гретая при 100oC 20-часовая культура не вызывает накопления жидкости в изолированной петле тонкого кишечника кролика (V/L=0,3).
Условия хранения культуры после леофильной сушки при выращенной в 0,3, %-ном МПА (pH 7,2), залитым стерильным вазелиновым маслом, при температуре 4oC.
Среды для размножения - бульон Хоттингера (pH 7,2), содержащий 5% эритроцитов кролика при температуре 37oC в течение 24 часов.
Генетические особенности: Hly+, Ent+, MS+, MR+.
Устойчив к пенициллину, тетрациклину, цефалексину, олеандомицину, оксациллину, эритромицину, левомицетину, карбенициллину.
Пример 1.
0,1 мл 1 млрд. суспензии суточной агаровой культуры в физиологическом растворе сеют в стерильный бульон Хоттингера (5 мл pH 7,2,) инкубируют в термостате при 30oC в течение 20 часов, центрифугируют при 6000 об/мин в течение 7 минут. Полученную надосадочную жидкость (центрифугат) в объеме 0,05 мл вводят субплантарно в заднюю левую лапку мышей-самцов весом 15-16 г. Через 24 часа животных умерщвляют эфиром и ампутированные по голеностопному суставу лапки взвешивают на торсионных весах, при этом центрифугат штамма Enterobacter gergoviae ГИСК N 259 давал разницу между левой и правой лапками более 91 мг, остальные 20 штаммов, способные продуцировать ЛТ-энтеротоксин,- от 65 до 90 мг. Контроли - нативный стерильный бульон Хоттингера (pH 7,2) и гретый при 56oC центрифугат 20-часовой бульонной культуры 30-35 мг, соответственно.
Результаты приведены в таблице N 1.
Пример 2.
0,1 мг 1 млрд. суспензии суточной агаровой культуры сеют в бульон Хоттингера ( pH 7,2), инкубируют в термостате при 30oC в течение 20 ч и 500 млн. м.т. суспензию в объеме 1 мл вводят в сегмент изолированной петли тонкого кишечника кролика. Через 16 часов животных умерщвляют воздушной эмболией и рассчитывают соотношение объема экссудата к длине сегмента (V/L). При этом 20-часовая бульонная культура штамма Enterobacter gergoviae ГИСК N 259 оказалась способной давать накопление жидкости в большом количестве и показатель V/L составил 1,3. У остальных 20 штаммов способный продуцировать ЛТ-энтеротоксин показатель V/L колебался в пределах 0,9-1,0. При введении стерильного бульона Хоттингера и гретой при 100oC 20-часовой бульонной культуры отношение объема накопленной жидкости к длине сегмента составило 0,25 и 0,3, соответственно.
Формула изобретения: Штамм бактерий Enterobacter geg roviae ГИСК N 259, обладающий комплексом факторов патогенности.