Главная страница  |  Описание сайта  |  Контакты
Патент на изобретение №2452732

(19)

RU

(11)

2452732

(13)

C2

(51) МПК C07D311/16 (2006.01)

A61K31/352 (2006.01)

A61P25/00 (2006.01)

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ Статус: по данным на 27.08.2012 - действует Пошлина: учтена за 4 год с 01.04.2013 по 31.03.2014

(21), (22) Заявка: 2010112627/04, 31.03.2010

(24) Дата начала отсчета срока действия патента:

31.03.2010

Приоритет(ы):

(22) Дата подачи заявки: 31.03.2010

(43) Дата публикации заявки: 10.10.2011

(45) Опубликовано: 10.06.2012

(56) Список документов, цитированных в отчете о

поиске: RU 2242471 С1, 20.12.2004. SU 1149596 A, 15.12.1985. ЕР 0175541 A1, 26.03.1986.

Адрес для переписки:

191002, Санкт-Петербург, ул. Рубинштейна, 11, кв.49, А.А. Тарасенко

(72) Автор(ы):

Денисенко Петр Прокофьевич (RU),

Тарасенко Александр Александрович (RU)

(73) Патентообладатель(и):

Денисенко Петр Прокофьевич (RU),

Тарасенко Александр Александрович (RU)

(54) ХЛОРПРОПОКСИПРОИЗВОДНЫЕ 7-ОКСИ-КУМАРИНА, ОБЛАДАЮЩИЕ ТРАНКВИЛИЗИРУЮЩИМ И ГЕПАТОПРОТЕКТОРНЫМ ДЕЙСТВИЕМ

(57) Реферат:

Изобретение относится к новым хлорпропоксипроизводным 7-окси-кумарина общей формулы

где

а) 7-(3'-хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-бензо- -пирон, где R=H и R 1 и R 2 =-CH 2 -CH 2 -CH 2 -;

б) 7-(2'-метил-3'-хлорпропокси)-5,6-бензо- -пирон, где R=CH 3 ; R 1 =R 2 =H, которые обладают транквилизирующим и гепатопротекторным действием, а также к применению их в качестве транквилизирующих и гепатопротекторных препаратов. Они показали низкую токсичность при высокой биологической активности. 2 н.п. ф-лы, 10 табл.

Изобретение относится к области медицины. Оно касается биологически активных соединений, а именно хлорпропоскипроизводных 7-окси-кумарина, или умбеллиферона (7-окси-5,6-бензо-альфа-пирона).

У этих соединений в молекуле нет атома азота, они обладают транквилизирующим и гепатопротекторным действием при низкой токсичности (LD 50 более 1 г/кг).

Известен препарат диазепам, он относится к группе бензодиазепинов, химическое название - 7-хлор-2,3-дигидро-1-метил-5-фенил-1Н-1,4-бензодиазепин-2-он [Машковский М.Д. Лекарственные средства, т.1, 1987, стр.72; «Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России», 1999, стр.Е70]. Препарат обладает транквилизирующим действием, его механизм действия связан с усилением тормозного влияния GABA в ЦНС за счет повышения чувствительности GABA-рецепторов к медиатору в результате стимуляции бензодиазепиновых рецепторов. Ряд его побочных реакций связан именно с механизмом действия, с химической структурой вещества, молекула которого в семичленном цикле содержит два атома азота. Препарат проявляет, в частности, миорелаксирующее действие, что не всегда актуально в процессе лечения. Желательно иметь для лечения препараты с узконаправленным действием.

Препарат с гепатопротекторным действием Розанол взят в качестве препарата сравнения в испытаниях заявляемого изобретения. Розанол - препарат растительного происхождения [Машковский М.Д. Лекарственные средства, т.1, 1987, стр.517]. Он обладает способностью уменьшать спазмы желчевыводящих и мочевыводящих путей, обладает умеренной антибактериальной активностью. Препарат противопоказан при тяжелых поражениях паренхимальных органов, при острых воспалительных процессах в желче- и мочевыводящих путях.

Производные 5,6-бензо-альфа-пирона изучают давно с целью использования в качестве лекарственных препаратов. Так, известно, что циклические аминопроизводные 5,6-бензо-альфа-пирона обладают транквилизирующими и антидепрессивными свойствами [авт.св. 1623152, дата приор. 26.12.88 г.]. Соединения этого ряда имеют формулу

где радикал R 2 всегда содержит атом азота.

Индивидуальная чувствительность пациентов к азотсодержащим препаратам ограничивает применение этих веществ.

Цель изобретения - поиск новых производных 7-окси-кумарина (умбеллиферона), обладающих повышенной транквилизирующей активностью и отчетливым гепатопротекторным действием, причем при низкой токсичности, чтобы быть применимыми на практике.

Задача решена с помощью синтетических соединений, содержащих в молекуле атом хлора при отсутствии в молекуле азота, общая формула этих соединений

где

1) 7-(3'-хлорпропокси)-4-метил-5,6-бензо- -пирон, где R=R 2 =H; R 1 =СН 3 ;

2) 7-(3'-хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-бензо- -пирон, где R=H; R 1 и R 2 =-CH 2 -CH 2 -CH 2 -;

3) 7-(3'-хлорпропокси)-5,6-бензо- -пирон, где R=R 1 =R 2 =H;

4) 7-(2'-метил-3'-хлорпропокси)-5,6-бензо- -пирон, где R=СН 3 ; R 1 =R 2 =H.

Поиск среди синтезированных производных 5,6-бензо- -пирона был нацелен на соединения, молекулы которых не содержат азота.

Были изучены на проявление транквилизирующего и гепатопротекторного действия ранее синтезированные и описанные соединения 7-(3'-хлорпропокси)-4-метил-5,6-бензо- -пирон и 7-(3'-хлорпропокси)-5,6-бензо- -пирон( 1, 3).

У этих соединений (1, 3), ранее известных как флюоресцентная метка для определения третичных аминосоединений (АС 1149596, дата приор. 07.07.1983) и как вещества с антикальциевой активностью (патент РФ 2242471, дата приор. 31.07.2003), были выявлены искомые биологические активности. Таким образом, эти соединения являются препаратами с повышенной транквилизирующей активностью и заметным гепатопротекторным действием (результаты представлены в таблицах испытаний). Проверка их токсичности показала, что они низкотоксичны и, следовательно, могут быть применимы в практической медицине.

Химические соединения с аналогичной структурой, но разными радикалами-заместителями могут обладать разными биологическими свойствами.

Были синтезированы и изучены новые производные 7-окси-кумарина, а именно

2) 7-(3'-хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-бензо- -пирон, где R=H; R 1 и R 2 =-CH 2 -CH 2 -CH 2 -

4) 7-(2'-метил-3'-хлорпропокси)-5,6-бензо- -пирон, где R=СН 3 ; R 1 =R 2 =H.

Новые синтезированные соединения проявляют транквилизирующие и гепатопротекторные свойства, т.е. задача решена положительно.

Общая методика синтеза

Метод O-алкилирования умбеллиферона и очистки продукта реакции модифицирован и отличается от стандартного способа по изобретению, описанного в авт. св. 1623152, что позволяет повысить выход конечного заданного продукта на 20% и снизить образование побочных соединений.

Реакцию алкилирования и получение 7-(3'-хлорпропокси)-5,6-бензо- -пирона проводят в спиртовой среде при кипячении и перемешивании, по окончании алкилирования реакционную массу упаривают от спирта. Остаток растворяют в бензоле и экстрагируют непрореагировавший умбеллиферон 2% водным раствором соды. Чистоту полученного продукта реакции определяют с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ на силуфоле, УФ 254, в системе гептан:ацетон (3:2); R f продукта 0,46). Раствор упаривают в вакууме и необходимые соединения выделяют с помощью разбавления остатка эфиром или гексаном. Получают белое кристаллическое вещество с выходом 70%.

Характеристики полученных соединений.

ЯМР-спектры соответствуют заявляемым структурам.

1. 7-(3'-Хлорпропокси)-4-метил-5,6-бензо- -пирон, t пл 81-82°С.

ЯМР Н 1 (ДМСО d 6 ) , м.д.: 2,19-2,25 (М, 2Н, СН 2 ), 2,38 (С, 3Н, СН 3 ), 3,77-3,80 (т, 2Н, CH 2 ), 4,17-4,20 (т, 2Н, СН 2 ), 6,13 (С, СН), 6,90-6,91 (М, 2М, Av), 7,59-7,62 (М, 1М, Av).

2. 7-(3'-Хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-бензо- -пирон, t пл 129-130°С.

C 15 H 15 ClO 3 . Мол.вес 278,73. В %: С 64.64; Н 5.42; Cl 12.72; О 17.22.

Найдено: С 64.81, Н 5.31.

ЯМР Н 1 (хлороформ d 6 ) , м.д.: 2,16-2,30 (М, 4Н, CH 2 , CH 2 ), 2,83-2,90 (М, 2Н, СН 2 ), 2,98-3,06 (М, 2Н, CH 2 ), 3,68-3,73 (М, 2Н, СН 2 ), 4,13-4,20 (М, 2Н, CH 2 ), 6,89-6,93 (М, 2Н, Av), 7,30-7,49 (М, 1Н, Av).

3. 7-(3'-Хлорпропокси)-5,6-бензо- -пирон, t пл 54-56°С.

ЯМР Н 1 (ДМСО d 6 ) , м.д.: 2,19-2,25 (М, 2Н, СН 2 ), 3,77-3,80 (т, 2Н, CH 2 ), 4,19-4,22 (М, 2Н, СН 2 ), 6,23-6,25 (Д, 1Н-СН=), 6,91-6,97 (М, 2H,-CH=, Av), 7,58-7,61 (д, 1Н, Av), 7,93-7,96 (д, 1Н, Av).

4. 7-(2'-Метил-3'-хлорпропокси)-5,6-бензо- -пирон, t пл 66-68°С.

C 13 H 13 ClO 3 . Мол.вес 252,69. В %: С 61.79; Н 5.19; Cl 14.03; О 18.99.

Найдено: С 61.32, Н 5.29.

ЯМР Н 1 (ДМСО d 6 ) , м.д.: 1,05-1,07 (д, 3Н, СН 3 ), 2,29-2,34 (М, 1Н, СН), 3,72-3,73 (М, 2Н, СН 2 ), 3,99-4,01 (М, 2Н, CH 2 ), 6,25-6,27 (д, 1Н, -СН=), 6,92-6,96 (М, 2Н, -СН=, Av), 7,58-7,60 (д, 1Н, Av), 7,93-7,96 (д, 1Н, Av).

Испытания транквилизирующего действия соединений.

Новые соединения (1, 2, 3, 4) в пяти дозах (0,1-20 мг/кг массы животного) внутрибрюшинно вводят белым мышам по 12 особей в каждой группе. Контрольной группе животных вводят равновеликий объем физиологического раствора. Через 30 минут после этого мышам вводят внутривенно тиопентал натрия от пороговой дозы 15 мг/кг и учитывают количество уснувших животных (боковое положение), по которому рассчитывают 50%-ную эффективную дозу (ЭД 50 ). Результаты испытания потенцирующего действия приведены в таблице 2.

Из данных этой таблицы рассчитывают по методу Личфильда и Уилкоксона ЭД 50 , которая составила в мг/кг: соединение 1 - 32,0t1,4; соединение 2 - 38,1t1,4; соединение 3 - 40,3t2,3; соединение 4 - 45,4t1,8.

В данных испытаниях вещества дозировались в величинах, составляющих 0,5 ЭД 50 . Из таблицы 3 видно, что предложенные соединения в большей степени, чем диазепам, восстанавливают вертикальную и горизонтальную составляющие двигательной активности в стрессовых условиях, нормализуют вегетативные проявления стресса, показателями которых являются число дефекаций и грумминг.

Данные о токсичности соединений 1-4 (по параметру средней летальной дозы ЛД 50 ), получены в опытах на белых мышах при внутривенном и пероральном путях введения заявляемых соединений. Данные представлены в таблице 1.

Для оценки взаимосвязи между отдельными паттернами поведения в тесте «открытого поля» результаты испытаний, проведенные как и в предыдущем случае, с некоторым расширением учитываемых паттернов, обрабатывают на ЭВМ с вычислением коэффициента Спирмена между отдельными паттернами поведения индивидуально для каждого животного, затем усредняют их. Коэффициенты Спирмена приводятся при Р=0,05. Результаты испытания приведены в таблице 4. Из таблицы 4 следует, что соединение 1 усиливает корреляционную связь между «побежками» и «вставаниями», снижает корреляционную связь между паттернами «дефекация» и «побежки». Соединение 2 вызывает подобную зависимость между отдельными паттернами, но повышает корреляционную связь между паттернами «дефекация» и «вставание». Соединение 3 усиливает связь между «побежками» и вставанием». Соединение 4 вызывает увеличение связи между «вставанием» и «сидением на месте», уменьшение связи между паттернами «вставание» и «грумминг», что свидетельствует о преимущественно угнетающем действии соединения. Все соединения ослабляют корреляционную связь между паттернами «дефекация» и «сидение на месте», что дополнительно доказывает наличие транквилизирующего действия.

Анксиолитическую активность испытуемых соединений изучают по тесту конфликтной ситуации. В опытах на 12 мышах-самцах и таком же количестве контрольных животных учитывали количество подхода к поилке и наказуемых взятий воды. Для этого животных, лишенных воды, помещали в камеру, состоящую из двух отсеков, в одном из которых имеется электродный пол и поилка. Животное помещали в отсек без электродного пола, при перемещении его в отсек с электродным полом и подходе к поилке на пол подавали электрический ток с заданными параметрами, которые строго выдерживают в течение всего опыта. Результаты испытаний приведены в таблице 5. Соединения обладают более выраженной анксиолитической активностью, чем диазепам.

Миореласирующее действие оценивают по методу вращающегося стержня. В таблице 6 приведены данные об удержании на стержне мышей при введении различных доз испытуемых соединений (испытания в каждой группе проводятся на 12 мышах). Установлено, что новые соединения практически лишены миорелаксирующих свойств.

Гепатозащитное действие соединений.

Гепатозащитное действие хлорпропоксипроизводного 7-окси-кумарина (умбеллиферона) оценивали по

- выживаемости животных;

- изменениям антитоксической функции печени (продолжительность гексеналового сна);

- экскреторной функции печени (бромсульфалеиновая проба);

- активности ферментов (АсАТ, АлАТ, ЩФ, ГГТ) в сыворотке крови;

- по изменениям белкового обмена;

- гистологическим изменениям ткани печени.

Выживаемость животных.

Гепатозащитное действие соединений 1-4 проявилось в том, что выживаемость животных, которым вводили ежедневно по 50 или 250 мг/кг на фоне введения CCl 4 , была почти в 2 раза выше (90%), чем в контроле (55%), и на 15% выше, чем у животных, получавших Розанол в дозе 30 мг/кг в течение месяца (таблица 8).

Состояние антитоксической функции печени (продолжительность гексеналового сна).

Соединения 1-4 в указанных дозах способствовали восстановлению антитоксической и секреторной функций печени: продолжительность гексеналового сна сократилась с 88±5 мин в контроле до 59±4 мин в опыте. Секреция бромсульфалеина у подопытных животных возросла в два раза по сравнению с контролем.

Состояние активности ферментообразовательной функции печени.

Соединения 1-4 в дозе 10 мг/кг и особенно 50 мг/кг достоверно проявили защитное действие, что сказалось на активности АсАТ, АлАТ, ЩФ и ГГТ. В этих опытах эффект соединений 1-4 в дозе 10 мг/кг был сопоставим с эффектом препарата сравнения Розанола в дозе 30 мг/кг (таблица 9).

О благоприятном влиянии соединений 1-4 на белковообразовательную функцию печени при длительном его применении можно судить по данным, представленным в таблице 10: соединения 1-4 при затравке CCl 4 способны поддерживать белковообразовательную функцию печени практически на уровне интактных животных, предупреждать снижение концентрации альбуминов в крови и сохранять соотношение альбуминов и глобулинов на уровне, близком к таковому у интактных животных (таблица 10).

Морфологические показатели состояния печени.

Морфологические исследования печени крыс после введения CCl 4 и лечения соединениями 1-4 показали отчетливые различия. Введение CCl 4 у контрольных животных вызывал тяжелые дистрофические изменения в печени, выраженность которых начинала убывать с 15 суток, но не достигала полного восстановления даже к концу месяца, в то время как при лечении соединениями 1-4 параллельно с процессами повреждения уже на 7-9-й день отмечались компенсаторно-приспособительные процессы. Интенсивность их усиливалась и намного опережала картину восстановления у контрольных животных. У животных, получавших соединения 1-4, были отмечены более ранние сроки обратного развития процессов повреждения, которые сочетались с ядерными изменениями, отражающими интенсивность процессов компенсации.

Контрольная группа

7 дней. Тотальное поражение печени, выраженное с различной интенсивностью в пределах одного наблюдения. Повреждения преимущественно центральных отделов долек, реже - практически всей территории долек, исключая перипортальную зону. Гепатоциты - в состоянии мелко- и крупнокапельной жировой дистрофии, встречаются участки гидропической дистрофии. На этом фоне группы и отдельные гепатоциты в состоянии некробиоза, некроза, баллонной дистрофии. Клеточная реакция на некроз и дистрофию минимальна, в основном вокруг центральных вен. Портальные тракты - без особенностей. Кровенаполнение неравномерное, единичные диапедезные кровоизлияния. В некоторых участках периферических долек - гипертрофия ядер гепатоцитов и единичные митозы.

Подопытная группа - лечебное введение соединений 1-4

7 дней. Во всех наблюдениях преобладает мелко- и крупнокапельная жировая дистрофия, четко ограниченная центральными отделами долек. Некроз гепатоцитов отсутствует. В ряде случаев наряду с жировой имеется гидропическая дистрофия.

Контрольная группа

15 дней. Масштаб и интенсивность жировой дистрофии значительно снижены, имеет место очаговое распространение, четко ограниченное центром долек. Преобладает зернистая и очаговая гидропическая дистрофия. Встречаются очаговые внутридольковые лимфомакрофагальные инфильтраты. Отчетливо видно набухание и умеренная гиперплазия ретикулоэндотелия.

Подопытная группа - лечебное введение соединений 1-4

15 дней. Жировая дистрофия отсутствует или она носила мелкоочаговый характер в отдельных участках срезов. Преобладает очаговая гидропическая дистрофия. Значительно возрастает в сравнении с 7 днем исследования число клеток с гипертрофированными ядрами, которые расположены на протяжении всей дольки, но преобладают в периферических отделах. В портальных трактах небольшие лимфоидные инфильтраты.

Контрольная группа

21 день. Во всех наблюдениях на небольшом протяжении очаговая гидропическая дистрофия гепатоцитов. В большинстве участков сохранено радиальное расположение балок, лишь местами их дискомплексация. В периферических отделах долек значительное число гепатоцитов с гипертрофированными ядрами, встречаются группы двуядерных клеток. Портальные тракты несколько утолщены, подчеркивают границы долек, в них слабо выраженная лимфоидная инфильтрация.

Подопытная группа - лечебное введение соединений 1-4

21 день. Очаговая гидропическая и зернистая дистрофия, преимущественно в центральных отделах долек, там же слабо выраженные проявления дискомплексации гепатоцитов. По периферии долек большинство клеток с выраженной гипертрофией и гиперхромностью ядер, встречается значительное число двуядерных клеток. Портальные тракты со слабо выраженным склерозом, слабо выраженной лимфоидной инфильтрацией.

Контрольная группа

28 день. Преобладают дольки с радиальным расположением балок, в которых имеется слабо и умеренно выраженная зернистая дистрофия. В отдельных дольках - очаговая гидропическая дистрофия гепатоцитов. В периферических отделах долек - значительное число гепатоцитов с гипертрофией ядер, встречаются группы двуядерных клеток. Портальные тракты несколько утолщены, подчеркивают границы долек со слабо выраженной лимфоидной инфильтрацией. Признаки нарушения дольковой архитектоники и внутридолького склероза отсутствуют.

Подопытная группа - лечебное введение соединений 1-4

28 день. Явления дистрофии, в основном гидропической и зернистой, нерегулярны, слабо выражены. Еще более возрастает полиморфизм ядер периферических отделов долек за счет гипертрофии и гиперхроматоза ядер большинства гепатоцитов. Портальные тракты подчеркивают границы долек, благодаря тенденции к склерозу и лимфоидной инфильтрации.

Таким образом, при сравнительном изучении ткани печени животных контрольных и опытных групп в указанные сроки после введения четыреххлористого углерода и лечения соединениями 1-4 выяснились следующие особенности характера и течения патологических процессов:

- четыреххлористый углерод в использованной дозировке и сроках воздействия вызывал в паренхиме печени повреждения, которые проявлялись в виде дистрофических, некробиотических и в меньшей степени некротических изменений. Преобладающим и интенсивно выраженным видом дистрофии в контрольной группе была жировая дистрофия с поражением центральных отделов долек. При лечебном введении соединений 1-4 и, особенно при введении этого вещества с профилактической и лечебной целью, преобладающим типом дистрофии были зернистая и гидропическая;

- наиболее интенсивными дистрофические изменения были на 7-й день исследования; на 15-й день их выраженность была значительно снижена, даже в контрольной группе;

- наименее выраженными дистрофические изменения были в группе животных с профилактическим и лечебным применением соединений 1-4, к 15 дню они были уже слабо выраженными и непостоянными;

- в сроки 21, 28 дней во всех группах опыта и в контроле проявления повреждения практически отсутствовали или имели мелкоочаговый характер;

- параллельно с процессами повреждения в ткани печени развивались компенсаторно-приспособительные процессы. Однако в контрольной группе они возникали только на 15 день, а в опытных - уже на 7 сутки. В опытных группах, особенно при введении соединений 1-4 с профилактической и лечебной целью, интенсивность их значительно нарастала и ядерные изменения в виде гипертрофии, гиперхроматиз ма, двуядерности имели распространенный характер;

- стромальные и клеточные реакции были выражены незначительно как в контроле, так и в опытных группах. В контрольной группе, в отличие от опытных, на 15 сутки возникала активность ретикулоэндотелия, и был выражен склероз портальных трактов с их лимфоидной инфильтрацией.

Таким образом, степень повреждения и динамика течения патологических процессов в сравниваемых группах свидетельствовали о более интенсивных и тяжелых формах повреждения ткани печени CCl 4 в контрольной группе, более поздних сроках обратного их развития, менее выраженных ядерных изменениях гепатоцитов, характерных для компенсаторно-приспособительных реакций в ответ на повреждение. При сравнении опытных групп характерным являются менее тяжелые, обратимые формы повреждения гепатоцитов, меньшая степень их распространения, отсутствие некроза, более ранние сроки обратного развития процессов повреждения и постоянное сочетание повреждения с ядерными изменениями, отражающими интенсивность процессов компенсации. Наиболее отчетливо эти явления наблюдались в серии опытов с введением соединений 1-4 в качестве профилактического и лечебного средства.

Вариабельность количественных и качественных характеристик описанных процессов позволяет говорить об определенных тенденциях и существенных различиях их течения в контрольных и опытных группах.

Из приведенных примеров видно, что алифатические производные проявляют незначительное миорелаксирующее действие и значительно отличаются от наиболее активного транквилизатора диазепама, что свидетельствует об их пониженном побочном эффекте.

Таким образом, алифатические хлорпропоксипроизводные 5,6-бензо- -пирона оказывают выраженное транквилизирующее действие и по анксиолитической активности превосходят таковую у диазепама. Кроме того, они проявляют гепатопротекторное действие без побочных эффектов (таблицы 8, 9, 10).

Таблица 1

Токсичность новых соединений

Соединение

Химическое название

ЛД 90 , мг/кг, Р=0,05

Внутрибрюшинно

Перорально

1

7-(3'-хлорпропокси)-4-метил-5,6-бензо- -пирон

185,0

522,0

2

7-(3'-хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-

бензо- -пирон

220,0

610,0

3

7-(3'-хлорпропокси)-5,6-бензо- -пирон

250,0

690,0

4

7-(2'-метил-3-хлорпропокси)-5,6-бензо- -пирон

100,0

302,0

Таблица 2

Потенцирование действия гексенала (15 мг/кг) соединениями 1-4

Доза соединения 1, мг/кг (соединение 1)

0, шт. (контроль)

10

20

30

40

50

Заснуло мышей

0, шт.

0

0

2

6

8

0, %

0

0

17,0

50,0

67,8

Доза соединения 1, мг/кг (соединение 2)

0, шт. (контроль)

0,025

0,05

0,1

0,25

2,0

Заснуло мышей

0, шт.

0

5

6

8

12

0, %

0

42,0

50,0

67,0

100,0

Доза соединения 1, мг/кг

0, шт. (контроль)

0,1

0,25

0,5

1,0

2,0

(соединение 3)

Заснуло мышей

0, шт.

1

3

5

10

12

0, %

8,0

25,0

41,0

83,0

100,0

Доза соединения 1, мг/кг (соединение 4)

0, шт. (контроль)

0,025

0,75

1,0

1,5

2,0

Заснуло мышей

0, шт.

0

10

11

12

12

0, %

0

83,3

92,0

100,0

100,0

Таблица 3

Результаты сравнительных испытаний транквилизирующего действия

Вещество

К контролю, %

побежки

вставания

дефекации

грумминг

Физиологический раствор

28,2±4,4

6,1+1,1

280,2+12,3

2,2+0,4

Диазепам

71,6±9,2

82,4±9,7

46,5±6,9

105,7±11,5

Соединение 1

90,3±9,6

102,4±6,9

82,1±5,4

126,4±2,6

Соединение 2

95,5±8,9

108,5±8,2

50,2±5,1

117,1±12,8

Соединение 3

100,1±0,7

100,2±1,0

46,5±7,2

104,6±10,9

Соединение 4

119,3±0,1

106,8±9,7

40,4±6,7

100±9,2

Таблица 5

Сравнительные испытания анксиолитической активности соединений (I) и диазепама (прототипа)

Испытуемое соединение

Доза, мг/кг

Количество

Подход

Наказуемое взятие воды

Контроль

-

16

4

Соединение 1

1,0

19

15

5,0

29

16

10,0

36

20

Соединение 2

0,5

16

14

1,0

32

17

Соединение 3

0,5

24

10

1,0

30

18

Соединение 4

0,5

36

12

1,0

28

15

Диазепам

1,0

32

18

Таблица 6

Испытания стимулирующих центральную нервную систему (антидепресивных) свойств соединений 1-3 и соединения-аналога

Вещество

Доза, мг/кг

Общее время иммобилизации, М+м

Т, Р=0,05

Бидистиллированная вода (контроль)

350,0±19,9

Соединение 1

0,5

302,6±20,2

1,4

1,0

252,0±15,6

3,9

Соединение 2

0,5

324,6±16,8

0,1

1,0

250,2±12,4

4,2

Соединение 3

0,5

312,4±13,0

1,6

1,0

201,0±12,6

6,2

Соединение-аналог

0,5

344,6±11,4

0,2

1,0

286,0±18,2

2,0

Таблица 7

Миорелаксирующее действие соединений I, II, III и аналога

Вещество

Количество мышей, удержавшихся на стержне, при введении соединений в дозе, мг/кг

1

5

10

100

125

150

Соединение 1

12

11

8

6

6

2

Соединение 2

12

8

6

2

0

0

Соединение 3

12

8

7

1

0

0

Соединение 4

12

7

5

1

0

0

Диазепам

6

1

0

0

0

0

Таблица 8

Выживаемость крыс с подострым токсическим поражением печени, леченных соединениями 1-4 и Розанолом

Серия опытов и дозы

Число крыс в серии, принятое за 100%

Из них выжило

Число, абс.

В процентах

Интактные

20

20

100

CCl 4 , 2 мл/кг через день в течение месяца

20

11

55

CCl 4 , 2 мл/кг, по схеме + соединения 1-4 20 мг/кг ежедневно в течение месяца

20

15

75

CCl 4 2 мл/кг по схеме + соединения 1-4 50 мг/кг ежедневно в течение месяца

20

18

90

CCl 4 2 мл/кг по схеме Розанол 30 мг/кг ежедневно в течение месяца

20

15

75

Таблица 9

Влияние соединений 1-4 и Розанола на активность ферментов сыворотки крови у крыс с подострым токсическим поражением печени (среднее из 15 в каждой серии)

Серия опытов и дозы

АсАТ, мкмоль/л

АлАТ, мкмоль/л

ЩФ, нмоль/с.л

ГГТ, нмоль/с.л

Интактные

0,42±0,06

0,36±0,02

581,48±0,2

548,2±0,1

CCl 4 , 2 мл/кг через день в течение месяца

2,33±0,03*

2,16±0,01*

1695,48±0,2*

1839,12±0,8*

CCl 4 , 2 мл/кг по схеме +

1,48±0,05* аб

1,88±0,02* аб

1048,31±0,3* аб

826,12±0,5* аб

соединения 1-4, 10 мг/кг ежедневно в течение месяца

CCl 4 , 2 мл/кг по схеме + соединения 1-4 50 мг/кг ежедневно в течение месяца

1,18±0,02* аб

0,98±0,02* аб

933,15±0,6* аб

483,41±0,2аб

CCl 4 2 мл/кг по схеме Розанол 30 мг/кг ежедневно в течение месяца

1,33±0,02* a

1,13±0,01* a

1008,10±0,3* а

516,16±0,4 a

Примечание: * - р 0,05 по отношению к интактным животным;

а - р 0,05 по отношению к контрольной группе животных;

б - р 0,05 по отношению к группе животных, получавшим Розанол.

Формула изобретения

1. Хлорпропоксипроизводные 7-окси-кумарина общей формулы

,

где а) 7-(3'-хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-бензо- -пирон, где R=H; R 1 и R 2 =-CH 2 -CH 2 -CH 2 -,

б) 7-(2'-метил-3'-хлорпропокси)-5,6-бензо- -пирон, где R=CH 3 ; R 1 =R 2 =H, обладающие транквилизирующим и гепатопротекторным действием.

2. Применение хлорпропоксипроизводных 7-окси-кумарина общей формулы

,

где а) 7-(3'-хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-бензо- -пирон, где R=H; R 1 и R 2 =-CH 2 -CH 2 -CH 2 -,

б) 7-(2'-метил-3'-хлорпропокси)-5,6-бензо- -пирон, где R=CH 3 ; R 1 =R 2 =H,

с) 7-(3'-хлорпропокси)-4-метил-5,6-бензо- -пирон, где R 1 =CH 3 , R 1 =R 2 =H,

в) 7-(3'-хлорпропокси)-5,6-бензо- -пирон, где R=R 1 =R 2 =H, в качестве транквилизирующих и гепатопротекторных препаратов.