Главная страница  |  Описание сайта  |  Контакты
Патент на изобретение №2461550

(19)

RU

(11)

2461550

(13)

C2

(51) МПК C07D277/18 (2006.01)

A61K31/426 (2006.01)

A61P7/02 (2006.01)

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ Статус: по данным на 17.09.2012 - нет данных Пошлина:

(21), (22) Заявка: 2009138208/04, 15.10.2009

(24) Дата начала отсчета срока действия патента:

15.10.2009

Приоритет(ы):

(22) Дата подачи заявки: 15.10.2009

(43) Дата публикации заявки: 20.04.2011

(45) Опубликовано: 20.09.2012

(56) Список документов, цитированных в отчете о

поиске: Пулина Н.А и др. Синтез и биологическая активность солей гетероциклических аминов и гетериламидов на основе 4-арил-2,4-диоксобутановых кислот. Вопросы биологической медицинской и фармацевтической химии, 2008, 2, с.37-40. Катаев С.С. и др. Синтез и фармакологическая активность солей ароилпировиноградных кислот с гетериламинами. -Химико-фармацевтический журнал, 2004, т.38, 3, с.16-18. GB 1436502 А, 19.05.1976.

Адрес для переписки:

614990, г.Пермь, ГСП-277, Ленина, 48, ГОУ ВПО ПГФА Росздрава, патентный отдел

(72) Автор(ы):

Пулина Наталья Алексеевна (RU),

Сыропятов Борис Яковлевич (RU),

Собин Фёдор Владимирович (RU),

Ковалёва Марина Юрьевна (RU),

Антонов Сергей Георгиевич (RU),

Вахрин Михаил Иванович (RU)

(73) Патентообладатель(и):

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО ПГФА Росздрава) (RU)

(54) 2-ГИДРОКСИ-4-ОКСО-4-(4-ХЛОРФЕНИЛ)-2-БУТЕНОАТ ТИАЗОЛИНАММОНИЯ, ОБЛАДАЮЩИЙ АНТИКОАГУЛЯНТНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

(57) Реферат:

Настоящее изобретение относится к веществам класса 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеноатов гетериламмония, а именно к 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-хлорфенил)-2-бутеноат тиазолинаммонию, обладающему антикоагулянтной активностью, формулы

1 табл.

Изобретение относится к области органической химии, к новым биологически активным веществам класса 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеноатов гетериламмония, а именно к 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-хлорфенил)-2-бутеноату тиазолинаммония (1) формулы

обладающему антикоагулянтной активностью, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве антикоагулянтного средства.

Ближайшим аналогом по структуре заявляемому соединению является 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-хлорфенил)-2-бутеноат 5-этил-1,3,4-тиадиазолил-аммония (2) [Синтез и биологическая активность солей гетероциклических аминов и гетериламидов на основе 4-арил-2,4-диоксобутановых кислот / Н.А.Пулина., В.В Залесов, В.В.Юшков [и др.]. // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2008. - 2. - С.37-40] формулы

Структурный аналог 2 обладает более слабой антикоагулянтной активностью. Эталоном сравнения выбран гепарин (3), который широко применяется в лечебной практике и является аналогом по действию [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Новая волна», 2005. - Т.2. - С.475].

Задачей изобретения является поиск в ряду 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеноатов гетериламмония веществ с выраженной антикоагулянтной активностью и низкой токсичностью.

Поставленная задача достигается получением 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-хлорфенил)-2-бутеноата тиазолинаммония (1), обладающего высокой антикоагулянтной активностью и низкой токсичностью. Заявляемое соединение 1 синтезируют взаимодействием 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-хлорфенил)-2-бутеновой кислоты (4) с 2-аминотиазолином в безводном хлороформе при эквимолярном соотношении реагентов, при температуре 20-25°С с последующим выделением целевого продукта известными методами по схеме

Пример 1 получения соединения 1. К раствору 1.02 г (0.01 моль) 2-аминотиазолина в 30 мл безводного хлороформа прибавляют суспензию 2.27 г (0.01 моль) 4-(4-хлорфенил)-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновой кислоты (2) в 20 мл того же растворителя. Реакционную смесь перемешивают при температуре 20-25°С в течение одного часа до полного растворения реагента. Раствор выдерживают 24 ч, реакционную смесь охлаждают до 0°С, выпавший осадок отфильтровывают, перекристаллизовывают из спирта этилового. Выход 2.98 г (91%). Т.пл. 156-158°С. Найдено, %: С 47.38; Н 4.12; N 8.47. C 13 H 13 ClN 2 O 4 S. Вычислено, %: С 47.49; Н 3.99; N 8.52.

ИК-спектр (Specord M80, вазелиновое масло, , см -1 ): 3170 ш (N + H 3 , ОН), 1682 (С 1 =О), 1650, 1600 (С 4 =О, C=N, C=C). Спектр ЯМР 1 H (BS-567A (100 МГц), ДМСО-d 6 , ГМДС, , м.д.): 3.55 т (2 Н, СH 2 ), 3.80 т (2 Н, CH 2 ), 6.13 с (1 Н, СН), 7.37-7.84 м (7 Н, С 6 Н 4 , NH 3 ).

Заявляемое соединение 1 представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, растворимое в воде, спирте этиловом, диоксане, труднорастворимое в хлороформе.

У соединения 1 изучена прямая антикоагулянтная активность. Исследования проводили с помощью коагулометра «Минилаб 701». Для изучения использовали нитратную (3,8%) кровь собаки (9:1). Влияние соединения на свертывание крови изучали в концентрации 1 мг/мл. В качестве эталона прямой антикоагулянтной активности использовали гепарин, который испытывали в концентрации 1 ЕД/мл крови. Результаты обработаны статистически с определением критерия Стьюдента с помощью статистических программ Windows XP (Excel) и представлены в таблице.

Антикоагулянтная активность и острая токсичность соединения 1, структурного аналога 2 и гепарина

Соединение

Время свертывания, с

% изменения свертываемости

Р

ЛД 50 , мг/кг

Контроль

опыт

1

45,4±1,57

82,5±4,52

-81,7

<0,001

379

2

29,4±2,40

36,4±4,2

-23,8

<0,05

282

Гепарин

29,9±0,48

36,6±1,82

-22,4

<0,01

3000

Как видно из таблицы, исследуемое соединение 1 достоверно увеличивает время свертывания цитратной крови на 81,7%, значительно превышая активность гепарина и структурного аналога 2.

Острую токсичность заявляемого соединения 1 при внутрибрюшинном введении изучали на белых мышах обоего пола массой 18-20 г с определением ЛД 50 [Методические указания по изучению общетоксического действия фармакологических веществ. // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. / Под общей редакцией чл.-корр. РАМН, проф. Р.У.Хабриева. - 2-изд., перераб., и доп.. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - С.41-54]. В каждой серии использовались 6 животных. Наблюдение вели ежечасно в течение суток после введения соединения 1 в виде взвеси в 2% крахмальном растворе. Контрольным животным вводили эквиобъемное количество 2% крахмального раствора. Результаты обрабатывали по Прозоровскому с вычислением средней смертельной дозы (ЛД 50 ) при Р=0,05 [Прозоровский В.Б., Прозоровская М.П., Демченко В.И. // Фармакология и токсикология, - 1978. - 4. - С.497-502].

Установлено, что ЛД 50 соединения 1 составляет 379 мг/кг, оно в 1,34 раза менее токсично, чем структурный аналог 2. Также известно, что ЛД 50 гепарина составляет 3000 мг/кг [Розкин М.Я., Левина М.Н., Ефимов В.С. И др. Сравнительное исследование антикоагулянтной активности сульфатированных полисахаридов бурых морских водорослей. // Фармакол. и токсикол. - 1988. - 4. - С.63-68]. Согласно классификации токсичности препаратов, соединение 1 относится к классу малотоксичных веществ [Измеров И.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов. - М.: Медицина, 1977, с.196-197].

Таким образом, 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-хлорфенил)-2-бутеноат тиазолинаммония (1) проявляет высокую антикоагулянтную активность и меньшую токсичность по сравнению со структурным аналогом 2, что делает возможным его использование в медицине для создания новых лекарственных препаратов, обладающих антикоагулянтной активностью.

ЛИТЕРАТУРА

1. Синтез и биологическая активность солей гетероциклических аминов и гетериламидов на основе 4-арил-2,4-диоксобутановых кислот / Н.А.Пулина, В.В.Залесов, В.В.Юшков [и др.]. // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2008. - 2. - С.37-40.

2. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Новая волна», 2005. - Т.2, - С.562-563.

3. Методические указания по изучению общетоксического действия фармакологических веществ. // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. / Под общей редакцией чл.-корр. РАМН, проф. Р.У.Хабриева. - 2-изд., перераб., и доп. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - С.41-54.

4. Прозоровский В.Б., Прозоровская М.П., Демченко В.И. Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и ее ошибки. // Фармакология и токсикология. - 1978. - 4. - С.497-502.

5. Розкин М.Я., Левина М.Н., Ефимов В.С. и др. Сравнительное исследование антикоагулянтной активности сульфатированных полисахаридов бурых морских водорослей. // Фармакол. и токсикол. - 1988. - 4. - С.63-68.

6. Измеров И.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов. - М.: Медицина, 1977. - С.196-197.

Формула изобретения

2-Гидрокси-4-оксо-4-(4-хлорфенил)-2-бутеноат тиазолинаммония формулы:

обладающий антикоагулянтной активностью.