Главная страница  |  Описание сайта  |  Контакты
Патент на изобретение №2465655

(19)

RU

(11)

2465655

(13)

C1

(51) МПК G09B23/28 (2006.01)

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ Статус: по данным на 17.10.2012 - нет данных Пошлина:

(21), (22) Заявка: 2011131340/14, 26.07.2011

(24) Дата начала отсчета срока действия патента:

26.07.2011

Приоритет(ы):

(22) Дата подачи заявки: 26.07.2011

(45) Опубликовано: 27.10.2012

(56) Список документов, цитированных в отчете о

поиске: УШКЕВИЧ А.Л. Фотодинамическая терапия в лечении острого деструктивного панкреатита, парапанкреатита в эксперименте. - Новости хирургии, 2010, 5, с.12-19. RU 2174259 C1, 27.09.2001. RU 2007149169 A, 10.07.2009. RU 2181599 C2, 27.04.2002. БУЯНОВ В.М. и др. Моделирование острого панкреатита. - Клиническая хирургия. 1989, 11, с.24-26.ДИБИРОВ А.Д. и др. Изменения органов панкреатогепатодуоденальной зоны при экспериментальном остром липогенном панкреатите. - Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2000, 8, с.813-817.

Адрес для переписки:

660022, г.Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1, КрасГМУ, патентный отдел

(72) Автор(ы):

Цедрик Николай Игоревич (RU),

Теплякова Ольга Валериевна (RU),

Винник Юрий Семенович (RU)

(73) Патентообладатель(и):

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "КРАСНОЯРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ ПРОФЕССОРА В.Ф. ВОЙНО-ЯСЕНЕЦКОГО МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ (RU)

(54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ИНФИЦИРОВАННОГО ПАНКРЕОНЕКРОЗА

(57) Реферат:

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной хирургии. Для моделирования инфицированного панкреонекроза выполняют ревизию брюшной полости с мобилизацией поджелудочной железы. В дистальной части правой доли в поперечном направлении на протяжении 3 см выполняют травматизацию поджелудочной железы зажимом Бильрота три раза в разных местах. В паренхиму железы вводят по 0,2 мл аутожелчи и клинического штамма Acinetobacter baumannii в количестве 10 5 КОЕ/мл. Через три дня животное выводят из эксперимента, проводят забор крови и ткани поджелудочной железы с последующей их заморозкой при температуре 77К. С помощью метода электронного парамагнитного резонанса в крови определяют уровень трансферрина, церулоплазмина и метгемоглобина, в ткани поджелудочной железы - величину свободного железа, трансферрина. При увеличении показателей метгемоглобина и церулоплазмина до 0,16±0,05 усл. ед. и 3,68±1,02 усл. ед. соответственно, снижении концентрации трансферрина крови до 0,83±0,24 усл. ед., а также увеличении уровня свободного железа на 153% и трансферрина на 206% по сравнению с нормой в ткани поджелудочной железы судят о развитии панкреонекроза. Способ позволяет моделировать инфицированный панкреонекроз путем введения аутожелчи и патогенетически обоснованного и дозированного возбудителя в паренхиму поджелудочной железы после ее травматизации. 2 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для изучения патогенеза и разработки способов направленной терапии и диагностики данного заболевания в условиях экспериментального моделирования.

На данный момент известно множество способов моделирования острого панкреатита в эксперименте с использованием селективной перевязки внепеченочных желчных протоков, однако лишь небольшая часть из них отвечает современным представлениям о его патогенезе [1, 5]. Наиболее важными моментами которых являются наличие препятствия для оттока панкреатического сока в результате отека поджелудочной железы, спазма большого дуоденального соска, обтурации его конкрементами, а также с высокой секреторной активностью органа [2, 4]. Недостатками этих способов являются необходимость выполнения дополнительных оперативных вмешательств с внутрипротоковым введением аутожелчи без применения инфекционного агента.

Наиболее близким к предлагаемому является способ моделирования острого деструктивного панкреатита, включающий целенаправленную травматизацию поджелудочной железы, с последующим введением в паренхиму органа микробной взвеси [3]. Однако недостатком данного способа является отсутствие дозированного и патогенетически обоснованного инфекционного возбудителя.

Задача изобретения - повышение воспроизводимости и технической простоты способа моделирования инфицированного панкреонекроза.

Поставленную задачу решают за счет того, что в дистальной части правой доли в поперечном направлении на протяжении 3 см выполняют травматизацию поджелудочной железы зажимом Бильрота 3 раза в разных местах, после чего шприцем в паренхиму железы вводят по 0,2 мл аутожелчи и клинического штамма Acinetobacter baumannii в количестве 10 5 КОЕ/мл, через 3 дня животное выводят из эксперимента и проводят забор крови, ткани поджелудочной железы с последующей их заморозкой при температуре 77К, затем с помощью метода электронного парамагнитного резонанса в крови определяют уровень трансферрина, церулоплазмина и метгемоглобина, в ткани поджелудочной железы - величину свободного железа, трансферрина: при увеличении показателей метгемоглобина и церулоплазмина до 0,16±0,05 усл. ед. и 3,68±1,02 усл. ед. соответственно, снижении концентрации трансферрина крови до 0,83±0,24 усл. ед., а также увеличение уровня свободного железа на 153% и трансферрина на 206% по сравнению с нормой в ткани поджелудочной железы свидетельствуют о развитии панкреонекроза.

Техническим результатом заявленного изобретения является моделирование инфицированного панкреонекроза путем введения аутожелчи после травматизации в дистальной части правой доли в поперечном направлении на протяжении 3 см поджелудочной железы зажимом Бильрота 3 раза в разных местах, а также дозированного и патогенетически обоснованного инфекционного возбудителя.

Способ осуществляют следующим образом: кроликам породы "Шиншила" мужского пола выполняют лапаротомию, ревизию брюшной полости с мобилизацией поджелудочной железы. В дистальной части правой доли в поперечном направлении на протяжении 3 см выполняют травматизацию паренхимы железы зажимом Бильрота 3 раза в разных местах. После чего шприцем вводят 0,2 мл взвеси клинического штамма Acinetobacter baumannii в количестве 10 5 ОЕ/мл и 0,2 мл аутожелчи. Рану ушивают послойно наглухо. Через 3 дня животных выводят из эксперимента, после чего проводят забор крови и ткани поджелудочной железы в специальные контейнеры с последующей их заморозкой при температуре 77К.

С помощью метода электронного парамагнитного резонанса (ЭПР) в крови определяли уровень трансферрина, церулоплазмина и метгемоглобина, в ткани поджелудочной железы - величину свободного железа, трансферрина.

При увеличении показателей метгемоглобина и церулоплазмина до 0,16±0,05 усл. ед. и 3,68±1,02 усл. ед. соответственно, снижении концентрации трансферрина крови до 0,83±0,24 усл. ед., а также увеличение уровня свободного железа на 153% и трансферрина на 206% по сравнению с нормой в ткани поджелудочной железы свидетельствуют о развитии панкреонекроза (табл.1, 2).

На базе вивария КГМУ им. проф. В.Ф.Войно-Ясенецкого проводился эксперимент на 60 кроликах породы "Шиншила" мужского пола.

Все животные были разделены на две группы: 1-я - контрольная (30 животных) - здоровые кролики; 2-я группа (30 животных) - экспериментальная. Обезболивание животных проводили внутрибрюшинной и внутримышечной анестезией 1% раствором тиопентала натрия в дозе 0,25 г на 1 мл 0,9% раствор хлорида натрия, 1 мл 2% раствором рометара. В контрольной и экспериментальной группах после бритья и введения животного в наркоз производили верхнесрединную лапаротомию и торакотомию, после чего проводился забор крови и ткани поджелудочной железы в специальные контейнеры с последующей их заморозкой для дальнейшего исследования методом ЭПР. Образцы крови брали шприцем из левого желудочка сердца кролика. В экспериментальной группе для воспроизведения инфицированного панкреонекроза после анестезии животному выполняли лапаротомию. Затем в дистальной части правой доли в поперечном направлении на протяжении 3 см выполняли травматизацию поджелудочной железы зажимом Бильрота 3 раза в разных местах, после чего шприцем в паренхиму железы вводили по 0,2 мл аутожелчи и клинического штамма Acinetobacter baumannii в количестве 10 5 ОЕ/мл. Рану ушивали послойно наглухо. Все кролики содержались на стандартном рационе вивария. Вторым этапом через 3 дня животных выводили из эксперимента, сразу после забора крови и ткани поджелудочной железы в специальные контейнеры с последующей их заморозкой для дальнейшего исследования методом ЭПР.

Объектом ЭПР явились цельная кровь и ткань поджелудочной железы - у здоровых и оперированных кроликов в эксперименте. Спектры ЭПР регистрировали в условиях низкотемпературной стабилизации 77К на радиоспектрометре "Elexsys E-580" фирмы Bruker (Германия). Оценивали следующие параметры: 1) ЭПР-сигнал крови: уровень метгемоглобина, трансферрина и церулоплазмина. 2) ЭПР-сигнал ткани поджелудочной железы: уровень свободного железа и трансферрина.

Уровень метгемоглобина у 2-х групп кроликов имеет достоверные различия между собой. Так показатель парамагнитного гемоглобина в экспериментальной группе повышен в 1,5 раза по сравнению с уровнем данного показателя контрольной группы. Уровень трансферрина в экспериментальной группе значительно снижен по сравнению с величиной в контрольной группе - в 3,9 раза. Показатели церулоплазмина у экспериментальной группы превышают аналогичный показатель контрольной группы в 2,3 раза (табл.1).

Таблица 1

Сравнение параметров про- и антиоксидантного статуса крови у животных экспериментальной и контрольной групп

Показатель

Средние значения

Контрольная группа

Экспериментальная группа

Метгемоглобин, усл. ед.

0,1±0,03

0,16±0,05

Трансферрин,

3,20±0,74

0,83±0,24

усл. ед.

Церулоплазмин, усл. ед.

1,57±0,46

3,68±1,02

Примечание: условные единицы (усл. ед.) - отношение разности амплитуды показателя в спектре на разность амплитуды фона в спектре

Показатели свободного железа в ткани поджелудочной железы во всех группах имеют достоверные различия между собой. В экспериментальной группе по сравнению с контрольной группой содержание свободного железа увеличивается в 2,5 раза. Уровень трансферрина в ткани поджелудочной железы в экспериментальной группе увеличивается в 3,1 раза, по сравнению с контрольной группой (табл.2).

Таблица 2

Сравнение параметров про- и антиоксидантного статуса ткани поджелудочной железы у животных экспериментальной и контрольной групп

Показатель

Средние значения

Контрольная группа

Экспериментальная группа

Свободное железо (Fe 3+ ), отн. ед.

125196±1911

317649±3903

Трансферрин, отн. ед.

178478±1445

547212±6654

Примечание: относительные единицы (отн. ед.) - разность амплитуды показателя в спектре

Предлагаемый способ имеет следующие преимущества:

1) сокращение времени проведения эксперимента за счет того, что не требуется дополнительных оперативных вмешательств в виде селективной перевязки внепеченочных желчных протоков;

2) позволяет оценить степень антиоксидантной и проаксидантной систем, являющихся пусковыми звеньями в патогенезе инфицированного панкреонекроза;

3) позволяет исследовать цельную кровь с сохранением ее реологических свойств;

4) применяемое количество взвеси клинического штамма Acinetobacter baumannii в 10 5 КОЕ/мл является оптимальным и патогенетически обоснованным для моделирования инфицированного панкреонекроза.

Формула изобретения

Способ моделирования инфицированного панкреонекроза, включающий ревизию брюшной полости с мобилизацией поджелудочной железы, введение аутожелчи в ее паренхиму, отличающийся тем, что в дистальной части правой доли в поперечном направлении на протяжении 3 см выполняют травматизацию поджелудочной железы зажимом Бильрота 3 раза в разных местах, после чего шприцем в паренхиму железы вводят по 0,2 мл аутожелчи и клинического штамма Acinetobacter baumannii в количестве 10 5 КОЕ/мл, через 3 дня животное выводят из эксперимента и проводят забор крови, ткани поджелудочной железы с последующей их заморозкой при температуре 77К, затем с помощью метода электронного парамагнитного резонанса в крови определяют уровень трансферрина, церулоплазмина и метгемоглобина, в ткани поджелудочной железы - величину свободного железа, трансферрина: при увеличении показателей метгемоглобина и церулоплазмина до (0,16±0,05) усл. ед. и (3,68±1,02) усл. ед. соответственно, снижении концентрации трансферрина крови до (0,83±0,24) усл. ед., а также увеличение уровня свободного железа на 153% и трансферрина на 206% по сравнению с нормой в ткани поджелудочной железы свидетельствуют о развитии панкреонекроза.