Главная страница  |  Описание сайта  |  Контакты
Патент на изобретение №2469039

(19)

RU

(11)

2469039

(13)

C2

(51) МПК C07D495/04 (2006.01)

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ Статус: по данным на 07.12.2012 - нет данных Пошлина:

(21), (22) Заявка: 2010154156/04, 09.06.2009

(24) Дата начала отсчета срока действия патента:

09.06.2009

Приоритет(ы):

(30) Конвенционный приоритет:

09.06.2008 KR 10-2008-0053815

(43) Дата публикации заявки: 20.07.2012

(45) Опубликовано: 10.12.2012

(56) Список документов, цитированных в отчете о

поиске: US 20040176637 A1, 09.09.2004. US 20070225320 A1, 27.09.2007. US 6495691 B1, 17.12.2002. EA 6198 B1, 27.10.2005. BY 6467 C1, 30.09.2004. RU 2322446 C1, 20.04.2008.

(85) Дата начала рассмотрения заявки PCT на национальной фазе: 11.01.2011

(86) Заявка PCT:

KR 2009/003083 20090609

(87) Публикация заявки PCT:

WO 2009/151256 20091217

Адрес для переписки:

109012, Москва, ул. Ильинка, 5/2, ООО "Союзпатент", пат.пов. А.П.Агурееву, рег. 590

(72) Автор(ы):

ХВАН Соон Оок (KR),

КИМ Ёун Чин (KR)

(73) Патентообладатель(и):

ЭНЗИТЕХ ЛТД. (KR)

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КЛОПИДОГРЕЛЯ И ЕГО ПРОИЗВОДНЫХ

(57) Реферат:

Изобретение касается способа получения (S)-2-клопидогреля и его солей, который включает следующие стадии: (а) рацемический алкиловый эфир 2-хлорфенилглицина формулы 9 подвергают ферментативному гидролизу с помощью фермента, эффективного для гидролиза в водном растворе или водной фазе, с получением оптически активного соединения формулы 10; (b) осуществляют взаимодействие образовавшегося оптически активного соединения формулы 10 с соединением формулы 11 с получением соединения формулы 12 и (с) соединение формулы 12 подвергают циклизации с формилирующим реагентом в присутствии кислоты, где R 1 означает Н, замещенный или не замещенный C 1 -C 8 -алкил, замещенный или не замещенный C 1 -C 8 -алкенил, бензил либо С 3 -С 6 -циклоалкил; а Х означает атом галогена, выбранный из группы, состоящей из фтора (F), хлора (Cl), брома (Br) и йода (I), либо -OSO 2 R 2 (где R 2 означает замещенный или не замещенный C 1 -C 8 -алкил, замещенный или не замещенный арил, замещенный или не замещенный арилалкил, замещенный или не замещенный гетероарил либо замещенный или не замещенный гетероарилалкил). Технический результат - разработан новый способ получения (S)-2-клопидогреля, который не предполагает использование хиральных разделяющих реагентов, что позволяет снизить стоимость препаратов при сохранении высоких выходов продукта. 1 н. и 6 з.п. ф-лы, 4 пр.

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение имеет отношение к способу получения клопидогреля и его производных. В частности, настоящее изобретение имеет отношение к способу получения (S)-клопидогреля в качестве ингибитора агрегации тромбоцитов и его производных, который включает проведение ферментативного гидролиза рацемического алкилового эфира 2-хлорфенилглицина с образованием оптически активного алкилового эфира (S)-2-хлорфенилглицина в качестве промежуточного соединения и получение из него (S)-клопидогреля и его производных.

Уровень техники

Клопидогрель можно представить нижеследующей химической формулой 1, где R 1 означает метильную группу, а его химическое название - метил-(S)- -(о-хлорфенил)-6,7-дигидротиено[3,2-с]пиридин-5(4Н)-ацетат. Кроме того, клопидогрель проявляет сильную активность ингибитора агрегации тромбоцитов и антитромботическую активность, поэтому он применяется в качестве средства для лечения заболеваний сосудистой системы, в том числе таких заболеваний периферических артерий, как инсульт, тромбоз и эмболия, и таких заболеваний коронарных артерий, как инфаркт миокарда и стенокардия.

Химическая формула 1:

Клопидогрель получают в виде рацемата путем получения метил-2-(2-хлорфенил)ацетата в форме 2-хлор- или 2-бромпроизводного и проведения реакции с 4,5,6,7-тетрагидротиено[3,2-с]пиридином (см. US 4529596, US 5036156 и US 5189170). Однако в качестве лечебного средства клопидогрель эффективен только, если он находится в виде оптически активного правовращающего (S)-энантиомера. Соответственно, предпринималось много попыток получения клопидогреля в виде чистого оптического изомера, практически свободного от своего левовращающего изомера, (R)-энантиомера.

Из таких попыток в US 4847265 изложен способ получения (S)-клопидогреля, который включает получение рацемического клопидогреля, избирательное образование диастереоизомерной соли с камфорсульфоновой кислотой в качестве оптического разделяющего реагента только из (S)-клопидогреля, проведение перекристаллизации с получением соли, свободной от (R)-энантиомера, и удаление оптического разделяющего реагента с помощью слабого основания типа NaHCO 3 .

В US 5204469 изложен способ получения (S)-клопидогреля, который включает: образование диастереоизомерной соли 2-хлорфенилглицина или метилового эфира 2-хлорфенилглицина с камфорсульфоновой кислотой или винной кислотой в качестве оптического разделяющего реагента с последующей перекристаллизацией; проведение реакции полученной диастереоизомерной соли с 2-тиенилэтил-n-толуолсульфонатом с получением соединения, представленного нижеследующей химической формулой 2; и проведение циклизации соединения химической формулы 2 с формальдегидом, получая (S)-клопидогрель. В одном варианте способ включает: получение метил-2-(2-хлорфенил)ацетата в форме 2-хлор- или 2-бромпроизводного общеизвестным в этой области способом; проведение реакции полученного продукта с 2-тиенилэтил-n-толуолсульфонатом с получением соединения, представленного нижеследующей химической формулой 2, в виде рацемата; образование диастереоизомерной соли его с камфорсульфоновой кислотой или винной кислотой с последующей перекристаллизацией; удаление оптического разделяющего реагента с получением (S)-энантиомера (2); и проведение циклизации (S)-энантиомера с формальдегидом таким же образом, как описано выше, получая (S)-клопидогрель.

В US 6080875 изложен способ получения соединения, представленного нижеследующей химической формулой 2, который включает проведение оптического разделения метилового эфира 2-хлорфенилглицина с помощью 2,4-динитробензоилфенилглицина; удаление оптического разделяющего реагента водным раствором NaHCO 3 ; и проведение реакции полученного продукта с 2-тиенилглицидатом натрия, получая соединение химической формулы 2.

Химическая формула 2:

Также и в WO 98/51689 изложен способ получения (S)-клопидогреля, который включает: проведение реакции 2-хлорбензальдегида с цианидом натрия; обработку полученного продукта 2-тиенилэтиламином с получением соединения ацетонитрила, представленного нижеследующей химической формулой 3; проведение оптического разделения соединения ацетонитрила с помощью камфорсульфоновой кислоты либо превращение соединения ацетонитрила в соединение ацетамида, представленного нижеследующей химической формулой 4, с последующим оптическим разделением его с помощью винной кислоты; превращение разделенного соединения в соединение метилового эфира, представленного вышеприведенной химической формулой 2; и проведение циклизации с формальдегидом, получая (S)-клопидогрель.

Химическая формула 3:

Химическая формула 4:

В то же время в заявке на патент KR 2007-0068043 изложен способ получения (S)-клопидогреля, который включает: получение рацемического карбоксилата клопидогреля, представленного нижеследующей химической формулой 5; превращение полученного соединения в диастереоизомерную соль с помощью цинхонина; экстрагирование диастереоизомерной соли подходящим растворителем в кислых условиях для проведения оптического разделения карбоксилата (S)-клопидогреля; и обработку полученного продукта метанолом, получая (S)-клопидогрель. Кроме того, в KR 2007-0068043 изложен способ получения (S)-клопидогреля, который включает: проведение оптического разделения рацемического карбоксилата клопидогреля, представленного нижеследующей химической формулой 5, с помощью оптически активного производного амина типа дорогостоящего оптического разделяющего реагента (1R,2R)-(-)-2-амино-1-фенил-1,3-пропандиола с получением карбоксилата (S)-клопидогреля; и обработку полученного продукта метанолом, получая (S)-клопидогрель.

Химическая формула 5:

Однако все вышеприведенные способы проблематичны тем, что они основаны на оптическом разделении рацематов, соответствующих клопидогрелю или его промежуточным продуктам, с помощью дорогостоящих оптических разделяющих реагентов, и требуют сравнительно много времени, вплоть до нескольких дней, для проведения оптического разделения. Кроме того, в соответствии с такими способами диастереоизомерная соль, получаемая в самом начале оптического разделения, проявляет недостаточную оптическую чистоту, поэтому ее нужно подвергать дополнительной очистке до достижения достаточной фармацевтически приемлемой оптической чистоты, что ведет к падению выхода. Более того, камфорсульфоновая кислота, используемая для оптического разделения, не извлекается из реакционной смеси, а отбрасывается, так как она хорошо растворима в воде. К тому же цинхонин сильно токсичен, поэтому он не безвреден экологически. Далее, в вышеприведенных способах для получения требуемых (S)-энантиомеров применяются такие дорогостоящие реагенты, как 2-тиенилэтиловый спирт или 2-тиенилэтилбромид, тогда как соответствующие (R)-энантиомеры приходится отбрасывать. В конечном счете все вышеприведенные способы не предпочтительны в смысле экономической эффективности и экологических характеристик.

Равным образом в заявке на патент KR 2006-0098009 изложен способ получения (S)-клопидогреля, который включает: проведение реакции метилового эфира (S)-2-хлорфенилглицина, подвергнутого оптическому разделению с помощью винной кислоты, с 2-тиенилацетатом с получением (S)-метил-(2-тиенилацетамид)-2-(2-хлорфенил)ацетата, представленного нижеследующей химической формулой 6; восстановление функциональной амидогруппы с получением соединения, представленного химической формулой 2; и проведение циклизации с помощью формальдегида, получая (S)-клопидогрель. Однако этот способ имеет все те же проблемы, связанные с оптическим разделением. Более того, при восстановлении функциональной амидогруппы происходит и восстановление метилового эфира, что ведет к быстрому падению выхода.

Химическая формула 6:

Чтобы преодолеть вышеуказанные проблемы, в способе получения (S)-клопидогреля, изложенном в WO 99/18110, сульфопроизводное (R)-метил-2-хлорманделата подвергают реакции с 2-тиенилэтиламином с образованием промежуточного соединения вышеприведенной химической формулы 2, которое подвергают циклизации с помощью формальдегида. С другой стороны, для получения (S)-клопидогреля, представленного химической формулой 1, используют 4,5,6,7-тетрагидротиено[3,2-с]пиридин. Кроме того, в способе, изложенном в WO 03/093276, для получения (S)-клопидогреля N,N'-бис-4,5,6,7-тетрагидротиено[3,2-с]пиридилметан подвергают реакции с сульфопроизводным (R)-метил-2-бром-2-(2-хлорфенил)ацетата или (R)-2-хлорфенилацетата. Однако эти способы не подходят для массовой продукции, так как в них, в зависимости от уходящей группы, т.е. остатка сульфокислоты или галогена, и условий реакции, может образоваться рацемат, что приведет к падению оптической чистоты.

Кроме того, в US 6858734 изложен способ получения (S)-клопидогреля, который включает: проведение реакции 2-хлорбензальдегида с 2-тиенилэтиламином с получением соединения, представленного нижеследующей химической формулой 7; проведение асимметрического синтеза с помощью катализатора Штреккера с образованием (S)-энантиомерного соединения, представленного нижеследующей химической формулой 8; проведение циклизации с помощью формальдегида; и превращение соединения нитрила в метиловый эфир, получая (S)-клопидогрель. Однако вышеприведенный способ проблематичен тем, что он требует применения сильно токсичной циановой кислоты и дает оптическую чистоту лишь 85%.

Химическая формула 7:

Химическая формула 8:

В этих обстоятельствах авторы настоящего изобретения провели интенсивные исследования для преодоления вышеупомянутых проблем. Они обнаружили, что можно с легкостью получить (S)-клопидогрель в качестве ингибитора агрегации тромбоцитов и его производные, подвергая ферментативному гидролизу рацемические алкиловые эфиры 2-хлорфенилглицина в водном растворе или в водном растворе, содержащем растворитель, с образованием оптически активных алкиловых эфиров (S)-2-хлорфенилглицина и получения (S)-клопидогреля и его производных из этого оптически активного соединения в качестве промежуточного продукта. Настоящее изобретение основывается на этом открытии.

Раскрытие изобретения

Техническая проблема

Настоящее изобретение было совершено для решения проблем, встречающихся в данной области, а целью настоящего изобретения является получение способа получения (S)-клопидогреля и его производных с высокой оптической чистотой посредством простого способа с небольшими затратами.

Техническое решение

Для того чтобы осуществить вышеуказанные цели, в соответствии с одним воплощением настоящего изобретения предусмотрен способ получения (S)-клопидогреля, представленного нижеследующей химической формулой 1, либо его производных или солей, который включает: (а) проведение ферментативного гидролиза рацемического соединения алкилового эфира 2-хлорфенилглицина, представленного химической формулой 9, с получением оптически активного соединения, представленного нижеследующей химической формулой 10; (b) проведение реакции оптически активного соединения, представленного химической формулой 10, с соединением, представленным нижеследующей химической формулой 11, с получением соединения, представленного нижеследующей химической формулой 12; и (с) проведение циклизации соединения, представленного химической формулой 12, с формилирующим реагентом в присутствии кислоты.

Химическая формула 1:

Химическая формула 9:

Химическая формула 10:

Химическая формула 11:

Химическая формула 12:

В вышеприведенных химических формулах R 1 означает Н, замещенный или не замещенный C 1 -C 8 -алкил, замещенный или не замещенный С 1 -С 8 -алкенил, бензил либо С 3 -С 6 -циклоалкил; а Х означает атом галогена, выбранный из группы, состоящей из фтора (F), хлора (Cl), брома (Br) и йода (I), либо -OSO 2 R 2 (где R 2 означает замещенный или не замещенный C 1 -C 8 -алкил, замещенный или не замещенный арил, замещенный или не замещенный арилалкил, замещенный или не замещенный гетероарил либо замещенный или не замещенный гетероарилалкил).

Осуществление изобретения

Далее будут подробно описаны типичные воплощения настоящего изобретения. Настоящим изобретением предусмотрен способ получения (S)-клопидогреля, представленного нижеследующей химической формулой 1, либо его производных или солей, который включает: (а) проведение ферментативного гидролиза рацемического соединения алкилового эфира 2-хлорфенилглицина, представленного химической формулой 9, с получением оптически активного соединения, представленного нижеследующей химической формулой 10; (b) проведение реакции оптически активного соединения, представленного химической формулой 10, с соединением, представленным нижеследующей химической формулой 11, с получением соединения, представленного нижеследующей химической формулой 12; и (с) проведение циклизации соединения, представленного химической формулой 12, с формилирующим реагентом в присутствии кислоты.

Химическая формула 1:

Химическая формула 9:

Химическая формула 10:

Химическая формула 11:

Химическая формула 12:

В вышеприведенных химических формулах R 1 означает Н, замещенный или не замещенный C 1 -C 8 -алкил, замещенный или не замещенный С 1 -С 8 -алкенил, бензил либо С 3 -С 6 -циклоалкил; а Х означает атом галогена, выбранный из группы, состоящей из фтора (F), хлора (Cl), брома (Br) и йода (I), либо -OSO 2 R 2 (где R 2 означает замещенный или не замещенный C 1 -C 8 -алкил, замещенный или не замещенный арил, замещенный или не замещенный арилалкил, замещенный или не замещенный гетероарил либо замещенный или не замещенный гетероарилалкил).

В соответствии с одним воплощением настоящего изобретения клопидогрель либо его производные или соли могут быть получены способом, представленным на нижеследующей схеме реакций 1:

Схема реакций 1:

На вышеприведенной схеме реакций 1 R 1 и X имеют те же значения, что и выше.

Как видно из схемы реакций 1, рацемический алкиловый эфир 2-хлорфенилглицина, представленный химической формулой 9, подвергается гидролизу с помощью фермента, эффективного для гидролиза в водном растворе или в водной фазе, содержащей растворитель, с образованием оптически активного алкилового эфира (S)-2-хлорфенилглицина (соединения 10) в качестве промежуточного продукта; образовавшийся алкиловый эфир (S)-2-хлорфенилглицина (соединение 10) вступает в реакцию с соединением, представленным химической формулой 11, с образованием соединения, представленного химической формулой 12; а соединение химической формулы 12 подвергается циклизации с получением (S)-клопидогреля как ингибитора агрегации тромбоцитов либо его солей или производных (химическая формула 1).

В частности, (S)-клопидогрель, представленный химической формулой 1, либо его производные или соли по настоящему изобретению могут быть получены при использовании в качестве исходного материала алкиловых эфиров 2-хлорфенилглицина, представленных химической формулой 9, которые коммерчески доступны или легко получаемы с небольшими затратами. Алкиловые эфиры 2-хлорфенилглицина подвергаются стереоселективному гидролизу в водном растворе или в водной фазе, содержащей растворитель, в присутствии гидролазы или содержащего ее штамма с образованием оптически активного алкилового эфира (S)-2-хлорфенилглицина или (S)-2-хлорфенилглицина, представленных химической формулой 10.

В соответствии с одним воплощением гидролиз проводится при рН 4-10 при температуре 10-70°С. Если же гидролиз проводится при условиях рН и температуры, выходящих за вышеприведенные пределы, то может происходить дестабилизация ферментов, использующихся для гидролиза, либо могут возникать побочные реакции.

В соответствии с предпочтительным воплощением ферменты включают, без ограничения, гидролазы типа протеаз или липаз. Конкретные примеры гидролаз включают флаворзим, протеазу А, алкалазу, савиназу, протамекс, эсперазу, новозим 435 (фирмы Novozyme), эстеразы, ацилазы и их комбинации. В качестве источника ферментов можно также использовать микроорганизмы, содержащие такие гидролазы. Конкретные примеры таких штаммов микроорганизмов включают Bacillus sp., Aspergillus oryzae, Aspergillus niger, Candida Antarctica и их комбинации. Однако можно использовать любые штаммы микроорганизмов без особых ограничений, если только они содержат гидролазы.

После проведения стереоселективного гидролиза по настоящему изобретению алкиловый эфир (S)-2-хлорфенилглицина и (S)-2-хлорфенилглицин экстрагируют с высокой оптической чистотой при помощи растворителя, выбранного из группы, состоящей из этилацетата, метиленхлорида, диэтилового эфира, диизопропилового эфира, трет-бутилметилового эфира, 1,2-диметоксиэтана, 1,2-дихлорэтана, бензола, толуола, ксилола и их смесей с тем, чтобы их можно было легко отделить от алкилового эфира (R)-2-хлорфенилглицина и (R)-2-хлорфенилглицина.

Полученный алкиловый эфир (S)-2-хлорфенилглицина и (S)-2-хлорфенилглицин с высокой оптической чистотой вступают в реакцию с соединением, представленным химической формулой 11 на схеме реакций 1, таким как сульфопроизводное 2-тиенилэтила или галопроизводное 2-тиенилэтила, образуя соединение, представленное химической формулой 12. Затем соединение химической формулы 12 подвергают циклизации с помощью формилирующего реагента в присутствии кислоты по методике, известной в этой области, получая искомый продукт - производное (S)-клопидогреля, представленное химической формулой 1.

В соответствии с одним воплощением формилирующий реагент можно выбрать из группы, состоящей из формальдегида, гидрата формальдегида и полимеров формальдегида. Для получения соли применяется кислота, а конкретные примеры кислот включают такие неорганические кислоты или органические кислоты, как серная кислота, соляная кислота, бромистоводородная кислота, сульфоновая кислота, муравьиная кислота, уксусная кислота и др.

В настоящем изобретении соли (S)-клопидогреля означают стандартные соли клопидогреля, образованные с кислотами, как описано в ЕР 0281459 или WO 2004/074215, независимо от их прочности или устойчивости. Типичные примеры неорганических кислот, используемых для образования таких солей, включают соляную кислоту, бромистоводородную кислоту, йодистоводородную кислоту, азотную кислоту, серную кислоту, фосфорную кислоту, гипофосфористую кислоту и др. Кроме того, можно использовать и различные соли, образованные с органическими кислотами, как-то алифатическими моно- и дикарбоновыми кислотами, замещенными фенилом алкановыми кислотами, гидроксиалкановыми и гидроксиалкандионовыми кислотами, ароматическими кислотами, алифатическими и ароматическими сульфокислотами. Следовательно, такие фармацевтически приемлемые соли могут включать ацетат, фенилацетат, трифторацетат, акрилат, аскорбат, бензоат, хлорбензоат, динитробензоат, гидроксибензоат, метоксибензоат, метилбензоат, о-ацетоксибензоат, нафталин-2-бензоат, бромид, изобутират, фенилбутират, -гидроксибутират, хлорид, циннамат, цитрат, формиат, фумарат, гликолат, гептаноат, лактат, малеат, гидроксималеат, малонат, мезилат, нитрат, оксалат, фталат, фосфат, двухзамещенный фосфат, однозамещенный фосфат, метафосфат, пирофосфат, пропионат, фенилпропионат, салицилат, сукцинат, сульфат, бисульфат, пиросульфат, сульфит, бисульфит, сульфонат, бензолсульфонат, n-бромфенилсульфонат, хлорбензолсульфонат, этансульфонат, 2-гидроксиэтансульфонат, метансульфонат, нафталин-1-сульфонат, нафталин-2-сульфонат, n-толуолсульфонат, ксилолсульфонат, тартрат и др. Предпочтительными являются соли бисульфата.

Способ получения (S)-клопидогреля либо его производных или солей по настоящему изобретению включает простой процесс, основанный на гидролизе алкиловых эфиров 2-хлорфенилглицина, и позволяет легко выделить нужный продукт после реакции. Кроме того, способ по настоящему изобретению экономически очень эффективен, так как для получения (S)-клопидогреля и его производных с высокой оптической чистотой используются промежуточные соединения (S)-2-хлорфенилглицина или алкиловых эфиров (S)-2-хлорфенилглицина, полученные при гидролизе алкиловых эфиров 2-хлорфенилглицина и обладающие высокой оптической чистотой.

Примеры

Далее будут описаны примеры. Нижеследующие примеры предназначаются только для иллюстрации, но не для ограничения сферы действия настоящего изобретения.

Пример 1. Получение рацемического алкилового эфира 2-хлорфенилглицина

В 500 мл метанола вносили 100 г рацемического 2-хлорфенилглицина и туда же по каплям постепенно добавляли 70 мл тионилхлорида при -10°С. Затем реакционную смесь нагревали до 50°С и перемешивали в течение 4 часов. После перемешивания реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, чтобы удалить летучие вещества. Затем добавляли 1 л метиленхлорида и 100 мл воды для разбавления смеси, которую в свою очередь нейтрализировали водным раствором NaOH. Образовавшийся органический слой промывали 500 мл насыщенного водного раствора NaHCO 3 . Из промытой смеси отделяли слой метиленхлорида, сушили над MgSO 4 и концентрировали при пониженном давлении, получая 104,6 г рацемического метилового эфира 2-хлорфенилглицина 1а (выход: 97,3%).

В то же время использовали бутанол вместо метанола и проводили реакцию при тех же условиях, что описаны выше, получая 120,4 г рацемического бутилового эфира 2-хлорфенилглицина 1b (выход: 95,2%). Соединения 1а и 1b подвергали анализу методом ЯМР-спектрометрии, а результаты представлены ниже.

1а: 1 Н-ЯМР (CDCl 3 , 300 MHz) = 7.4-7.2 (m, 4H), 5.00 (s, 1H), 3.72 (s, 3H), 1.95 (s, 2H).

1b: 1 Н-ЯМР (CDCl 3 , 300 MHz) = 7.4-7.2 (m, 4H), 5.00 (s, 1H), 4.13 (t, 2H). 1.95 (s, 2H), 1.59-1.50 (m, 2H), 1.31-1.19 (m, 2H), 0.84 (t, 3H).

Пример 2. Получение оптически активного алкилового эфира (S)-2-хлорфенилглицина посредством гидролиза

В реактор, содержащий 1000 мл 0,1М калий-фосфатного буфера (рН 7,5), вносили 200 г рацемического метилового эфира 2-хлорфенилглицина 1а, взятого из примера 1, и туда же добавляли 10 мл (1% об.) фермента алкалазы 2.5L. Реакционную смесь для протекания реакции оставляли при 30°С при 250 об/мин. Для поддержания постоянного значения рН в реакционную смесь вносили 2N водный раствор NaOH. После проведения реакции в течение 24 ч в реакционную смесь добавляли 1000 мл этилацетата, чтобы экстрагировать оптически активный метиловый эфир (S)-2-хлорфенилглицина 2а с оптической чистотой не менее 99%, который в свою очередь сушили над MgSO 4 и концентрировали при пониженном давлении, получая 85,6 г метилового эфира (S)-2-хлорфенилглицина 2а с оптической чистотой 99,8% (выход: 85,6% по (S)-энантиомеру).

В то же время использовали рацемический бутиловый эфир 2-хлорфенилглицина 1b вместо рацемического метилового эфира 2-хлорфенилглицина 1а и проводили реакцию при тех же условиях, что описаны выше, получая 57,2 г бутилового эфира (S)-2-хлорфенилглицина 2b с оптической чистотой 99,2% (выход: 57,2% по (S)-энантиомеру). Оптическую чистоту каждого соединения анализировали на жидкостном хроматографе (Model 1525, Waters), снабженном хиральной колонкой Chirosil RCA(+) (150×4,6 мм, 5 мкм), в виде оптически активных краун-эфиров. Соединения подвергали анализу методом ЯМР-спектрометрии, а результаты представлены ниже.

1а: 1 Н-ЯМР (CDCl 3 , 300 MHz) = 7.4-7.2 (n-i, 4H), 5.00 (s. 1H), 3.72 (s, 3H), 1.95 (s, 2H).

1b: 1 Н-ЯМР (CDCl 3 , 300 MHz) = 7.4-7.2 (m, 4H), 5.00 (s, 1H), 4.13 (t, 2H), 1.95 (s, 2H), 1.59-1.50 (m, 2H), 1.31-1.19 (m, 2H), 0.84 (t, 3H).

Пример 3. Получение оптически активного гидрохлорида (S)-алкил- -(2-тиенилэтиламин)-(2-хлорфенил)ацетата

Сначала растворяли 100 г метилового эфира (S)-2-хлорфенилглицина 2а, взятого из примера 2, в 1000 мл ацетрнитрила, туда же добавляли 60 г бикарбоната калия и 156 г пара-толуолсульфоната и всю эту смесь кипятили в течение 20 часов. Смесь подвергали пониженному давлению, чтобы удалить из нее летучие вещества, и растворяли в этилацетате, а затем промывали органический слой дистиллированной водой. После отделения органического слоя добавляли концентрированную соляную кислоту при 0°С, чтобы вызвать образование кристаллов, которые затем сушили под вакуумом, получая 125,4 г гидрохлорида (S)-метил- -(2-тиенилэтиламин)-(2-хлорфенил)ацетата 3а (выход: 72,3%).

В то же время использовали бутиловый эфир (S)-2-хлорфенилглицина 2b вместо метилового эфира (S)-2-хлорфенилглицина 2а и проводили реакцию при тех же условиях, что описаны выше, получая 88,1 г гидрохлорида (S)-бутил- -(2-тиенилэтиламин)-(2-хлорфенил)ацетата 3b (выход: 54,8%). Соединения подвергали анализу методом ЯМР-спектрометрии, а результаты представлены ниже.

3а: 1 Н-ЯМР (CDCl 3 , 300 MHz) = 7.40-1.32 (m, 2H), 7.27-7.21 (m, 2H), 7.12 (d, 1H), 6.92 (dd, 1H), 6.82 (d, 1H), 4.93 (s, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.03 (t, 2H), 2.96-2.88 (m, 1H), 2.82-2.74 (m, 1H), 2.18(s, 1H).

3b: 1 Н-ЯМР (CDCl 3 , 300 MHz) = 7.37-7.33 (m, 2H), 7.27-7.21 (m, 2H), 7.12 (d, 1H), 6.91 (dd, 1H), 6.82 (d, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.09 (t, 2H), 3.03 (t, 2H), 2.96-2.88 (m. 1H), 2.83-2.74 (m, 1H), 2.35 (s, 1H), 1.57-1.48 (m, 2H), 1.29-1.19 (m, 2H), 0.83 (t, 3H).

Пример 4. Получение оптически активного бисульфата алкильного производного (S)-клопидогреля

К 200 г (S)-метил- -(2-тиенилэтиламин)-(2-хлорфенил)ацетата 3а, взятого из примера 3, добавляли 600 мл 35% водного раствора формальдегида и кипятили смесь в течение 4 часов. Далее реакционную смесь разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным водным раствором NaHCO 3 , а затем из нее отделяли органический слой. Органический слой концентрировали при пониженном давлении, чтобы удалить растворитель, и растворяли в ацетоне. Затем туда же добавляли концентрированную серную кислоту при 0°С, чтобы вызвать образование кристаллов. Выпавшие кристаллы отфильтровывали, а затем сушили под вакуумом, получая при этом 179,7 г (выход; 83,9%) бисульфата (S)-клопидогреля 4а с оптической чистотой 99,5%.

В то же время использовали гидрохлорид (S)-бутил- -(2-тиенилэтиламин)-(2-хлорфенил)ацетата 3b вместо гидрохлорида (S)-метил- -(2-тиенилэтиламин)-(2-хлорфенил)ацетата 3а и проводили реакцию при тех же условиях, что описаны выше, получая при этом 143,4 г (выход: 67,4%) производного бутилового эфира (S)-клопидогреля 4b с оптической чистотой 99,0%. Оптическую чистоту каждого соединения анализировали на жидкостном хроматографе (Model 1525, Waters), снабженном колонкой Ultron ES-OVM (150×4,6 мм, 5 мкм, овомукоид). Соединения подвергали анализу методом ЯМР-спектрометрии, а результаты представлены ниже.

4а: 1 Н-ЯМР (CDCl 3 , 300 MHz) = 7.72 (dd, 1H), 7.41 (dd, 1H), 7.33-7.23 (m, 2H), 7.06 (d, 1H), 6.67 (d, 1H), 4.94 (s. 1H), 3.73 (s, 3H), 3.80-3.62 (dd, 2H), 2.89 (s, 4H).

4b: 1 Н-ЯМР (CDCl 3 , 300 MHz) = 7.72 (dd, 1H), 7.40 (dd, 1H), 7.29-7.24 (m, 2H), 7.06 (d. 1H), 6.67 (d, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.13 (t, 2H), 3.78-3.60 (dd, 2H), 2.89 (s, 4H), 1.60-1.50 (m, 2H), 1.32-1.19 (m, 2H), 0.86 (t, 3H).

Промышленная применимость

Как описано выше, способ получения (S)-клопидогреля и его производных по настоящему изобретению включает простые стадии обработки, в нем используется лишь небольшое количество фермента и не нужен оптический разделяющий реагент, поэтому он проявляет высокую экономическую эффективность. Кроме того, в способе по настоящему изобретению в качестве промежуточных продуктов используются алкиловые эфиры (S)-2-хлорфенилглицина с высокой оптической чистотой, поэтому он подходит для массового производства клопидогреля и его производных с высокой оптической чистотой. К тому же в этом способе не используются токсические вещества, поэтому он проявляет хорошие экологические характеристики.

Специалистам в этой области должно быть ясно, что концепции и конкретные воплощения, изложенные в предшествующем описании, могут использоваться в качестве основы для модификации или разработки других воплощений для выполнения тех же целей настоящего изобретения. Специалистам в этой области также должно быть ясно, что такие эквивалентные воплощения не отходят от сути и не выходят за рамки настоящего изобретения, как оно изложено в прилагаемой формуле изобретения.

Формула изобретения

1. Способ получения (S)-клопидогреля формулы 1

или его солей, который включает следующие стадии:

(а) рацемический алкиловый эфир 2-хлорфенилглицина формулы 9

подвергают ферментативному гидролизу с помощью фермента, эффективного для гидролиза в водном растворе или водной фазе, с получением оптически активного соединения формулы 10

(b) осуществляют взаимодействие образовавшегося оптически активного соединения формулы 10 с соединением формулы 11

с получением соединения формулы 12

(с) соединение формулы 12 подвергают циклизации с формилирующим реагентом в присутствии кислоты,

где R 1 означает Н, замещенный или незамещенный C 1 -C 8 -алкил, замещенный или незамещенный C 1 -C 8 -алкенил, бензил либо С 3 -С 6 -циклоалкил; а Х означает атом галогена, выбранный из группы, состоящей из фтора (F), хлора (Cl), брома (Br) и йода (I), либо -OSO 2 R 2 (где R 2 означает замещенный или незамещенный C 1 -C 8 -алкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный арилалкил, замещенный или незамещенный гетероарил либо замещенный или незамещенный гетероарилалкил).

2. Способ по п.1, в котором фермент является гидролазой.

3. Способ по п.1, в котором формилирующий реагент выбирают из группы, состоящей из формальдегида, гидрата формальдегида и полимеров формальдегида.

4. Способ по п.1, в котором кислоту на стадии (с) выбирают из группы, состоящей из органических кислот, неорганических кислот и их смесей.

5. Способ по п.1, в котором гидролиз проводят при рН 4-10 при температуре 10-70°С.

6. Способ по п.1, в котором стадия (а) дополнительно включает отделение (R)-2-хлорфенилглицина и алкилового эфира (R)-2-хлорфенилглицина, образовавшихся при гидролизе, с помощью растворителя.

7. Способ по п.6, в котором растворитель выбирают из группы, состоящей из этилацетата, метиленхлорида, диэтилового эфира, диизопропилового эфира, трет-бутилметилового эфира, 1,2-диметоксиэтана, 1,2-дихлорэтана, бензола, толуола, ксилола и их смесей.