Главная страница  |  Описание сайта  |  Контакты
Патент на изобретение №2470649

(19)

RU

(11)

2470649

(13)

C1

(51) МПК A61K35/28 (2006.01)

A61P25/00 (2006.01)

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ Статус: по данным на 27.12.2012 - действует Пошлина: учтена за 3 год с 26.05.2013 по 25.05.2014

(21), (22) Заявка: 2011121013/15, 25.05.2011

(24) Дата начала отсчета срока действия патента:

25.05.2011

Приоритет(ы):

(22) Дата подачи заявки: 25.05.2011

(45) Опубликовано: 27.12.2012

(56) Список документов, цитированных в отчете о

поиске: КОРОЧКИН Л.И. Ксенотрансплантация эмбриональной нервной ткани нейромутанта Drosophila стимулирует развитие трансплантата в мозгу крысы в нейральном направлении и блокирует образование глиального рубца // Цитология, 2002, 44 (12), с.1181-1185. RU 2314817 C2, 20.01.2008. WO 2008014979 A2, 07.02.2008. ХМАРА М.Е. Герпетическая инфекция ЦНС:клинико-морфологические и патогенетические аспекты // Медицинские новости, 2004, 5, с.15-20. ZERR D. et al. Human Herpesvirus 6 reactivation and encephalitis in allogeneic bone marrow transplant recipients // Clin Infec Dis., 2001, 33(15), pp.763-771.

Адрес для переписки:

119334, Москва, ул. Вавилова, 34/5, ФГБУН Институт биологии гена РАН (ИБГ РАН), Л.В. Вербовой

(72) Автор(ы):

Зарайский Евгений Ильич (RU),

Павлова Галина Валериевна (RU),

Огудина Галина Николаевна (RU),

Пантелеев Дмитрий Юрьевич (RU),

Мулик Евгений Леонидович (RU),

Ревищин Александр Владимирович (RU),

Рыбалкина Екатерина Юрьевна (RU),

Исаев Фёдор Викторович (RU)

(73) Патентообладатель(и):

Российская Федерация, от имени которой выступает Министерство образования и науки Российской Федерации (RU),

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии гена Российской академии наук (ИБГ РАН) (RU)

(54) СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ПОСЛЕДСТВИЙ ГЕРПЕТИЧЕСКОГО МЕНИНГОЭНЦЕФАЛИТА С ПОМОЩЬЮ АУТОЛОГИЧНЫХ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК

(57) Реферат:

Изобретение относится к области медицины, а именно неврологии, и может быть использовано для лечения осложнений, вызванных герпетическим менингоэнцефалитом. Для достижения лечебного эффекта эндолюмбально вводят 1000000 аутологичных мезенхимальных стволовых клеток, а затем внутримышечно гидролизат рибонуклеиновой кислоты в количестве 100 мг на инъекцию ежедневно курсами по 30 дней. Использование данного метода лечения позволяет ускорить и повысить эффективность восстановления мозговых функций пациента. 1 пр.

Изобретение относится к области медицины, клеточной биологии, в частности к применению аутологичных мезенхимальных стволовых клеток (АМСК) для восстановления поражений нервной системы, вызванных герпетическим менингоэнцефалитом. Для восстановления мозговых функций использовали эндолюмбальное введение 1000000 АМСК, продифференцированных ретиноевой кислотой и внутримышечное введение гидролизата рибонуклеиновой кислоты, содержащего смесь моно- и олигонуклеотидов (ди-, три-, тетра-, пента-, гекса) в дозе 100 мг на введение ежедневно курсами по 30 инъекций. Изобретение позволяет повысить эффективность реабилитационной терапии при восстановлении поражений нервной системы, вызванных герпетическим менингоэнцефалитом.

Описание изобретения

На сегодняшний день задача эффективного восстановления пациентов с тяжелой неврологической патологией головного мозга, в том числе и последствиями герпетического менингоэнцефалита, является актуальной. Применяемые методы зачастую оказываются малоэффективными. Регенерация пораженной нервной ткани идет крайне медленно, а зачастую практически незаметна после окончания процесса рубцевания. Некоторые перспективы для решения этой сложной задачи наметились с появлением клеточной терапии.

Клеточная терапия позволяет активировать регенерацию многих пораженных органов и тканей. Функцию обновления и восстановления тканей in vivo выполняют стволовые клетки - недифференцированные предшественники клеток различных типов.

Известны различные типы стволовых клеток взрослого организма - геоматопоэтические, нейрональные, мезенхимальные и т.д. Наибольшие перспективы связаны с мезенхимальными стволовыми клетками, способными дифференцироваться не только в ткани мезенхимального происхождения, но также и в ткани других зародышевых листков (Fridenshtein A.J., Deriglazova U.F., Kulagina N.N. et al. Precursors for fibroblasts in different populations of hematopoietic cells as detected by the in vitro colony assay method. Exp. Hematol. 1974. Vol.2. P.83-92).

На сегодня известны многочисленные попытки регенерации нервной ткани при тяжелой неврологической патологии с помощью стволовых клеток. Стволовые клетки по методу получения можно подразделить на эмбриональные стволовые клетки, фетальные стволовые клетки и аутологичные стволовые клетки.

Эмбриональные стволовые клетки получают путем культивирования in vitro клеток эмбрионов, полученных на ранних стадиях эмбриогенеза. Эти клетки плюрипотентны, способны дифференцироваться в клетки практически любых тканей и органов, обладают огромным потенциалом роста. Однако введение таких клеток в мозг млекопитающих приводит, зачастую, к образованию опухолей. Поэтому их применение для целей терапии весьма проблематично.

Фетальные стволовые клетки, получаемые из плодов первого-второго триместра беременности, довольно широко используются с целью регенерации различных поражений, в том числе и органов нервной системы. Недостатками данной технологии являются: опасность заражения реципиента вирусами (в первую очередь, ВИЧ и гепатитов) и прионами; морально-этические соображения и несоответствие антигенной структуры донорского материала, приводящее к его отторжению реципиентом. Несмотря на низкую антигенность эмбрионального клеточного материала после замещения им пораженных участков тканей реципиента и дифференцировки, на поверхности таких клеток появляются полноценные антигены главного комплекса гистосовместимости, что приводит к их отторжению.

Наиболее перспективными для регенерации нервной системы являются аутологичные стволовые клетки. Они полипотентны, обладают способностью к размножению, и методы их получения, а также безопасность введения давно известны на примере пересадок костного мозга и гемопоэтических стволовых клеток в гематологической клинике.

Известны способы выделения (Fridenshtein A.J., Deriglazova U.F., Kulagina N.N. et al. Precursors for fibroblasts in different populations of hematopoietic cells as detected by the in vitro colony assay method. Exp. Hematol. 1974. Vol.2. P.83-92; патент RU 225252).

Однако попытки лечения грубой мозговой патологии при помощи АМСК на сегодня не увенчались значительными успехами. Возможно, это связано с отсутствием сигналов, необходимых для регенерации ткани после окончания процесса рубцевания.

Известен эффект регенерации нервной ткани при тапеторетинальных дистрофиях под действием низкомолекулярной фракции гидролизата рибонуклеиновой кислоты (Фукс Б.Б. и др., «О специфическом лечебном эффекте рибонуклеотидов при тапеторетинальных дистрофиях», Вестник АМН, СССР, 1971, 7, стр.63-68). Однако этот препарат не применялся при лечении последствий герпетического менингоэнцефалита и других грубых патологий головного мозга.

Нами предложен способ восстановления мозговых функций у пациентов, перенесших герпетический менингоэнцефалит путем эндолюмбального введения 1000000 АМСК, продифференцированных ретиноевой кислотой и внутримышечное введение гидролизата рибонуклеиновой кислоты, содержащего смесь моно- и олигонуклеотидов (ди-, три-, тетра-, пента-, гекса) в дозе 100 мг на введение ежедневно курсами по 30 инъекций.

Техническим результатом изобретения является ускорение и повышенная эффективность восстановления мозговых функций пациентов, вызванные усилением регенеративных процессов в головном мозге.

Пример

Пациентка А.А., диагноз: последствия герпетического менингоэнцефалита - субтотальная энцефалопатия с синдромом двигательной гиперактивности и грубым нарушением высших корковых функций. Проводимое лечение (дельторан, кортексин, глятелин, фенибут, пантогам) видимого улучшения состояния не дало. Было проведено лечение по следующей схеме.

1. Получили пунктат костного мозга пациентки из гребня подвздошной кости в объеме 1 мл;

2. Пунктат в стерильных условиях был помещен на лед и доставлен в культуральную лабораторию;

3. Пунктат десятикратно промывали раствором, содержащим среду RPMI 1640, глютамин, гентамицин, 10% фетальной бычьей сыворотки;

4. Отмытую строму костного мозга измельчили до фрагментов размером 1 и менее миллиметра и поместили в плоскодонный культуральный флакон, содержащий среду RPMI 1640 (40%), среду ДМЕМ (40%), фетальную бычью сыворотку (20%), глютамин, гентамицин, суплемент ("Sigma" США) и инкубировали при 37°C в атмосфере 6% CO 2 ;

5. Смену среды проводили 1 раз в 2 дня. Через 2 недели клетки образовавшегося монослоя пересеяли, а еще через 2 недели клетки сняли с монослоя, обработали в течение 2 часов ретиноевой кислотой в бессывороточной среде и ввели эднолюмбально пациентке в количестве 1000000 (1 млн) в объеме 1 мл. За день до введения пациентке внутримышечно ввели 4 мг доксометазона;

6. Через 3 дня пациентке начали вводить гидролизат рибонуклеиновой кислоты внутримышечно в количестве 100 мг на инъекцию 1 раз в день. Курс введения продолжали в течение 30 дней. Затем курс введения гидролизата рибонуклеиновой кислоты повторяли четырежды с месячным перерывом.

В результате терапии отмечены следующие положительные эффекты: улучшилось ее восприятие смысла слов, она начала понимать обращенные к ней просьбы. Начала самостоятельно делать гимнастику. Освоила ранее недоступные для нее движения - вставление ключа в замочную скважину, открывание-закрывание двери. Начала играть в настольные игры с партнерами (домино, карты), что свидетельствует о восстановлении способности устного счета. Практически полностью восстановила навыки самообслуживания. Частично восстановила письменную речь.

Таким образом, предложенная терапия позволила при отсутствии эффекта традиционной терапии восстановить многие сложные функции головного мозга после его грубого поражения.

Формула изобретения

Способ лечения последствий герпетического менингоэнцефалита с помощью аутологичных мезенхимальных стволовых клеток, отличающийся тем, что для достижения лечебного эффекта эндолюмбально вводят 1000000 аутологичных мезенхимальных стволовых клеток, а затем внутримышечно гидролизат рибонуклеиновой кислоты в количестве 100 мг на инъекцию ежедневно курсами по 30 дней.