Главная страница  |  Описание сайта  |  Контакты
N-ОКСИКАРБОНИЛЗАМЕЩЕННЫЕ 5'-ДЕОКСИ-5-ФТОРЦИТИДИНЫ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ ПРЕПАРАТ
N-ОКСИКАРБОНИЛЗАМЕЩЕННЫЕ 5'-ДЕОКСИ-5-ФТОРЦИТИДИНЫ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ ПРЕПАРАТ

N-ОКСИКАРБОНИЛЗАМЕЩЕННЫЕ 5'-ДЕОКСИ-5-ФТОРЦИТИДИНЫ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ ПРЕПАРАТ

Патент Российской Федерации
Суть изобретения: Описываются новые N-оксикарбонил замещенные 5'-деокси -5-фторцитидин общей формулы I, в которой R1 представляет насыщенный или ненасыщенный нормальный или разветвленный углеводородный радикал, в котором число атомов углерода в самой длинной прямой цепи составляет три - семь или радикал формулы -(CH2)n-Y, где n = 0-4, если Y представляет циклогексил, или n = 2-4, если У представляет низшую алкокси С14 группу или фенил, и R2 представляет атом водорода или ацил, легко гидролизуемый в физиологических условиях. Соединения обладают прекрасными фармакокинетическими свойствами при лечении опухолей с высоким уровнем безопасности. Описывается противоопухолевой препарат на основе соединений формулы I. 2 с. и 4 з. п. ф-лы, 7 табл.
Поиск по сайту

1. С помощью поисковых систем

   С помощью Google:    

2. Экспресс-поиск по номеру патента


введите номер патента (7 цифр)

3. По номеру патента и году публикации

2000000 ... 2099999   (1994-1997 гг.)

2100000 ... 2199999   (1997-2003 гг.)
Номер патента: 2135511
Класс(ы) патента: C07H19/06, A61K31/70
Номер заявки: 93056196/04
Дата подачи заявки: 16.12.1993
Дата публикации: 27.08.1999
Заявитель(и): Ф.Хоффманн-Ля Рош АГ (CH)
Автор(ы): Мотохиро Арасаки (JP); Хидео Ишитсука (JP); Исами Курума (JP); Масанори Мива (JP); Чикако Мурасаки (JP); Нобуо Шимма (JP); Исао Умеда (JP)
Патентообладатель(и): Ф.Хоффманн-Ля Рош АГ (CH)
Описание изобретения: Настоящее изобретение относится к производным N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-дезокси-5-фторцитидина и к содержащим их фармацевтическим препаратам для лечения опухолей.
Более конкретно, настоящее изобретение относится к производным N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-дезокси-5-фторцитидина общей формулы (I):

в которой R1 представляет насыщенный или ненасыщенный, нормальный или разветвленный углеводородный радикал (в котором число атомов углерода в самой длиной нормальной цепи находится в интервале три-семь) или радикал формулы -(CH2)n-Y (где n = 0-4, если Y представляет циклогексил, или n = 2-4, если R2 представляет низшую алкоксигруппу с 1-4 атомами углерода или фенил) и Y представляет атом водорода или легко гидролизуемый в физиологических условиях радикал,
а также гидратам или сольватам соединений общей формулы (I) и к содержащему их фармацевтическому препарату, характеризующемуся прекрасными фармакокинетическими свойствами при лечении опухолей с высоким уровнем безопасности.
Известно, что многие предшественники 5-фторурацила (5-ФУ) применимы в качестве противоопухолевых средств, но в целом эффективность их биоконверсии все еще остается недостаточной при лечении страдающих опухолями больных, и являются причиной желудочной токсичности и иммуносупрессорной токсичности, и такая токсичность в основном и ограничивает их дозировки.
В патенте США 4966891 раскрыты предшественники 5-ФУ, улучшенные с точки зрения вышеупомянутых эффективности биоконверсии и токсичности. Под действием ациламидаз эти предшественники превращаются в 5'-дезокси-5-фторцитидин (5'-ДФЦТ), а под действием цитидиндезаминазы - в 5'дезокси-5-фторуридин (5'-ДФУР) и затем под действием пиримидиннуклеотидной фосфорилазы - в 5-ФУ (in vivo), который преимущественно локализуется в печени, тонкой кишке и тканях опухоли. В ходе интенсивных исследований фармакокинетических показателей предшественников 5-ФУ, в частности производных N4 -(замещенный оксикарбонил)-5'-дезокси-5-фторцитидина, создатели настоящего изобретения обнаружили, что определенные специфичные предшественники под действием изофермента ациламидазы, преимущественно обнаруживаемого в печени, но не в других органах человека, селективно превращаются в 5'-ДФЦТ и характеризуются лучшими фармакокинетическими показателями, чем другие испытанные соединения. Дальнейшие исследования, основанные на указанном открытии, позволили создателям настоящего изобретения выяснить, что особые производные N4-(замещенные оксикарбонил)-5'-дезокси-5-фторцитидина (далее N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ) вышеприведенной общей формулы (1) отличаются улучшенными фармакокинетическими показателями селективности на обезьянах, а именно в 4-7 раз более высокой максимальной концентрацией (Cмаск) 5'-ДФУР и в 4 раза большей площадью под кривой (ППК) в крови по сравнению с другими соединениями и меньшей кишечной токсичностью, в результате чего и возникло настоящее изобретение.
Соответствующие радикалы в общей формуле (1), определенной выше, более подробно разъясняются ниже.
Расшифровка R1
R1 представляет насыщенный или ненасыщенный, нормальный или разветвленный углеводородный радикал (в котором число атомов углерода в самой длиной прямой цепи находится в интервале три-семь) или радикал формулы -(CH2)n-Y (где n = 0-4, если Y представляет циклогексил, или n = 2-4, если Y представляет низшую алкоксигруппу с 1-4 атомами углерода или фенил).
Вышеприведенное определение: "насыщенный или ненасыщенный, нормальный или разветвленный углеводородный радикал (в котором число атомов углерода в самой длиной нормальной цепи находится в интервале три-семь)" предпочтительно относится к н-пропилу, 1-изопропил-2-метилпропилу, 1,1,2-триметилпропилу, н-бутилу, изобутилу, 2-этилбутилу, 3,3-диметилбутилу, н-пентилу, изопентилу, неопентилу, 2-пропилпентилу, н-гексилу, 2-этилгексилу, н-гептилу, аллилу, 2-бутен-1-илу, 3-бутен-1-илу, 3-пентен-1-илу, 4-пентен-1-илу, 3-гексен-1-илу, 4-гексен-1-илу и т.п.
Выражение: "радикал формулы -(CH2)n-Y /где n = 2-4, если Y представляет низшую алкоксигруппу с 1-4 атомами или фенил, или n = 0-4, если Y представляет циклогексил/" предпочтительно означает циклогексил, циклогексилметил, 2-циклогексилэтил, 3-циклогексилпропил, 4-циклогексилбутил, 2-метоксиэтил, 2-этоксиэтил, 2-пропоксиэтил, 3-метоксипропил, 3-этоксипропил, 4-метоксибутил, 4-этоксибутил, фенэтил, 3-фенилпропил, 4-фенилбутил и т.п.
В наиболее рекомендуемом варианте соединений настоящего изобретения R1 представляет н-пропил, н-бутил, н-пентил, изопентил, неопентил, 3,3-диметилбутил, н-гексил, 2-этил-бутил, фенэтил и циклогексилметил.
Расшифровка R2
R2 представляет атом водорода или радикал, легко гидролизуемый в физиологических условиях.
Приведенное выше выражение "радикал, легко гидролизуемый в физиологических условиях" предпочтительно означает ацетил, пропионил, бензоил, толуоил, β -аланил, валил и т.п.
Рекомендуемые N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ настоящего изобретения включают:
5'-дезокси-5-фтор-N4-(пропоксикарбонил)цитидин,
N4(бутoкcикapбoнил)-5'-дезoкcи-5-фтopцитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-(пентилоксикарбонил)цитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-(гексилоксикарбонил)цитидин,
5'-дезoкcи-5-фтop-N4-(изoпентилoкcикapбoнил)цитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-(неопентилоксикарбонил)цитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-[(1,1,2-триметилпропокси)карбонил]- цитидин,
5'-дезокси-N4-[(3,3-диметилбутокси)карбонил]-5-фторцитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-[(1-изопропил-2-метилпропокси) карбонил]цитидин,
5'-дезокси-N4-[(2-этилбутокси)карбонил]-5-фторцитидин,
N4-[(циклoгекcилметoкcи)кapбoнил]-5'-дезoкcи-5- фтopцитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-[(2-фенилэтокси)карбонил/цитидин,
2',3'-ди-О-ацетил-5'-дезокси-5-фтор-N4-(пропоксикарбонил) цитидин,
2',3'-ди-O-aцетил-N4-(бутoкcикapбoнил)-5'-дезoкcи-5- фтopцитидин,
2',3'-ди-О-бензоил-N4-(бутоксикарбонил)-5'-дезокси- 5-фторцитидин,
2',3'-ди-О-ацетил-5'-дезокси-5-фтор-N4-(пентилоксикарбонил) цитидин,
2',3'-ди-О-ацетил-5'-дезокси-5-фтор-N4 (изопентилоксикарбонил)цитидин,
2',3'-ди-О-ацетил-5'-дезокси-5-фтор-N4- (гексилоксикарбонил)цитидин,
2',3'-ди-О-ацетил-5'дезокси-N4-[(2-этилбутил)оксикарбонил]- 5-фторцитидин,
2',3'-ди-О-ацетил-N4-[(циклoгекcилметoкcи)кapбoнил]-5'- дезокси-5-фторцитидин,
2',3'-ди-О-ацетил-5'-дезокси-5-фтор-N4-[(2-фенилэтокси)- карбонил]цитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-(изобутоксикарбонил)цитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-[(2-пропилпентил)оксикарбонил]цитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-[(2-этилгексил)оксикарбонил]цитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-(гептилоксикарбонил)цитидин),
N4-[(2-циклогексилэтокси)карбонил]-5'-дезокси-5- фторцитидин,
N4-[(3-циклогексилпропил)оксикарбонил]-5'-дезокси- 5-фторцитидин,
N4-(циклогексилоксикарбонил)-5'-дезокси-5-фторцитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-[(3-фенилпропил)оксикарбонил/цитидин,
5'-дезoкcи-5-фтoр-N4-[(2-метоксиэтокси)карбонил/цитидин,
а также их гидраты или сольваты и т.п.
Из вышеперечисленных соединений особенно рекомендуются следующие N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ:настоящего изобретения:
5'-дезокси-5-фтор-N4-(пропоксикарбонил)цитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-(изопентилоксикарбонил)цитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-(гексилоксикарбонил)цитидин,
5'-дезокси-N4-[(2-этилбутил)оксикарбонил]-5-фторцитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-(неопентилоксикарбонил)цитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-[(3,3-диметилбутокси)карбонил]цитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-[(2-фенилэтокси)карбонил/цитидин,
N4-[(циклoгекcилметoкcи)кapбoнил]-5'-дезoкcи-5-фтopцитидин, особенно
N4-(бутоксикарбонил)-5'-дезокси-5-фторцитидин,
5'-дезoкcи-5-фтop-N4-(пентилоксикарбонил)цитидин,
а также их гидраты или сольваты и т.п.
N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ общей формулы (I), а также их гидраты или сольфаты могут быть получены реакцией соединения общей формулы (II):

в которой R4 представляет радикал для защиты гидроксигруппы, такой как: ацетил, бензоил, триметилсилил, трет-бутилдиметилсилил и т.п.,
с соединением общей формулы (III):
R1OCOCl
в которой R1 принимает вышеуказанные значения, с последующим, если необходимо, удалением защитного радикала.
Соединения вышеприведенной общей формулы (II) могут быть получены 2', 3'-ди-O-ацилированием или -силилированием 5'-дезокси-5-фторцитидина (J. Med. Chem, 22. 1330 (1979)) по методике, приведенной в патенте США 4966891, или прямым соединением 5-фторцитозина с 1,2,3-три-O-ацетил-5-дезоксифуранозой по методике, аналогичной методике, приведенной в литературе (Synthesis, 748 (1981)).
Реакция соединения вышеприведенной общей формулы (II) с соединением вышеприведенной общей формулы (III) может быть проведена в растворителе, таком как: пиридин, диоксан, тетрагидрофуран, ацетонитрил, хлороформ, дихлорметан и т.п., в присутствии акцептора кислоты, такого как: триэтиламин, пиридин, пиколин, 4-(N,N-диметиламино)пиридин, лутидин и т.п. Реакция может быть проведена в температурном интервале 0-30oC.
Защитный радикал может быть, если необходимо, удален по окончании реакции по известным специалисту методикам (Защитные группы в органическом синтезе, Джон Вили и сыновья, Нью-Йорк, Can. J. Chem., 49, 493 (1971) и патент США 4966891), напр., щелочным или кислотным гидролизом.
Соединения вышеприведенной формулы (I) могут существовать как в несольватированном, так и в сольватированном виде, в том числе в гидратированной форме. Гидратация может быть осуществлена в ходе процесса приготовления или же может произойти постепенно вследствие гигроскопичных свойств первоначально безводного продукта. Сольваты с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как этанол могут быть получены, например, в ходе кристаллизации.
Производные N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ общей формулы (I), также как сольваты или гидраты соединений общей формулы (I), полученные способом изобретения, проявляют активность по отношению к ксенотрансплантантам рака ободочной кишки человека CXF280 и рака желудка GXF97, карциномы 26 ободочной кишки мышей, легочной карциномы Льюиса мышей и т.п. на мышах в очень широком интервале дозировок, как перорально, так и парентерально, вследствие чего применимы в качестве противоопухолевых средств. Под действием изофермента ациламидазы эти соединения успешно превращаются в 5'-ДФЦТ, под действием цитидиндезаминазы - в 5'-ДФУР и затем под действием пиридиннуклеозидной фосфорилазы превращаются в активный метаболит 5-ФУ.
Настоящее изобретение, кроме того, относится к фармацевтическим препаратам, в частности препаратам для лечения опухолей, содержащим соединения вышеприведенной общей формулы (I).
N4-(Замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ настоящего изобретения могут быть введены пероральным путем или непероральным путем человеку различными обычными методами введения. Кроме того, N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ настоящего изобретения используют в чистом виде или вводят в состав с совместимыми фармацевтическими носителями. Такой носитель может представлять собой органический или неорганический инертный материал, пригодный для энтерального, чрескожного или парентерального введения, такой как: вода, желатин, гумиарабик, лактоза, крахмал, стеарат магния, тальк, растительные масла, полиалкиленгликоли или петролатум. Фармацевтический препарат может быть приготовлен в твердом виде (напр.: в таблетках, драже, таблетках с желудочным покрытием, гранул, свеч, капсул или желудочных капсул), в полужидком виде (напр., в виде мазей) или в жидкой форме (напр., в виде растворов, суспензий или эмульсий). Фармацевтический препарат может быть стерилизован и/или может содержать дополнительные вспомогательные добавки, такие как: стабилизаторы, консерванты, осадители, эмульгаторы, улучшающие вкус добавки, соли для изменения осмотического давления или действующие в качестве буфера вещества. Фармацевтический препарат может быть получен обычным путем.
N4-(Замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ настоящего изобретения могут быть использованы по отдельности или в виде смеси двух или более различных N4(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ, при этом количество N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ составляет 0,1-99,5%, предпочтительно 0,5-95% в пересчете на массу фармацевтического препарата.
Фармацевтический препарат настоящего изобретения может быть приготовлен в сочетании с другими обычными противоопухолевыми средствами.
Подверженность действию ациламидазы N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ настоящего изобретения и их фармакокинетические показатели приведены ниже.
1. Подверженность действию ациламидаз обезьяны и человека
N4-(Замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ настоящего изобретения инкубируют 60 мин при 37oC с сырыми экстрактами печени обезьяны и человека в присутствии в качестве ингибитора цитидиндезаминазы тетрагидроуридина (0,4 Мм). Затем в качестве продукта с помощью ВЭЖХ выделяют 5'-ДФЦТ и подверженность к действию фермента подсчитывают по количеству продукта. Как видно из Таблицы 1, соединения настоящего изобретения в высшей степени подвержены действию ациламидазы печени человека, что предполагает их эффективное биопревращение в 5'-ДФЦТ в человеке (см. в конце описания).
2. Фармакокинетические показатели на обезьянах
Соединения настоящего изобретения вводят перорально группе из 2-5 циномолгичных обезьян (3-4 кг). Через различное время после введения отбирают плазму на определение в крови концентрации непревращенных молекул и их активного метаболита (5'-ДФУР).
С помощью ВЭЖХ из плазмы выделяют метаболиты и подсчитывают их концентрацию. Как видно из Таблицы 2, соединения настоящего изобретения характеризуются высоким уровнем Cмакс и ППК активного метаболита 5'-ДФУР в плазме. Полученные результаты показывают, что соединения настоящего изобретения могут быть эффективно использованы для лечения различных опухолей человека (см. в конце описания).
Противоопухолевая активность соединений изобретения показана ниже.
3. Противоопухолевые испытания на ксенотрансплантанте CXF280 рака ободочной кишки человека
Опухоль CXF280 (размером 2х2 мм) имплантируют подкожно мышам линии BALB/c nu/nu (21-22 г) в день 0. Когда размер опухоли достигает 100 мм3 (примерно на 14-ый день), мышам ежедневно в течение 3 недель перорально вводят соединения настоящего изобретения. В один из дней после последнего введения подсчитывают объем опухоли.
Приведенный в Таблице 3 ( см. в конце описания) процент ингибирования роста опухоли подсчитывают по формуле:
% ингибирования = {1 - (Т - V0)/(C - V0)} · 100 где V0 - объем опухоли перед началом лечения, Т - объем опухолей в подвергаемой лечению группе, C - объем опухоли из контрольной группы.
Как видно из Таблицы 3, соединения настоящего изобретения характеризуются безопасным введением, не вызывают при этом кишечной токсичности и гораздо более эффективны, чем 5-ФУ.
4. Противоопухолевая активность и активность против общего истощения по отношению к карциноме 26 ободочной кишки мышей
Противоопухолевую активность представительного соединения (пример 13) настоящего изобретения определяют следующим образом. Мышам (CDF1) подкожно инокулируют карциному 26 ободочной кишки (106 клеток) в день 0. Через 21 день, когда зверьки находятся в состоянии общего истощения, им ежедневно 7 раз дают испытуемое соединение. В день после последнего введения определяют прирост массы опухоли, прирост массы остова, массу жировой ткани, концентрацию глюкозы и острого фазового реагента ИКБ (иммуносупрессивного кислотного белка) в сыворотке. Как видно из Таблицы 4 (см. в конце описания), мыши, получавшие носитель, были ненормальны с точки зрения общего истощения, характеризующегося такими параметрами, как: масса жировой ткани, содержание в сыворотке глюкозы и ИКБ, в то время как лечение соединением примера 13 подавляет рост опухоли и ведет к улучшению параметров общего истощения.
Токсичность (ЛД50) представительных соединений (примеры 13, 14 и 17) настоящего изобретения выявлялась при пероральном введении ежедневно в течение 21 дня на мышах. Характерные значения ЛД50, полученные в таких опытах, составляют более 500 мг/кг/день.
Суточная дозировка больному N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ настоящего изобретения может меняться в зависимости от массы и состояния больного, но, как правило, находится в интервале 0,5-500 мг на 1 кг массы, предпочтительно 2-200 мг. Следует отметить, что для соединений настоящего изобретения можно ожидать в 3-5 раз более высокой активности при лечении человека по сравнению с соединениями, раскрытыми в патенте США 4966891, если эту активность рассматривать с точки зрения Cмакс и ППК для 5'-ДФУР после перорального введения соединений настоящего изобретения обезьяне. По той же причине можно ожидать, что соединения настоящего изобретения покажут достаточную активность при дозировках, в 3-5 раз более низких по сравнению с дозировками соединений указанного патента США. Настоящим изобретением может быть получен фармацевтический препарат с высоким уровнем безопасности.
Нижеследующие примеры предназначены для более подробной иллюстрации настоящего изобретения, но ни в коей мере для ограничения его объема.
Ссылочный пример. Получение исходных соединений
Получение 2',3'-ди-О-ацетил-5'-дезокси-5-фторцитидина
(а) Из 5'-дезокси-5-фторцитидина
В сухом пиридине (1,3 мл) растворяют 5'-дезокси-5-фторцитидин (50 мг). К раствору при перемешивании при 0oC добавляют уксусный ангидрид (39 мл). Реакционную смесь перемешивают 3 часа при 0oC. После удаления при пониженном давлении растворителя остаток распределяют между этилацетатом и охлажденной льдом водой. Этилацетатный слой сушат над сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле с элюированием смесью дихлорметан-метанол (9:1) и после перекристаллизации из изопропанола получают 37 мг 2',3'-ди-О-ацетил-5'-дезокси-5-фторцитидина, т.пл. 191,5- 193oC, ББА-МС m/z 330 (MH+).
(б) Из 5-фторцитозина и 1,2,3-три-O-ацетил-5-дезокси- β -D-рибофуранозы
Раствор иодида натрия (3,6 г) и хлорметилсилана (794 мл) в сухом ацетонитриле (15 мл) перемешивают молекулярными ситами 4A (200 мг) при 0oC в течение 5 минут (при перемешивании осаждается бесцветный хлорид натрия). Добавляют 1,2,3-три-O-ацетил-5-дезокси- β -D-рибофуранозу (2,0 г) и смесь перемешивают при 0oC в течение 30 минут. Затем добавляют при 0oC свежеприготовленный из 5-фторцитозина (1,12 г) раствор триметилсилилованного 5-фторцитозина в сухом ацетонитриле (5 мл) и продолжают перемешивание в течение 3 часов при комнатной температуре. Смесь фильтруют, фильтрат концентрируют в вакууме и остаток распределяют между дихлорметаном и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Водный слой экстрагируют смесью CH2Cl2/MeOH (10: 1). Объединенные органические слои сушат над безводным сульфатом натрия и испаряют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на силикагеле с применением в качестве элюента смеси CH2Cl2/MeOH (10:1) с последующей рекристаллизацией из изопропанола с получением 1,24 г 2',3'-ди-O-aцетил-5'-дезoкcи-5-фтopцитидинa.
Пример 1
Получение 2',3'-ди-O-aцетил-5'-дезoкcи-5-фтор-N4(пpoпoкcикaрбoнил)- цитидина
К раствору 2',3'-ди-O-aцетил-5'-дезoкcи-5-фтopцитидинa (2 г) CH2Cl2 (15 мл) и сухом пиридине при перемешивании и охлаждении в бане со льдом по каплям добавляют n-пропилхлорформат (957 мл). После перемешивания в течение 30 минут при комнатной температуре смесь испаряют досуха при пониженном давлении. Остаток распределяют между эфиром и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Органический слой промывают рассолом, сушат над безводным сульфатом натрия и фильтруют.
Испарением фильтрата получают 2', 3'-ди-О-ацетил-5'-дезокси- 5-фтор-N4-(пропоксикарбонил)цитидин (2,5 г)> Е1-МC m/z 415 (М+). 1H ЯМР (ДМСО-d6) δ : 0,92 (3H, т, J = 7,3 Гц), 1,37 (3H, д, J = 6,3 Гц), 1,63 (2H, секс, J = 7,3 Гц), 4,06-4,14 (3H, м), 5,11 (1H, т, J = 6,3 Гц), 5,47 (1H, дв. д. J = 4,6 и 6,3 Гц), 5,81 (1H, д, J = 4,6 Гц), 8,31 (1H, ш. с), 10,63 (1H, ш. с).
Нижеприведенные соединения (см. табл. 5) получены по методике, аналогичной методике примера 1 (R1 и R2 принимают значения, указанные для общей формулы (I)). Соединение примера 9 получено из известного 2',3'-ди-O-бензoил-5'-дезoкcи-5-фтopцитидина (патент США 4966891) по методике, аналогичной методике примера 1.
Пример 10
Получение 5'-дезокси-5-фтор-N4-(пропоксикарбонил)цитидина
К раствору 2', 3'-ди-О-ацетил-5'-дезокси-5-фтор-N4-(пропоксикарбонил) цитидина (2,5 г) в CH2Cl2 (17 мл) при перемешивании и охлаждении в бане со льдом по каплям прибавляют 1 н. NaOH (17 мл). После перемешивания 1 ч при 0oC к смеси добавляют MeOH (0,9 мл). Добавлением концентрированной HCl в реакционной смеси устанавливают pH 6 и слои разделяют. Водный слой экстрагируют смесью растворителей CH2Cl2-MeOH (95:5) (40 мл х 10). Соединенные органические слои сушат над безводным сульфатом натрия и фильтруют. Раствор испаряют и кристаллизацией из этилацетата получают 5'-дезoкcи-5-фтop-N4-(пропоксикарбонил)цитидин (1,6 г, выход 79,8%), т. пл. 125-126,5oC. Е1-МС m/z 331 (M+).
Нижеприведенные соединения (см. табл.6) получены по методике, аналогичной методике примера 10 (R1 и R2 принимают значения, указанные для общей формулы (I)).
Пример 19
Получение N4-(циклогексилоксикарбонил)-5'-дезокси-5-фторцитидина
В 20 мл сухого пиридина растворяют 5'-дезокси-5-фторцитидин (2,5 г), к раствору по каплям при 0oC добавляют триметилсилилхлорид (3,4 мл) и смесь перемешивают 30 мин при комнатной температуре. Одной порцией при 0oC к реакционной смеси добавляют циклогексилхлорформат. После перемешивания смеси 1 час при комнатной температуре пиридин испаряют при пониженном давлении. Остаток затем распределяют между насыщенным водным раствором NaHCO3 и эфиром. Органический слой промывают рассолом, сушат над безводным MgSO4 и концентрируют при пониженном давлении. К остатку добавляют лимонную кислоту (2 г) и метанол (50 мл). Смесь перемешивают примерно сутки при комнатной температуре. После удаления растворителя при пониженном давлении остаток растворяют в смеси CH2Cl2-MeOH (95: 5) и нейтрализуют водным раствором NaOH. Органический слой сушат над безводным Na2SO4 и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на силикагеле с применением в качестве элюента смеси CH2Cl2-MeOH (20:1) и после перекристаллизации из этилацетата получают N4-(циклогексилоксикарбонил)-5'-дезокси-5-фторцитидин (3,47 г, выход 92%), т.пл. 134 - 136oC. ББА-МС m/z 372 (MH+).
Нижеприведенные соединения (см. табл. 7) получены по методике, аналогичной методике примера 19 (R1 и R2 принимают значения, указанные для общей формулы (I)).
Пример 28
Получение 5'-дезокси-5-фтор-N4-(неопентилоксикарбонил)-цитидина
В 15 мл сухого дихлорметана растворяют 5'-дезокси-2',3'-ди-О- ацетил-5-фторцитидин (1,5 г) и сухой пиридин (0,74 мл). К полученной смеси при 0oC по каплям прибавляют толуольный раствор неопентилхлорформата (3 экв.) и перемешивают 1 ч при комнатной температуре. После удаления растворителя при пониженном давлении остаток распределяют между эфиром и насыщенным водным раствором карбоната натрия. Органический слой последовательно промывают водой и рассолом, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрированием при пониженном давлении получают сырой 2',3'-ди-О-ацетил-5'-дезокси-5-фтор-N4-(неопентилоксикарбонил) цитидин в виде бледно-желтого масла. Сырой продукт растворяют в этаноле (15 мл) и охлаждают в бане со льдом. При температуре ниже 15oC по каплям прибавляют 1 н. водный раствор гидроокиси натрия. По окончании прибавления реакционную смесь нейтрализуют при 0oC конц. соляной кислотой. Раствор концентрируют при пониженном давлении и концентрат распределяют между водой и смесью растворителей CH2>Cl2-MeOH (95:5). Водный слой вновь экстрагируют десять раз смесью CH2Cl2-MeOH (95:5) по 20 мл каждый раз. Все органические слои объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Очисткой остатка хроматографией на колонке с силикагелем с применением в качестве элюента смеси CH2Cl2-MeOH (20: 1) в виде аморфного порошка 1,37 г (выход 84%) 5'-дезокси-5-фтор-N4-(неопентилоксикарбонил)-цитидина. ББА-МС m/z 360 (MH+). 1H-ЯМР (ДМСО-d6) δ : 0,93 (9H, с), 1,31 (3H, д, J = 6,3 Гц), 3,68 (1H, к, J = 5,9 Гц), 3,81 (2H, ш. с), 3,87-3,92 (1H, м), 4,04-4,09 (1H, м), 5,05 (1H, д, J = 5,9 Гц), 5,41 (1Н, ш. д, J = 5,3 Гц), 5,67 (1H, дв. д, J = 1,3 и 3,6 Гц), 8,04 (1H, ш. с), 10,53 (~ 1H, ш. с).
Пример 29
5'-Дезокси-N4[(3,3-диметилбутоксикарбонил]-5-фторцитидин
Заглавное соединение получено по методике, аналогичной методике примера 28, за исключением того, что в качестве ацилирующего средства используют 3,3-диметилбутилхлорформат, аморфный порошок (выход 71%), ББА-МС m/z 374 (MH+). 1H-ЯМР (ДМСО-d6) δ : 0,93 (9H, с), 1,31 (3H, д, J = 6,3 Гц), 1,55 (2H, т, J = 7,3 Гц), 3,68 (1H, к, J = 5,9 Гц), 3,84-3,93 (1H, м), 4,03-4,09 (1H, м), 4,15 (2H, т, J = 7,3 Гц), 5,05 (1H, д, J = 5,9 Гц), 5,4 (1H, ш. д, J = 5,3 Гц), 5.67 (1H, дв. д, J = 1,3 и 4 Гц), 8 (1H, ш. с), 10,53 (~1H, ш. с).
Нижеследующие примеры иллюстрируют фармацевтические препараты, содержащие соединение настоящего изобретения.
Пример А
Замкнутые желатиновые капсулы, каждая из которых содержит нижеперечисленные компоненты, получают известными методами
N4-(Бутоксикарбонил)-5'-дезoкcи-5-фтopцитидин - 100 мг
Зерновой крахмал - 20 мг
Двуокись титана - 385 мг
Стеарат магния - 5 мг
Пленка - 20 мг
ПЭГ 6000 - 3 мг
Тальк - 10 мг - 543 мг
Пример B
Таблетки, каждая из которых содержит нижеперечисленные компоненты, получают известными методами.
N4-(Бутоксикарбонил)-5'-дезoкcи-5-фтopцитидин - 100 мг
Лактоза - 25 мг
Зерновой крахмал - 20,2 мг
Гидроксипропилметилцеллюлоза - 4 мг
Стеарат магния - 0,8 мг
Пленка - 10 мг
ПЭГ 6000 - 1,5 мг
Тальк - 4,5 мг - 166 мг
Пример C
Сухие парентеральные дозировочные формы приготовляют известными методами.
(1) В общей сложности 5 г N4-(Бутоксикарбонил)-5'- дезoкcи-5-фтopцитидина растворяют в 75 мл дистиллированной воды, раствор подвергают бактериологическому фильтрованию и затем в асептических условиях разливают по сосудикам. Затем раствор сушат вымораживанием с получением в каждом сосудике по 500 мг стерильного сухого твердого вещества.
(2) Чистый N4-(бутоксикарбонил)-5'-дезокси-5-фторцитидин в количестве 500 мг на сосудик или ампулу герметизируют в сосуде и стерилизуют нагреванием.
Указанные сухие дозировочные формы перед употреблением восстанавливают добавлением приемлемого стерильного водного растворителя, такого как вода для инъекций, или изотонического раствора хлорида натрия, или 5%-ной декстразы для парентерального введения.
Формула изобретения: 1. N-оксикарбонилзамещенные 5'-деокси-5-фторцитидины общей формулы I

в которой R1 представляет насыщенный или ненасыщенный нормальный или разветвленный углеводородный радикал, в котором число атомов углерода в самой длинной прямой цепи составляет три-семь, или радикал формулы -(CH2)n-Y, где n = 0 - 4; если Y представляет циклогексил, или n = 2 - 4, если Y представляет низшую алкокси C1-C4 группу или фенил;
R2 представляет атом водорода или ацил, легко гидролизуемый в физиологических условиях.
2. Соединения по п. 1, отличающиеся тем, что R1 выбирают из группы, включающей: н-пропил, н-бутил, изобутил, 2-этилбутил, 3,3-диметилбутил, н-пентил, изопентил, неопентил, н-гексил, н-гептил, аллил, циклогексил, циклогексилметил, 2-циклогексилэтил, 3-циклогексилпропил, 2-метоксиэтил, фенэтил, 4-фенилбутил.
3. Соединения по п.1, отличающиеся тем, что выбраны из группы, включающей:
5'-деокси-5-фтор-N4-(пропоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(гексилоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(изопентилоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(неопентилоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-N4[(3,3-диметилбутокси)карбонил]-5-фторцитидин,
5'-деокси-N4[(2-этилбутил)оксикарбонил]-5-фторцитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-[2-фенилэтокси)карбонил]цитидин,
2',3'-ди-О-ацетил-5'-деокси-5-фтор-N4-(пропоксикарбонил)-цитидин,
2',3'-ди-О-ацетил-5'-деокси-5-фтор-N4-(пентилоксикарбонил)-цитидин,
2',3'-ди-О-ацетил-N4-(бутоксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидин,
2',3'-ди-О-ацетил-5'-деокси-5-фтор-N4-(изопентилоксикарбонил)-цитидин,
2',3'-ди-О-бензоил-N4-(бутоксикарбонил)-5'деокси-5-фторцитидин,
2',3'-ди-О-ацетил-5'-деокси-5-фтор-N4-(гексилоксикарбонил)-цитидин,
2', 3'-ди-О-ацетил-5'-деокси-N4-[(2-этилбутил)оксикарбонил] -5-фторцитидин,
2', 3'-ди-О-ацетил-N4-[(циклогексилметокси)карбонил] -5'-деокси-5-фторцитидин,
2',3'-ди-О-ацетил-5'-деокси-5-фтор-N4-[(2-фенилэтокси)карбонил]цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-[(2-пропилпентил)оксикарбонил]цитидин,
5'-деокси-N4-[(2-этилгексил)оксикарбонил]-5-фторцитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(гептилоксикарбонил)цитидин,
N4-[(2-циклогексилэтокси)карбонил]-5'-деокси-5-фторцитидин,
N4-[(3-циклогексилпропил)оксикарбонил]-5'-дезокси-5-фторцитидин,
N4-(циклогексилоксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-[(3-фенилпропил)оксикарбонил]цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-[(2-метоксиэтокси)карбонил]цитидин,
особенно N4-(бутоксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидин и
5'-деокси-5-фтор-N4-(пентилоксикарбонил)цитидин.
4. Соединения по пп. 1, 2 или 3, обладающие противоопухолевой активностью.
5. Соединение по пп. 1 - 3 или 4, представляющее собой 5'-деокси-5-фтор-N4-(пентилоксикарбонил)цитидин с противоопухолевой активностью.
6. Фармацевтический препарат, обладающий противоопухолевым действием, содержащий активный компонент и фармацевтически приемлемый носитель, отличающийся тем, что в качестве активного компонента он содержит соединение общей формулы I по п.1, или гидрат, или сольват этого соединения.